C端HA标签融合蛋白质粒现货供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括C端HA标签融合蛋白质粒现货供应在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：C端HA标签融合蛋白质粒现货供应
编号：YT470
规格：1μg
品牌：百奥莱博
英文名：C-HA plasmid（with CMV promoter）
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达C端与HA tag(HA标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的3"端含有一个可以编码HA标签的序列，因此可以表达出含有HA标签的融合蛋白，可以方便地使用抗HA的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

本质粒的主要信息如下：

 

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1-602
T3 promoter and T3 primer binding site	620-639
multiple cloning site	680-740
c-HA tag	741-767
T7 promoter and T7 primer binding site	820-841
SV40 polyA signal	853-1236
f1 origin of ss-DNA replication	1374-1678
bla promoter	1703-1827
SV40 promoter	1847-2185
neomycin/kanamycin resistance ORF	2220-3011
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal	3012-3470
pUC origin	3599-4266

本质粒(5010bp)的图谱如下：


使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致，即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

储存条件：-20℃。

C端HA标签融合蛋白质粒现货供应极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·一氧化*(代"氮")检测试剂盒
编号：YT286
英文名称：Nitric Oxide Detection Kit
规格：500次
本试剂盒采用了经典的Griess Reagent，并对其测定的溶液体系进行了优化，使检测下限达到1μM，在1-100μM范围内有非常完美的线性关系。

试剂盒特点:
1. 检测速度极快，完成一条标准曲线或5-10个样品的测定只需3分钟。
2. 样品范围广，可以检测细胞或组织及其培养液中的一氧化*(代"氮")的含量，酚红和10%血清均对测定无明显干扰，也可以检测血清、血浆和尿液中一氧化*(代"氮")的含量。

注意事项：
1. 本试剂盒所提供试剂均为有毒害试剂，操作时请小心。
2. 如保存不当导致溶液变色或沉淀，则说明该溶液已经失效，请购买新的试剂盒。
3. 对于血清样品中NO含量的测定，粗略地计算，可以直接用水稀释标准品，从而计算出血清样品中NO的浓度。比较精确的计算。如果测定的正常血清是常见血清可以从文献上查到其中NO的浓度。然后用该已知NO浓度的血清稀释标准品，这样就可以得到比较精确的NO浓度。或者使用已知浓度的人或其它动物的血清稀释标准品也同样可以达到目的。或者参照类似文献进行血清中NO浓度的测定。

储存条件：4℃避光，有效期4个月。

·兔抗GRB2抗体
编号：YT720
英文名称：GRB2 Rabbit Polyclonal Antibody
规格：50μl
本品为来源于兔的抗GRB2的多克隆抗体。
宿主：兔
克隆性：多克隆抗体
用途：WB,FC, IHC,ICC, IF
交叉反应性：人，小鼠，大鼠
分子量：25KDa
推荐稀释比例：WB(1:500-1:1000),IF(1:200),IHC(1:200),ICC(1:200),FC(1:100-1:200)
 

About this Antibody
Name	GRB2 Rabbit Polyclonal Antibody
Category	Polyclonal antibody(pAb); Primary antibody
Isotype	IgG
Purification	Peptide affinity purified
About the Immunogen
Immunogen	This antibody is produced by immunizing rabbits with a synthetic peptide (KLH-coupled) corresponding to adapter protein GRB2.
Gene ID	2885
SwissProt	P62993
Synonyms	ASH; Grb3-3; MST084; NCKAP2; MSTP084; EGFRBP-GRB2
Category	MAP Kinase Signaling
Background	Grb2 is widely expressed and is essential for multiple cellular functions. Inhibition of Grb2 function imp*(代"a")irs developmental processes in various organisms and blocks transformation and proliferation of various cell types, and so it is not surprising that a targeted gene disruption of Grb2 in mouse is lethal at an early embryonic stage. Grb2 is best known for its ability to link the epidermal growth factor receptor tyrosine kinase to the activation of Ras and its downstream kinases, ERK1,2. Grb2 is composed of an SH2 domain flanked on each side by an SH3 domain. Grb2 has two closely related proteins with similar domain organizations, Gads and Grap. Gads and Grap are expressed specifically in hematopoietic cells and function in the coordination of tyrosine kinase mediated signal transduction. The SH2 domain of Grb2 binds to phosphorylated tyrosine-containing peptides on receptors or scaffold proteins with a preference for pY-X-N-X, where X is generally a hydrophobic residue such as valine.

注意事项：
1. 如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验，请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，请4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10,000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果，请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·基因组DNA小量提取试剂盒(适用于动物组织/细菌/昆虫)
编号：YT013
英文名称：Genomic DNA Mini Preparation Kit with Spin Column
规格：50次
本试剂盒是非常先进的基因组DNA抽提试剂盒。可以抽提动物组织、鼠尾、培养细胞、细菌、酵母、动物血液、昆虫以及固定组织的包括基因组DNA在内的总DNA。一个试剂盒通过说明书中提供的不同操作方法，可以抽提除植物样品外的几乎所有样品中的总DNA。

