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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
863
- 英文名:
Apoptosis detection kit (Annexin V-FITC probe)
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI双染)报价在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI双染)报价
规格:25次|50次
编号:ALH608
品牌:百奥莱博
英文名:Apoptosis detection kit (Annexin V-FITC probe)
产地:国产|进口
本试剂盒以标记了FITC的Annexin Ⅴ作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。Annexin Ⅴ是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝*酸(Phosphatidylserine,PS)高亲和力特异性结合。
Propidium iodide(PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核红染。将Annexin Ⅴ与PI匹配使用,可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞以及死细胞区分开来。
试剂盒组份:
Annexin V-FITC(20ug/ml)————————500ul
Binding Buffer—————————————20ml
Propidium Iodide(PI)(50ug/ml)—————125ul
注意事项
1. 为保证得到理想的实验结果,在使用此试剂盒之前请认真阅读该注意事项;
2. 试剂(尤其是小瓶装的试剂)在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落;
3. Propidium iodide(PI)能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用;
4. 此试剂盒仅供科研使用,不宜用于临床诊断;
5. 本试剂盒中提供的PBS 为随试剂赠送,并非试剂盒的真正组成成分;细胞的洗涤同常规方法。
储存条件:2~8℃,有效期12个月。
本品别名:细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI双染)|凋亡细胞检测试剂盒
关于北京细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI双染)报价的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·尿液DNA提取试剂盒
编号:ALH180
英文名称:Urine DNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒专门用于从尿液中提取基因组DNA的产品,提取的DNA可直接用于PCR反应。
尿液中DNA来自于尿道中脱落的细胞,用尿液DNA进行分子生物学基础研究和临床诊断有很多特殊的优点:
1)尿液收集物是非介入、无创伤性的。
2)从尿液中提取DNA要比从血液中提取DNA更加简单。
试剂盒组份(50次):
缓冲液UB————————————10ml
结合液CB————————————15ml
抑制物去除液IR—————————25ml
漂洗液WB————————————15ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
蛋白酶K————————————20ml
吸附柱AC————————————50个
收集管(2ml)——————————50个
产品特点:
1. 操作简单,整个过程室温操作约20分钟,适合大规模样品处理。
2. DNA产率女性一般为50~200 ng/mL尿液,男性一般为3~50 ng/mL尿液。
3. 所提取的DNA纯净,可直接用于PCR、DNA甲基化鉴定、癌症检测等。
4. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
5. 性价比高,质量和国外同类产品相当,但价格更便宜。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备异丙醇。
3. 开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。
储存条件:室温,有效期12个月。
·柱式质粒小量提取试剂盒
编号:ALH075
英文名称:Plasmid rapid extraction kit (centrifugal column)
规格:100次|200次
本试剂盒适用于小规模质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(100次):
RNaseA(10mg/ml)————————250μl
溶液P1—————————————25ml
溶液P2—————————————25ml
溶液P3—————————————35ml
漂洗液WB————————————25ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
吸附柱和收集管(2ml)———————100套
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.快速、方便,不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好, 可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
注意事项
1. 本试剂盒适用菌株为XL-1 Blue和DH5α等核酸酶含量低缺陷型菌株。所用菌株为JM系列、HB101等endA菌株或野生型菌株,核酸酶含量丰富,应购买本公司生产的高纯度质粒小量快速提取试剂盒。
2. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 溶液P3中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。一般高拷贝质粒,建议接种单菌落于1.5~4.5ml加合适抗生素的LB培养基, 过夜培养14~16个小时,可提取出多达20μg的纯净质粒。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒,应适当加大菌体使用量,使用5~10ml过夜培养物,同时按比例增加P1、P2、P3的用量,其它步骤相同。
5. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
6. 质粒DNA确切分子大小, 必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道其确切大小。
7. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
北京细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI双染)报价关键词:Annexin V-FITC/PI双染,细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI双染),凋亡细胞检测试剂盒
·基因组DNA去污剂
编号:ALH602
英文名称:DNA eraser
规格:50ml
本品采用非酶法清除RNA样品中的基因组DNA污染。每ml试剂处理~100μg RNA样品。很多用户在提取RNA的时候由于操作因素或者RNA抽提试剂质量问题,造成所得到的RNA样品中混杂基因组污染,在普通或者变性电泳的时候直接肉眼可见程度不一的DNA污染杂带。即使用市售的RNase-free的DNase消化DNA也不容易清除完全,而且常常导致RNA降解。本品不含DNA酶,在强烈抑制RNA酶的条件下彻底清除RNA样品中的污染DNA杂带和蛋白质污染,同时进一步纯化RNA。最后通过异丙醇沉淀回收的RNA纯度极高,完全不影响原有RNA质量和下游应用。
·血液miRNA提取试剂盒
编号:ALH071
英文名称:Blood microRNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒采用独特的裂解液迅速直接裂解全血(液体样本)和灭活细胞RNA酶,强烈有机抽提去除蛋白和DNA,RNA包括微小分子RNA吸附于离心柱内特殊硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质进一步去除, 最后低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15¬-30核苷酸左右大小RNA(包括siRNA和miRNA)的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜不能有效吸附回收,酚/胍抽提和乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA,对于血液样本更是由于其自身特点更难提取。本试剂盒的出现很好的解决了这一问题。
产品组分:
Lysis buffer———————50ml
70%乙醇——————————9ml
Wash Solution 1——————12ml
Wash Solution 2/3—————10ml
RNase-free H2O——————10ml
吸附柱和收集———————50套
microRNA吸附柱和收集管——50套
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。
3.独特的裂解液配方,可直接裂解全血,不需要先裂解去除红细胞。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RNAi,RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项:
1. 第一次使用前请先在70%乙醇、Wash Solution 1瓶和Wash Solution 2/3瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
2. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇,*仿,一次性注射器,研钵。
4. Lysis buffer 和Wash Solution 1含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 预防RNase 污染,应注意以下几方面:
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料器皿可在0.5M NaOH 中浸泡10 分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)
6. RNA 纯度及浓度检测:
完整性:RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40。
储存条件:室温,有效期6个月。(lysis buffer需4℃避光保存)
北京细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI双染)报价关键词:Annexin V-FITC/PI双染,细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI双染),凋亡细胞检测试剂盒
·植物大量DNA快速提取试剂盒(CTAB法)
编号:ALH603
英文名称:Plant DNA Rapid Extraction Kit
规格:10次
本试剂盒适用于快速大量提取植物基因组DNA。改进的经典CTAB植物DNA抽提液内(添加多种针对植物特点的多糖、多酚去除成份)迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,*仿抽提后通过离心清除多糖、多酚和蛋白质,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 进一步将多糖、多酚和细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(10次):
裂解液PL————————100ml
结合液PQ————————30ml×2
抑制物去除液IR—————100ml
漂洗液WB————————25ml×2
洗脱缓冲液EB——————15ml×2
吸附柱AC————————10个
收集管(2ml)—————10个
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在1小时内完成。
4.数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达30 kb -50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到9,000xg,可容纳50ml离心管的台式离心机。
2. 开始实验前将需要的水浴先预热到65℃备用。
3. 需要自备*仿/异戊醇(体积比24:1混合)、无水乙醇和β-巯基乙醇。
4. 结合液PQ 和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 不同来源的植物组织材料中提取DNA 的量会有差异,一般100mg新鲜组织典型产量可达3-25μg。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA, 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5, pH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在-20℃。DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
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文献和实验示例: Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h,FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后,流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞,Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况,检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法: 1) 选中所有颗粒,将FSC
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
Q:Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A:Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,核染料 PI 或 7-AAD
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