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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
959
- 英文名:
EMSA/Gel-Shift Loading Buffer
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货EMSA上样缓冲液(Gel-Shift上样缓冲液)(无色,10X)(国产,进口)在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京现货EMSA上样缓冲液(Gel-Shift上样缓冲液)(无色,10X)(国产,进口)
规格:200次
品牌:百奥莱博
编号:YT187
英文名:EMSA/Gel-Shift Loading Buffer
产地:国产|进口
本品不含*酚蓝。如果觉得使用无色的上样缓冲液上样非常困难,可以使用含*酚蓝的EMSA/Gel-Shift 上样缓冲液(蓝色,10X)。每个包装的EMSA/Gel-Shift 上样缓冲液(无色,10X)足够进行200个EMSA上样。
通过EMSA,也称gel-shift,可以研究目的蛋白和特定的DNA序列的结合情况,从而可以研究细胞内一些转录因子的激活水平。EMSA/Gel-Shift 上样缓冲液(无色,10X)可以用于EMSA研究时细胞核蛋白或纯化的转录因子和特定的双链寡核苷酸的结合反应后的上样。
储存条件:-20℃,有效期一年。
想要了解更多关于北京现货EMSA上样缓冲液(Gel-Shift上样缓冲液)(无色,10X)(国产,进口)的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·dNTP套装(100mM)
编号:YT389
英文名称:dNTP Set
规格:4×50μl
本品为独立包装的dATP、dCTP、dGTP和dTTP共4种溶液套装,每种的浓度均为100mM,适合用于PCR、real-time PCR、RT-PCR、cDNA或普通DNA合成、引物延伸反应、DNA测序、DNA标记等各种常规分子生物学反应。
本套装中的dATP、dCTP、dGTP和dTTP溶液均用超纯水配制,并用高纯度NaOH溶液调节pH值至7.0,浓度为100mM,即100mmol/L。
本套装中的dATP、dCTP、dGTP和dTTP溶液不含DNase、RNase、phosphatase和蛋白酶。
本套装中的dATP、dCTP、dGTP和dTTP溶液经测试,可以直接用于PCR等各种常规分子生物学反应。
储存条件:-20℃。
·绿色核酸染料(RNA染料)(DNA染料)
编号:YT016
英文名称:Nucleic Acid Green(2000X)
规格:1ml|5ml
本核酸绿色染料是*化乙锭(EB)的升级替代产品,用于凝胶中DNA、RNA等核酸的染色。本品核酸绿染料具有安全(未检测到致突变性和细胞毒性)、灵敏度高、稳定性好等优点,凝胶中的核酸在使用本产品后经约500nm波长蓝光(也可以使用约260nm紫外光)激发呈现绿色荧光,适用于原先使用SYBR Green或SYBR Gold为核酸染料的凝胶成像和检测系统。
由于本品核酸绿染料在500nm左右处有最大的激发波长,可以使用对人体无害的蓝光灯或蓝光成像仪进行核酸检测,从而避免常规的紫外检测对核酸样品的致突变性,以及紫外对人的眼睛和皮肤的伤害。特别在切胶回收时,使用本品核酸绿染料并用蓝光灯具有很大的优势,不仅可以避免核酸样品的突变,也可以避免紫外光对人体的伤害。
本品核酸绿染料比EB或SYBR Green更安全。本品核酸绿染料在远高于其工作浓度范围时均没有细胞毒性及诱变性。艾姆斯氏试验(Ames test)结果表明,即使在S9代谢活化时,也没有检测到致突变性。本品核酸绿染料和百奥莱博另外一种安全型核酸染料核酸红色染料(YT015),由于它们特殊的化学结构使其难以进入细胞,从而大大降低甚至避免了染料的致突变性和细胞毒性。艾姆斯氏试验结果表明,本品核酸绿染料比核酸红色染料(YT015)更安全,即便在S9代谢活化时,当本品核酸绿染料浓度高达约20微克/毫升时,也没有检测到致突变性。而SYBR Green染料可以穿透细胞膜,进入活细胞并染色DNA。并且有报道SYBR Green可以强烈增强紫外线诱导的基因突变。
本品核酸绿染料检测灵敏度高,对于小分子量核酸的染色效果好。本品核酸绿染料的检测灵敏度比EB高8-10倍,在检测低浓度、微量DNA或RNA方面比EB更佳,尤其对小分子量的DNA检测非常灵敏。在使用浸泡染色法时,本品核酸绿染料和SYBR Gold的灵敏度相近甚至更高;与SYBR Gold不同的是,本品核酸绿染料预先配制在凝胶中也有很高的灵敏度。EB对于小分子量核酸染色效果差,而本品核酸绿染料对于小分子量核酸的染色效果很好,便于观察酶切或PCR获得的小分子量核酸片段。本说明书推荐使用的本品核酸绿染料浓度,其检测效果略优于EB。如果希望获得更高的染色灵敏度,可以适当提高本品核酸绿染料的工作浓度。
