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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
Secondary Antibody Dilution Buffer
- 库存:
263
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
100ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售北京现货Western二抗稀释液(国产,进口),我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货Western二抗稀释液(国产,进口)
产地:国产|进口
英文名:Secondary Antibody Dilution Buffer
品牌:百奥莱博
Western二抗稀释液可以用于Western时二抗
(secondary antibody)的稀释。经本Western二抗稀释液稀释的二抗可以在1-2周内重复使用3-5次。
按照每个二抗稀释10毫升计算,一个包装的Western二抗稀释液可以稀释10个或10次二抗。
保存条件: 4℃保存,一年有效。
注意事项: 本Western二抗稀释液经过滤除菌处理,使用过程中应尽量避免细菌污染。一旦启用后建议在一个月内
用完,如果发现有沉淀或细菌污染请弃用。
使用说明:参考所用的二抗的使用说明,以及一抗的质量和样品中目的蛋白的含量,按照适当比例例如1:1000、
1:500等比例稀释二抗。二抗稀释后即可直接用于Western。一次Western结束后,可以回收稀释的二抗,4℃保存,以用于下次的Western,通常在1-2周内可以重复使用3-5次。
除北京现货Western二抗稀释液(国产,进口)外,我公司正在打折促销以下产品:
·BCA蛋白定量试剂盒
编号:RFT057
规格:50次
● 试剂盒内容及保存:产品名称 包装 贮存方式
BCA试剂A 100 ml RT
BCA试剂B 3 ml RT
牛血清白蛋白(BSA)标准溶液(5 mg/ml) 2×1 ml -20℃
PBS溶液 10 ml 4℃
说明书 1份
● 储存条件和效期:试剂A和试剂B室温贮存;牛血清白蛋白标准溶液-20℃贮存;PBS溶液4℃贮存。本试剂盒有效期1年。
● 产品简介:
BCA蛋白浓度测定试剂盒的原理是蛋白质分子中肽键结构在碱性环境下能与Cu2+生产络合物,并将Cu2+还原成Cu+,而BCA试剂可以特异性地与Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物,并在562nm处有最大的光吸收值,该复合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可以根据吸收值的大小来测定蛋白的含量。
本试剂盒可以检测500个样品(使用微孔板)或50个样品(使用试管)。
● 产品特点:1. 灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml(在20-1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系),最小检测蛋白量达到0.2μg,待测样品体积为1-20μl。
2. BCA法测定蛋白浓度的最大优点是蛋白浓度的测定可以耐受高浓度的去垢剂,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20, 60, 80。但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,二硫苏糖醇低于1mM,β-巯基乙醇低于0.01%。
● 操作方法
BCA工作液配制:将试剂A和试剂B按照体积比50:1比例混合,配成BCA工作液。
如,取50ml 试剂A与1ml试剂B混合,配成51 ml BCA工作液。
注:BCA工作液室温可放置一周不失效。
微孔板测定程序:(工作范围20-2000 μg/ml)
1. 蛋白标准品配制:室温完全溶解蛋白标准品,取20μl 5mg/ml BSA蛋白标准溶液用PBS溶液稀释至100μl,使其终浓度为1.0 mg/ml。
2. 按照下表配制BSA标准测定溶液:编号 0 1 2 3 4 5 6 7 8
1 mg/ml BSA 标准溶液 μl 5 mg/ml BSA 标准溶液 μl
BSA标准溶液 μl 0 0.5 2.5 5.0 10 15 20 6 8
PBS 溶液 μl 20 19.5 17.5 15 10 5 0 14 12
BSA终浓度 μg/ml 0 25 125 250 500 750 1000 1500 2000
总体积 μl 20 μl
3. 将适当体积的待测样品加入到微孔板中,并用PBS补足到20 μl
4. 向微孔板中加入200 μl BCA工作液,混匀,37℃放置30分钟;
注:也可以室温放置2小时,或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或适当延长孵育时间。
5. 测定562 nm 处的吸光值,并记录读数;以不含BSA 的样品的光吸收值作为空白对照。
6. 以A562为纵坐标,BSA含量为横坐标,绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内,请稀释样品后重新测定。
试管测定程序:(工作范围20-1000 μg/ml)
1. 蛋白标准品配制:室温完全溶解蛋白标准品,取150μl 5mg/ml BSA蛋白标准溶液,加入600μl PBS溶液稀释至750μl,使其终浓度为1.0 mg/ml。
2. 按照下表配制BSA标准测定溶液:编号 0 1 2 3 4 5 6 7 8
1 mg/ml BSA 标准溶液 μl 5 mg/ml BSA 标准溶液 μl
BSA标准溶液 μl 0 2.5 12.5 25 50 75 100 30 40
PBS 溶液 μl 100 97.5 87.5 75 50 25 0 70 60
BSA终浓度 μg/ml 0 25 125 250 500 750 1000 1500 2000
总体积 μl 100 μl
3. 将适当体积的待测样品加入到试管中,并用PBS补足到100 μl;
4. 向试管中加入2ml BCA工作液,混匀,37℃放置30分钟;
注:也可以室温放置2小时,或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或适当延长孵育时间。
5. 测定562 nm 处的吸光值,并记录读数;以不含BSA 的样品的光吸收值作为空白对照。
6. 以A562为纵坐标,BSA含量为横坐标,绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内,请稀释样品后重新测定。
北京现货Western二抗稀释液(国产,进口)关键词:Secondary Antibody Dilution Buffer,RFT085,Western二抗稀释液
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