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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
307
- 英文名:
AP2 Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM)现货供应,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM)现货供应
编号:YT201
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的AP2 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-AP2的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。
EMSA突变探针-AP2的序列如下:
5"-GAT CGA ACT GAC CGC TTG CGG CCC GT-3"
3"-CTA GCT TGA CTG GCG AAC GCC GGG CA-5"
EMSA突变探针-AP2中AP2的公认的结合位点发生了突变,从而使AP2无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和AP2的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和AP2的结合的条带不会被抑制。参考下图。

图1. 一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
储存条件:-20℃,有效期一年。
AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM)现货供应极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(红色荧光)
编号:YT136
英文名称:One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit
规格:20次|50次
本试剂盒提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经过固定和洗涤的细胞或组织,只要经过一步染色反应,洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现红色荧光的凋亡细胞。本试剂盒足够检测20个样品。
试剂盒组分:
TdT酶—————————40μl
荧光标记液——————960μl
TdT酶稀释液(选用)———00μl
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl
Transferase,TdT)的催化下加上红色荧光探针Cy3(Cyanine 3)标记的dUTP,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。
本试剂盒有如下优点:
(1)高灵敏度:背景染色极低,阳性染色明亮,可以在单细胞水平检测到细胞凋亡,同时由于凋亡早期就有DNA断裂,可以检测到早期的细胞凋亡。
(2)特异性:TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞,而不容易标记坏死细胞。
(3)快速:仅需约1-2个小时即可完成。
(4)方便:只需一步染色反应,洗涤后即可观察,不必使用二抗等进行多步操作。
(5)应用范围广:可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开,另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。
极少数细胞凋亡时没有DNA断裂,此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下,最好同时检测多个凋亡指标。
注意事项:
1. 需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS,用于封片的抗荧光淬灭封片液(YT097),用于固定的4%多聚甲醛或向百奥莱博订购免疫染色固定液(YT086),同时需自备含0.1% Triton X-100的PBS或向百奥莱博订购免疫染色洗涤液(YT089)。
2. 如果用于石蜡切片的检测,需自备蛋白酶K,二甲*。
储存条件:-20℃。
AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM)现货供应关键词:AP2凝胶迁移突变探针,AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM),AP2 Mutation Probe For EMSA(1.75μM),YT201
·一氧化*(代"氮")合成前体(L-Arginine)
编号:YT281
英文名称:Nitric Oxide Precursor
规格:5g
本品是一氧化*(代"氮")的前体,也是一氧化*(代"氮")合成酶的底物。L-Arginine可以逆转L-Arginine类似物导致的NOS抑制。可以通过促进NO的产生而刺激胰岛细胞释放胰岛素。溶解于水,可以配制成50mg/ml的水溶液。
分子式:C6H14N4O2
分子量:174.2
性状:白色结晶
纯度:>99.5%
注意事项:如果配制成水溶液,分装后-20℃保存,半年有效。
储存条件:室温,有效期24个月。
·Western洗涤液(WB洗涤液)
编号:YT068
英文名称:Wash Buffer For Western Blot
规格:250ml
