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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
697
- 英文名:
Ultra sensitive ECL chemiluminescence Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃避光
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括超灵敏ECL化学发光试剂盒现货价格在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:超灵敏ECL化学发光试剂盒现货价格
品牌:百奥莱博
英文名:Ultra sensitive ECL chemiluminescence Kit
产地:国产|进口
编号:YT061
本Western萤光检测试剂是一种特超敏ECL化学发光试剂盒,发光效果显著优于YT060高灵敏ECL化学发光试剂盒,可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶发生化学反应,发出萤光,从而可以通过用X光片压片或其它适当萤光成像设备检测样品。
本试剂盒灵敏度极高,比DAB显色的灵敏度至少高1000倍,比原Pierce公司(现Thermo公司)的SuperSignal West Pico Substrate的灵敏度高10倍以上,实际检测效果与原Pierce公司的SuperSignal West Dura和SuperSignal West Femto的检测灵敏度相近。对于辣根过氧化物酶的最低检测灵敏度可以达到飞克级,500飞克辣根过氧化物酶用本试剂盒检测并用化学发光仪进行发光强度的定量检测时,信噪比大于5。
本试剂盒系统发光时间更长。在10微升1-10纳克/微升辣根过氧化物酶标记IgG中,加入100微升本试剂盒工作液后在不同时间点通过化学发光仪检测化学发光。检测数据显示20分钟后发光无明显减弱, 60分钟后发光强度减弱至初始发光强度的约85%左右,120分钟后发光强度减弱至初始发光强度的约70%左右。

检测不同剂量HRP-IgG,20分钟后发光效果几乎不变,120分钟后发光效果仍然良好。
本试剂盒系统的高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量。同时必须注意适当减少一抗和二抗或样品的用量,以免获得过深的难以比较灰度的条带。本试剂盒系统稳定性较好,37℃水浴孵育30天,和4℃保存的试剂相比,对相同样品的检测效果无任何明显差异。此外本试剂盒系统背景很低,对PVDF膜和硝酸纤维素膜均适用。
储存条件:4℃避光,有效期一年。
关于超灵敏ECL化学发光试剂盒现货价格的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
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超灵敏ECL化学发光试剂盒现货价格关键词:超灵敏ECL化学发光试剂盒,YT061,Ultra sensitive ECL chemiluminescence Kit
·双萤光素酶报告基因检测试剂盒
编号:YT273
英文名称:Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit
规格:100次|1000次
本试剂盒是先以萤光素为底物来检测萤火虫萤光素酶,后以肠腔素为底物来检测海肾萤光素酶,并且在后续加入海肾萤光素酶底物时,同时加入抑制萤火虫荧光素酶催化luciferin发光的物质,使后续检测仅仅检测到海肾萤光素酶的活性,实现双萤光素酶报告基因检测。
试剂盒组分:
| 报告基因细胞裂解液 | 60ml |
| 萤火虫萤光素酶检测试剂 | 10ml |
| 海肾萤光素酶检测缓冲液 | 10ml |
| 海肾萤光素酶检测底物(100×) | 100μl |
萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD的蛋白,在ATP、*离子和氧气存在的条件下,可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物萤光。海肾萤光素酶是一种分子量约为36kD的蛋白,在氧气存在的条件下,可以催化coelenterazine氧化成coelenteramide,在coelenterazine氧化的过程中也会发出生物萤光。生物萤光可以通过化学发光仪或液闪测定仪进行测定。本试剂盒的检测原理参考下图。
双萤光素酶的检测原理图。
通过萤光素酶和其底物这一生物发光体系,可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣
基因的转录调控元件或5’启动子区克隆在luciferase的上游,或把3’-UTR区克隆在luciferase的下游等,构建成报告基因(reporter gene)质粒。然后转染细胞,用适当药物等处理细胞后裂解细胞,测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用。Renilla luciferase相对更多地被用作转染效率的内参,以消除细胞数量和转染效率的差异。萤火虫萤光素酶催化luciferin发光的最强发光波长为560nm。海肾萤光素酶催化coelenterazine发光的最强发光波长为465nm。
注意事项:
1. 加入海肾萤光素酶检测工作液后对于上一步骤中的萤火虫萤光素酶的抑制可以达到99%以上。但总会残留微量活性,因此,宜在转染时把海肾萤光素酶的表达量控制在其RLU读数高于萤火虫萤光素酶RLU读数的10%。海肾萤光素酶的读数高于萤火虫萤光素酶的读数是完全可以的,通常不会有明显的负面影响。
2. 为取得最佳测定效果,在用单管的化学发光仪测定时,样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制在相同的时间内,例如30秒内;使用具有化学发光测定功能的多功能荧光酶标仪时,宜先把样品全部加好,然后统一加入萤火虫萤光素酶检测试剂。
3. 由于温度对酶反应有影响,所以测定时样品和试剂均需达到室温后再进行测定。
4. 为保证萤光素酶检测试剂的稳定性,可以采取适当分装后避光保存的方法,以避免反复冻融和长时
间暴露于室温。经测试,反复冻融三次,对测定结果无明显影响。
5. 样品和测定试剂混合后,必须等待1-2秒,再进行测定。测定时间通常为10秒,根据情况也可以测定更长或更短时间,但是同一批样品宜使用相同的测定时间。
6. 海肾萤光素酶检测底物(100×) 配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发,有时会在初次使用时发现体积明显小于100μl的情况,此时用无水乙醇把体积补足至100μl,并混匀后即可使用。
7. 海肾萤光素酶检测工作液宜配制后立即使用。如不能立即使用,-20℃可以保存一周。随着保存时间的延长检测效果会不断下降,因此不可配制成工作液后长期保存。
储存条件:-20℃,有效期一年。
超灵敏ECL化学发光试剂盒现货价格关键词:超灵敏ECL化学发光试剂盒,YT061,Ultra sensitive ECL chemiluminescence Kit
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