禽网状内皮组织增殖病病毒荧光PCR检测试剂盒(REV)北京现

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禽网状内皮组织增殖病病毒荧光PCR检测试剂盒(REV)北京现货促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多禽网状内皮组织增殖病病毒荧光PCR检测试剂盒(REV)等动物疫病PCR检测试剂盒产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：禽网状内皮组织增殖病病毒荧光PCR检测试剂盒(REV)北京现货促销
规格：48次/盒
等级：科研试剂
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博

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·猪蓝耳病病毒(PRRSV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA405
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对猪蓝耳病病毒通用特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用一步法荧光RT-PCR技术对猪蓝耳病病毒RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中猪蓝耳病病毒通用的探针报告基团为FAM。

二、用途：
本试剂盒适用于猪病料、鼻咽拭子、血液等样本中的猪蓝耳病病毒(PRRSV)特异性检测，适用于猪蓝耳病病毒(PRRSV)感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
猪蓝耳病病毒通用荧光qRT-PCR反应液(PRRSV-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(PRRSV-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-80℃，但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入无菌的干燥玻璃管，室温(22-25℃)放置30-60min，血标本可自发完成凝集析出血清，或直接使用水平离心机，3000rpm离心5min，吸取上层血清，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，5-10min后即可分离出血浆，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品：在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水，剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中，6000rpm离心20s，取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品：称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮)，再加1mL生理盐水研磨至无块状物，然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(PRRSV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PRRSV-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃ 延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX 参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(PRRSV-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明PRRSV核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明PRRSV核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行PRRSV qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明PRRSV核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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DL-丙交酯 TNBS 95-96-5
002006 EDTA抗凝羊血 100ml|500ml
叶绿素铜*盐 4′-Chloroacetanilide 11006-34-1
次碳酸铋 1,2-IND 5892-10-4
HC0133 擦镜纸
乙酸*溶液(3mol/L,pH4.8,无菌)   500ml
BTN131044 辛甲基β葡糖苷 Octyl-β-Glucoside
ARB12139 大鼠生长激素(GH)酶免分析 Rat growth hormone,gh ELISA KIT
1390-65-4 洋红 Carmine
J0201 兔抗牛血清白蛋白抗血清 1ml/10ml
多聚甲醛-戊二醛混合固定液(4%/0.5%)   500ml
L0202 小鼠IgM类单克隆抗体腹水纯化试剂盒 
ARB12907 小鼠白介素1受体拮抗剂(IL1RA)elisa检测 Mouse interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA KIT
ARB12940 小鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)Elisa方法检测 Mouse platelet-derived growth factor ab,pdgf-ab ELISA KIT
L-甘-甘-异白三肽 Nigrosine water soluble 69242-40-6
ARB10905 人抗腮腺管抗体(Anti-pArotid duct Ab)免费代测 Human anti-pArotid duct antibody ELISA KIT
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ARB11979 大鼠D-乳酸脱*酶(D-LDH)检测服务 Rat d-lactate dehydrogenase,d-ldh ELISA KIT
1400-61-9 Nystatin    制霉菌素
ARB10985 人卵泡抑素(FS)elisa检测 Human follistatin,fs ELISA KIT
*酚AS-TR磷酸盐 Dcdp 2616-72-0
BTN130531 组织培养专用蛋白酶抑制剂 Protease Inhibitor for Tissue Culture
ARB11213 人细胞色素P450c21B/21-羟化酶(CYP21B)免费代测 Human cytochrome p450c21/21-hydroxylase,cyp21b ELISA KIT
001008 兔血清
DNA Marker（300-5000bp） 100次
ARB10471 人白介素10(IL-10)含量测试 Human interleukin 10,IL-10 ELISA KIT
HC0111 透析袋MD44(8000-14000)
BTN3670 动物DNAOUT Animal DNAOUT
BL1337 dNTPs Mix(25mM each)
ARB13816 豚鼠载体蛋白B(Apo-B)定量分析 
F030621 FITC标记兔抗山羊IgG抗体 Rabbit Anti-Goat IgG*FITC
虎红 Merrifield resin 632-69-9

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