本品可以用于Western时一抗或二抗孵育后的洗涤。适当的洗涤可以降低背景,增强信噪比。按照每张膜洗涤需要5-10毫升Western洗涤液(1X)计算,一个包装的Western洗涤液可以洗涤25-50次。
注意事项:本Western洗涤液经过滤除菌处理,使用过程中应尽量避免细菌污染。一旦启用后建议在2周内用完。
储存条件:4℃,有效期一年。
·LKB1-AMPK激活剂(Metformin)(二甲双胍)
编号:YT334
英文名称:LKB1-AMPK Activator
规格:1g|5g
本品可以激活LKB1-AMPK(AMP-activated protein kinase)等信号通路,包括后续的ACC(acetyl-CoA carboxylase),继而抑制肝脏的糖异生,促进脂肪酸氧化,改善胰岛素敏感性,降低血糖水平。Metformin不具有促进胰岛β细胞分泌胰岛素的功能。Metformin抑制肿瘤细胞增殖和促进肿瘤细胞凋亡的作用也和其对LKB1-AMPK途径的激活密切相关。
CAS:1115-70-4
分子式:C4H11N5•HCl
分子量:165.62
纯度:>97%
储存条件:4℃。
AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM)现货供应关键词:AP2凝胶迁移突变探针,AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM),AP2 Mutation Probe For EMSA(1.75μM),YT201
·D-PBS溶液(含**)
编号:YT906
英文名称:Dulbecco"s Phosphate-Buffered Saline(with Ca2+ & Mg2+)
规格:500ml
本品含2.67mM KCl, 1.47mM KH2PO4, 137.93mM NaCl, 8.06mM Na2HPO4,pH值为7.4。本D-PBS溶液经过除菌处理,可以直接用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途。
注意事项:在使用D-PBS的过程中要特别注意避免溶液被微生物污染。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
·NF-κB凝胶迁移探针(10μM)
编号:YT229
英文名称:NF-κB Probe For EMSA(10μM)
规格:30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的NF-κB consensus oligonucleotide。这个双链寡核苷酸含有公认的NF-κB结合位点,可以用作EMSA研究时的探针。一个包装的探针可以进行约90个同位素标记探针的反应,每次标记的探针可以测定约100个样品;或约可以进行60个生物素标记探针反应。如果作为未标记的探针用于同位素标记探针的冷竞争,可以进行90-180个冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时,可以进行约30个冷竞争反应。
NF-κB consensus oligo的序列如下:
5"-AGT TGA GGG GAC TTT CCC AGG C-3"
3"-TCA ACT CCC CTG AAA GGG TCC G-5"
本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记,也可以用于生物素标记。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
北京百莱博科技有限公司专业生产凝胶迁移EMSA产品,欢迎来电咨询选购AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM)现货供应。
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文献和实验。系统包括目的寡核苷酸,对照DNA结合蛋白,结合缓冲液,用于寡核苷酸探针末端标记所需的试剂。Core 系统(目录号E3050)包括含重组AP2蛋白(AP2抽提液)的大肠杆菌抽提液和AP2的同源寡核苷酸。AP2抽提液是从表达AP2蛋白的大肠杆菌中提取的。另外,Core系统还含SP1同源寡核苷酸,凝胶迁移结合缓冲液(5′),和能作20次对照实验的HeLa核抽提液。Complete系统(目录号E3300)含另外5个双链寡核苷酸,分别是AP1、OCT1、CREB,、NF-kB、 TFIID结合位点的同源
实验的 一种正对照。系统包括目的寡核苷酸,对照DNA结合蛋白,结合缓冲液,用于寡核苷酸探针末端标记所需的试剂。Core 系统(目录号E3050)包括含重组AP2蛋白(AP2抽提液)的大肠杆菌抽提液和AP2的同源寡核苷酸。AP2抽提液是从表达AP2蛋白的大肠杆菌中提取的。另外,Core系统还含SP1同源寡核苷酸,凝胶迁移结合缓冲液(5′),和能作20次对照实验的HeLa核抽提液。Complete系统(目录号E3300)含另外5个双链寡核苷酸,分别是AP1、OCT1、CREB,、NF-k B、 TFIID结合
:dC),也可能含非离子去污剂。在结合蛋白和同位素标记的探针作用后,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物,随后将凝胶干燥并放射自显影,或用PhosphorImage/sup分析。(3)凝胶迁移实验系统提供了什么试剂?Promega公司提供一种凝胶迁移实验系统检测DNA结合蛋白,系统可作为这类实验的一种阳性对照。系统包括目的寡核苷酸,对照DNA结合蛋白,结合缓冲液,用于寡核苷酸探针末端标记所需的试剂。Core 系统包括含重组AP2蛋白(AP2抽提液)的大肠杆菌抽提液和AP2的同源寡核苷酸。AP2抽提
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