植物大量RNA提取试剂盒 RNA纯化

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

植物大量RNA提取试剂盒 是高品质的RNA纯化产品，由北京百奥莱博供应，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多植物大量RNA提取试剂盒等RNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：植物大量RNA提取试剂盒 RNA纯化
规格：10次
品牌：百奥莱博
编号：ALH039
英文名：Total RNA Extraction Kit From Plant Massive Cell & Tissue
本试剂盒适用于植物组织细胞总RNA大量提取，在无*酚、*仿RNA快速提取技术基础上，又采取基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留，得到的RNA一般不需要DNase消化，可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，植物RNA助提剂帮助结合多糖多酚并通过离心去除，然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱，基因组DNA被清除而RNA被选择性洗脱滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

本试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚，*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速，简捷，单个样品操作一般可在60分钟内完成。
4.独特的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
5.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。

试剂盒组份：

 

组份	10次
裂解液RLT	100 ml
裂解液RLT Plus	50ml
去蛋白液RW1	120 ml
漂洗液RW	25ml×2
RNase-freeH2O	10ml
PLANTbalb	10ml×2
基因组DNA 清除柱和收集管	10套
吸附柱和收集管	10套

注意事项：
1. 所有的离心步骤均可在室温完成，使用可容纳50ml 离心管的离心机。
2. 需要自备乙醇，一次性注射器（可选），研钵。
3. 裂解液RLT 和裂解液RLT Plus和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，需要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 植物组织裂解是否充分直接影响到RNA 提取的质量和产量，本试剂盒中提供的裂解液RLT，主要成分为异硫*酸胍，适用于大多数植物组织的裂解，但有些植物组织（例如玉米的乳白色胚乳）或丝状真菌，由于次级代谢产物较特殊，异硫*酸胍使样品产生固化，导致RNA 无法提取，此时可以向我们索取另一种裂解液RLC，将解决该问题。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本试剂盒由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜，在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留（一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见）影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时：
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup),请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱上进行DNase I处理。请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
6. RNA 纯度及浓度检测:
完整性：RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件：胶浓度1.2%；0.5×TBE 电泳缓冲液；150v，15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA，电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb，分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍，否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA，OD260/OD280 读数（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间，在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间，但这并不表示RNA 不纯。
浓度：取一定量的RNA 提取物，用RNase-free 水稀释n 倍，用RNase-free 水将分光光度计调零，取稀释液进行OD260, OD280 测定，按照以下公式进行RNA浓度的计算：终浓度（ng/μl）= (OD260)×(稀释倍数n)×40

储存条件：室温，有效期6个月。

本品别名：大量植物RNA提取试剂盒(含DNA清除柱)|植物大量RNA提取试剂盒|植物RNA大提试剂盒

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SSPE缓冲液(20×,pH7.4)   500ml
SJ0289 FAD Na2  核黄素腺嘌呤二核苷酸二*盐
ARB13932 猪单核细胞增多性李斯特菌素O(LLO)Elisa分析 Porcine listeriolysin o,llo ELISA KIT
三(2-羧乙基)膦盐*(代"酸")盐 Glutathione Reductase from baker"s yeast 51805-45-9
Weil髓鞘染色液   4×50ml
9039-53-6 尿激酶 Urolinase
ARB11445 人核糖核酸酶(RNASE)Elisa分析 Human ribonuclease,rnase ELISA KIT
ARB14227 鸡新城疫病毒抗体(NDV-Ab)Elisa方法检测 
ARB11368 人前列腺素D合成酶(PGDS)代做ELISA实验 Human prostaglandin d synthase,pgds ELISA KIT
TMB显色液(沉淀型，组化或膜HRP显色用) 100ml
ARB12289 大鼠抗内皮细胞抗体(AECA)酶标法分析 Rat anti-endothelial cell antibody,aeca ELISA KIT
BOC-D-谷*酸 DNJ 34404-28-9
L-来苏糖 CHAPS 1949-78-6
詹纳斯绿B染色液  0.2%|0.5% 10ml
PY08-066  PH7.0*化*蛋白胨缓冲液 225ml  20瓶/箱，用于样品的稀释液
嗪草酮 Cinnamamide, Predominantly trans 21087-64-9
79-06-1 丙*(代"烯")酰胺 Acrylamide
PY08-038  肠道菌增菌肉汤 10ml  10支/盒，用于肠道菌的增菌培养，特别用于阪崎肠杆菌的选择性增菌培养
ARB10671 人血管紧张素Ⅱ受体IA型(AgtrIA)ELISA代测服务 Human angiotensin Ⅱ receptor type ia,agtria ELISA KIT
ARB10282 人上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)检测服务 Human epithelial neutrophil activating Peptide 78,ena-78 ELISA KIT
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·大量细菌基因组DNA提取试剂盒
编号：ALH139
英文名称：Bacterial massive genomic DNA Extraction Kit
规格：20次|50次
本试剂盒用于快速的从各种细菌中大量提取基因组DNA。细菌样品加入细胞核裂解液(或者通过溶菌酶或者其它一些酶帮助裂解细胞壁后)，首先在强去污剂作用下裂解细胞释放出基因组DNA，接着加入RNase A去除RNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。