样品首先被蛋白酶K消化，随后加入适合DNA结合到纯化柱上的缓冲液，然后加入到纯化柱内。通过高速离心，使DNA在穿过纯化柱的瞬间，结合到纯化柱上，随后通过两次洗涤去除各种杂质，最后通过洗脱液把DNA洗脱下来。整个过程无需酚*仿抽提，无需酒精沉淀，样品裂解后仅需约15分钟即可完成。

通过本试剂盒纯化得到的基因组DNA的长度最长可达50kb左右，平均为30kb左右，最短为100bp的DNA也可以被纯化。如需获得更长的基因组DNA，对于哺乳动物样品，包括组织或细胞等，可以使用百奥莱博的(YT012)哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒。通过本试剂盒获得的总DNA，OD260/OD280的范围通常在1.7至1.9之间。

本试剂盒可以抽提少至数百个细胞，多至25mg组织、0.5-1cm鼠尾、500万个培养细胞、20亿个细菌或5000万个酵母。样品用量过多，反而会影响抽提效果。如果待抽提样品的DNA含量小于5ng，建议加入适当量的carrier DNA，例如poly-dT或其它对后续实验没有干扰的DNA，也可以加入适当量的carrier RNA，例如yeast RNA等，以改善抽提效果。

本试剂盒的标准操作步骤抽提得到的总DNA会含有少量RNA，但如果按照可选步骤加入RNase A，就可以获得不含RNA的高纯度总DNA。含有RNA的总DNA可以用于PCR，但对于某些其它的后续反应可能会产生一些影响。

纯化柱对于DNA的最大容量约为30微克。通常每200万Hela细胞或500万淋巴细胞可以抽提得到15-25微克总DNA，每25mg肝、脑、肾组织可以抽提得到10-30微克总DNA，每25毫克心、肺组织可以抽提得到5-10微克总DNA，每10mg脾组织可以抽提得到5-30微克总DNA，每1.2cm小鼠尾尖或0.3cm大鼠尾尖可以获得10-25微克总DNA。本试剂盒可以抽提50个样品的总DNA。

产品组份：
样品裂解液A——————10ml
样品裂解液B——————11ml
洗涤液I————————21ml (第一次使用前加入7ml无水乙醇)
洗涤液II———————16ml (第一次使用前加入24ml无水乙醇)
洗脱液————————22ml
蛋白酶K————————1.1ml
DNA纯化柱及废液收集管————50套

储存条件：室温，有效期一年。(蛋白酶K需-20℃保存)

注意事项：
1.抽提细菌、酵母样品时还需要一些特定的试剂，详情请参考相关实验步骤。
2.如需制备不含RNA的高纯度总DNA，需自备RNase A。
3.温度较低时样品裂解液A或样品裂解液B中可能会有沉淀产生，属正常现象。使用前必须检查一遍。如有沉淀，55℃水浴孵育使沉淀溶解，混匀后使用。
4.第一次使用前洗涤液I需添加7ml无水乙醇，洗涤液II需添加24ml无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。
5.本试剂盒需使用55℃水浴，请提前作好准备。
6.除特别说明外，每次Vortex应控制在5-10秒左右。
7.本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
8.废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。
9.参考使用说明，从某些样品中抽提总DNA不需要使用样品裂解液A。


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·Alexa Fluor 555抗兔免疫荧光染色试剂盒
编号：YT105
英文名称：Immunol Fluorence Staining Kit with Alexa Fluor 555-Labeled Donkey Anti-Rabbit IgG
规格：>300次
本试剂盒含有Alexa Fluor 555标记的驴抗兔IgG(H+L)抗体，可以用于检测兔来源的相应一抗，观察到的颜色为非常鲜艳的红色。Alexa Fluor 555是一种常用的非常明亮的红色荧光探针。它比绝大部分常用的红色荧光探针更加明亮，更加不容易淬灭，而且背景更低。Alexa Fluor 555的荧光光谱和Cy3非常接近。Alexa Fluor 555的吸收峰555nm、发射峰565nm。本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液，可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月，并且在6个月内至少可以重复使用10次。本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液，可以使荧光更加持久。本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片，至少可以检测300个样品。

试剂盒组份：
抗兔Alexa Fluor 555———————30μl
免疫荧光染色二抗稀释液—————50ml
抗荧光淬灭封片液————————15ml

注意事项：
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光，特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭，染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存，但存放时间通常不宜超过一周，随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。
4. 免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
5. 如果观察时发现荧光过弱，可以适当提高一抗的浓度；如果荧光还是比较弱，可以适当提高荧光标记抗体的浓度。

储存条件：-20℃，有效期一年。

·STAT3凝胶迁移突变探针(10μM)
编号：YT257
英文名称：STAT3 Mutation Probe For EMSA(10μM)
规格：30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的STAT3 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－STAT3的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时，可以进行约30个冷竞争反应。

STAT3 consensus oligo的序列如下：
5"-GAT CCT TCT GGG AAT TCC TAG ATC-3"
3"-CTA GGA AGA CCC TTA AGG ATC TAG-5"

EMSA突变探针－STAT3中STAT3的公认的结合位点发生了突变，从而使STAT3无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和STAT3的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和STAT3的结合的条带不会被抑制。参考下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

北京百莱博科技有限公司是克隆与表达产品的专业生产供应销*(代"售")商，恭候您的咨询选购C端HA标签融合蛋白质粒现货供应。