北京现货呼吸道合胞病毒B亚型荧光PCR检测试剂盒(RSV)库

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京现货呼吸道合胞病毒B亚型荧光PCR检测试剂盒(RSV)库存是高品质的病毒PCR检测试剂盒产品，由北京百奥莱博供应，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多呼吸道合胞病毒B亚型荧光PCR检测试剂盒(RSV)等病毒PCR检测试剂盒产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京现货呼吸道合胞病毒B亚型荧光PCR检测试剂盒(RSV)库存
品牌：百奥莱博
编号：SYA173
等级：科研试剂
规格：48次/盒

我公司的北京现货呼吸道合胞病毒B亚型荧光PCR检测试剂盒(RSV)库存，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·马铃薯转基因Cry3c单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA285
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·A组链球菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA042
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·禽流感病毒(AIV)通用单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA534
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·玉米特异性基因Invertase单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA289
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·结核分枝杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA046
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪西尼罗河热病毒(WNFV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA417
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒

·土拉弗朗西斯菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA132
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·汉坦病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA244
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·大肠杆菌致贺毒素(Stx1)/(Stx2)双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA107
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪流行病腹泻病毒(PEDV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA429
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒

·痢疾杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA023
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪流感抗体ELISA检测试剂盒
编号：SYA641
等级：科研实验专用
规格：192次/盒

·呼吸道合胞病毒(RSV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA171
等级：科研实验专用
规格：48次/盒


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·博卡病毒(HBocaV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA184
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·志贺氏菌单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA256
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·登革热Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ病毒四重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA252
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·单增李斯特氏菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA004
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
本试剂盒适用于增菌培养物、疑似病料及食品中单增李斯特氏菌(Lm)的检测，其检测结果仅供参考。

本试剂盒用一对单增李斯特氏菌特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用一步法荧光PCR技术对单增李斯特氏菌DNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染

者的病原学诊断。本试剂盒中单增李斯特氏菌的探针报告基团为FAM。

试剂盒组成：

 

 

组份	数量	规格
单增李斯特氏菌荧光qPCR反应液(Lm-qPCR MIX)	1 管	720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
阳性对照(Lm-PTC)	1管	50μL/管

储存条件：-20℃，有效期6个月。

使用方法：

一、样品采集：
➤食品样品：样品的采集与预培养按照《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》(GB 4789.30-2010)要求进行。
➤粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
➤病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。

二、DNA提取：
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的

商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
➤液体培养物：取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中，8000rpm离心3min，尽量吸弃上清，加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm

离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
➤固体培养物：挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
➤粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃

恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
➤其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR

反应。
 注：建议采用相关标准方法进行前增菌，并按照6.2.1方法进行提取。阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。

由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

三、检测步骤：
1．试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Lm-qPCR MIX)，室温融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

 

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
荧光PCR反应液	15µL	N×15µL

计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品/阴

性对照(NTC)/阳性对照(Lm-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
2．qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

 

	1循环	50℃ for 2 min
预变性	1循环	95℃ for 10 min
PCR扩增	40循环	95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

四、结果分析：
1．结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2．试验成立判定
➤阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(Lm-PTC)：均产生扩增曲线，且Ct值≤30。
➤以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
3．结果判定
➤在试验成立的条件下，Ct值≤30的样本为阳性，表明Lm核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明Lm核酸阴性。
➤如果30＜Ct值≤35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行Lm qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，则判为样本阳性，表明Lm核酸阳性；否则判为样本阴性。

五、注意事项：
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


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