试剂盒组份（20次）：
细胞核裂解液———————90ml×2
蛋白沉淀液————————60ml
DNA溶解液————————10ml
RNaseA(10mg/ml)—————500μl

产品特点：
1.不需要使用有毒的*酚等试剂。
2.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
3.结果稳定，产量高，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50 kb -150kb，可直接用于构建文库，PCR，Southern-blot和各种酶切反应。

注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到3,000xg，可容纳50ml 离心管的台式离心机。
2. 用户需自备异丙醇、70％乙醇、0.5M EDTA 和Lysozyme（溶菌酶）(用于革兰氏阳性菌)、lysostaphin(用于某些难裂解的革兰氏阳性菌)、水浴箱。
3. 开始实验前将需要的水浴先预热好备用。
4. 本试剂盒为溶液型，可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的细菌细胞量，请联*(代"系")我们索取其它处理量的操作手册。

储存条件：室温，有效期12个月。


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·酵母基因组DNA大量提取试剂盒
编号：ALH156
英文名称：Yeast DNA Massive Extraction Kit
规格：10次
本试剂盒用于快速的从酵母中大量提取基因组DNA。在针对酵母细胞特点配制的酵母裂解液作用下， 酵母细胞被裂解释放出基因组DNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。

试剂盒组份：
酵母裂解液——————100ml×2
蛋白沉淀液——————70ml
DNA溶解液 ——————30ml

产品特点：
1.不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂。
2.快速，简捷，整个过程可在1个小时内完成。
3.结果稳定，产量高（比离心柱型的产量高一倍以上），OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50Kb-150kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。

操作步骤：
1. 吸取60ml-70ml 酵母培养物到一个100ml 离心管；2,500 x g 离心2 分钟，尽可能弃上清，必要时候可以用枪吸去。
2. 高速涡旋振荡，打散重悬酵母细胞团。
3. 加入20 ml 酵母裂解液，涡旋振荡混匀，或者用1 毫升的枪头反复吹打混匀。酵母细胞的重悬分散对下一步裂解非常重要，必须充分分散重悬。
4. 将裂解物放置在70℃水浴15-30 分钟。
如果产量低，可以适当提高水浴温度和延长水浴时间，中间可以涡旋振荡混匀几次帮助裂解。
5. 冰上至少5 分钟使回复到室温。
6. 在回复到室温的裂解物内加入6.8 ml 蛋白沉淀液后，在涡旋振荡器上高速连续振荡混匀25 秒。混匀后可能见到一些小的蛋白团块。冰浴5 分钟。
7. 2,500 x g(可根据需要调整加大离心力)离心5 分钟。这时应该可以见到管底蛋白沉淀，也可能见到一些蛋白沉淀漂浮在液体表面。
8. 小心缓慢吸取上清到一个新的100ml 离心管中，不要吸到沉淀。吸取上清时，注意不要吸到管底的和漂浮在液体表面的蛋白沉淀。如果不小心将蛋白沉淀转入新的离心管中，可再次离心2 分钟后取上清。
9. 加入等体积的室温异丙醇，颠倒30 次混匀或者直到出现絮状DNA 沉淀（或者白色浑浊沉淀）。
10. 2,500 x g 离心5 分钟(可根据需要调整加大离心力)，在管底可以见到白色的DNA沉淀块，倒弃上清。
11. 加入20ml 70％乙醇，颠倒几次漂洗DNA 沉淀，2,500 x g 离心2 分钟， 倒去上清（注意不要把DNA 沉淀倒掉了），倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇，还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇，空气晾干沉淀几分钟。注意不要干燥过头，否则DNA极其难溶；也不能残留太多乙醇，否则乙醇可能抑制下游如酶切反应。
12. 加入1-3ml DNA 溶解液重新水化溶解DNA 沉淀，轻弹管壁混匀，可以放置在65℃温育30-60 分钟（不要超过一小时），也可以在室温或者4℃放置过夜来重新水化DNA。期间不时的轻弹管壁帮助重新水化DNA。
13. 加入0.5-1ml RNase A（10mg/ml），颠倒混匀，37℃温育30－60 分钟去除残留RNA。该步骤主要作用为去除残留的RNA，如果残留RNA多，可以适当延长时间或者增加RNase A 用量。如果残留RNA 不影响实验，可略去该步骤。如果残留的RNA酶可能影响实验，也可以用等体积酚/*仿抽提去除，然后用标准的乙醇沉淀回收DNA。
14. DNA 可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。

储存条件：室温，有效期12个月。

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