本品核酸绿染料的稳定性好,染色重复性高。含SYBR Green的凝胶核酸染色的重复性比较差,这通常是由于SYBR系列染料的稳定性差导致的。而本品核酸绿染料的稳定性很好,可以室温长时间保存及使用微波炉加热。本品核酸绿染料的光稳定性良好,可以在室内正常光线下操作而无需避光。由于其热稳定性和光稳定性,含本品核酸绿染料的凝胶在核酸染色时的重复性非常好。
本品核酸绿染料可以使用和SYBR Green或EB相同的检测体系。本品核酸绿染料具有和SYBR Green或SYBR Gold几乎相同的光学性质,两者的激发光和发射光都非常接近,这样可以直接用本品核酸绿染料替换SYBR Green,以使用SYBR Green的凝胶观察、拍照或成像系统(约500nm激发)。对于原来用于EB染料观察的系统,可以考虑选用百奥莱博的核酸红色染料(YT015)染料来替代EB,但也可以使用没有致突变性的本品核酸绿染料来替代EB。使用本品核酸绿染料来替代EB,并且用EB的紫外检测体系时,检测灵敏度会比使用核酸红色染料(YT015)低约4-5倍。对于既可以观察EB也可以观察SYBR Green的具有紫外和蓝光两种激发光的凝胶成像系统,则推荐直接用本品核酸绿染料来替换EB。本品核酸绿染料的激发光谱和发射光谱请参考下图。

本品核酸红染料的激发光谱和发射光谱
本品核酸绿染料的使用方法和EB一致。本品核酸绿染料可以按适当比例直接加入琼脂糖中配制成凝胶,也可以在电泳完毕后对凝胶进行染色。前者更加方便,而后者灵敏度要更加高一些。但由于本品核酸绿染料本身已经非常灵敏,通常采用把本品核酸绿染料直接配制在凝胶中就可以了。对于一些特殊的情况,如核酸样品量特别少的情况等,则可以考虑电泳后再对凝胶进行染色。本品核酸绿染料对于核酸的迁移率影响非常小,小于SYBR Green对于核酸迁移率的影响。
通过凝胶回收试剂盒(YT010)或酚*仿抽提,可以有效去除与DNA或RNA结合的本品核酸绿染料,从而确保不会影响后续的连接、酶切、PCR、测序等常规的分子生物学用途。
储存条件:室温,避光,有效期一年。
注意事项:
1. 使用蓝光灯来检测本品核酸绿染料染色的核酸胶时,需要注意避免使用一些实为紫外灯的假冒伪劣的蓝光灯,以减少紫外线对于核酸样品和人体的伤害。比较简单的判断方法是,对于EB或核酸红色染料(YT015)染色的核酸胶,蓝光灯照射后是不会出现荧光条带的,而仅对于本品核酸绿染料染色的核酸胶,蓝光灯照射后才会出现荧光条带。如果对于EB或核酸红色染料(YT015)染色的核酸胶照射后也能观察到荧光条带,则说明使用的蓝光灯实际为紫外灯。
2. 本品核酸绿染料和EB一样作为荧光染料均需避光保存,但在使用过程中的常规室内光照不会影响其使用效果。
3. 制备好的本品核酸绿染料琼脂糖凝胶,在4oC避光条件下通常可以保存3-5天。
4. 本品核酸绿染料琼脂糖凝胶再次熔化使用时,为取得更好的观察效果,需要添加适量本品核酸绿染料。
5. 电泳之后的凝胶不建议重复使用。
6. 电泳后再使用本品核酸绿染料染色的凝胶一般不需要脱色,如果发现背景太高,可以使用不含核酸酶的水进行脱色处理。
7. 本品核酸绿染料和核酸红色染料(YT015)除了可以染色双链DNA外,也可染色单链DNA和RNA。核酸红色染料(YT015)对单链核酸的染色灵敏度约为对双链DNA染色灵敏度的一半。核酸红色染料(YT015)对单链核酸的染色灵敏度约为本品核酸绿染料的5倍。
8. 如果使用聚丙*(代"烯")酰胺凝胶,请使用浸泡染色法染胶,并延长染色时间至30分钟-1小时。
9. 如果观察到条带弥散或者分离不理想,建议使用浸泡染色法染色以确认是否与染料有关。如果浸泡染色法染色后仍然出现类似的问题,说明与染料无关,请尝试以下方法:使用新鲜配制的电泳缓冲液、降低核酸的上样量、降低染料的浓度、降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、降低电泳电压一倍以上并延长凝胶电泳时间以改善电泳效果、使用更薄的梳齿等。
10. 本产品兼容常用的电泳缓冲液,例如TAE和TBE。
11. 本品核酸绿染料适用于约500nm或260nm激发的成像系统,如果使用普通的适用于核酸红色染料(YT015)或EB的紫外灯或成像系统(约300nm激发),也能较好地观察到荧光,但强度会略弱一些。
北京现货EMSA上样缓冲液(Gel-Shift上样缓冲液)(无色,10X)(国产,进口)关键词:无色,10X,EMSA上样缓冲液(Gel-Shift上样缓冲液)(无色,10X),EMSA/Gel-Shift Loading Buffer,YT187
·细胞毒性检测试剂盒(乳酸脱*酶法)
编号:YT125
英文名称:LDH Cytotoxicity Assay Kit
规格:100次|500次
本试剂盒也称乳酸脱*酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱*酶释放检测试剂盒(LDH Release Assay Kit),是一种基于diaphorase催化的INT显色反应,通过比色法检测细胞毒性时释放的乳酸 脱*酶活性或检测其它样品中的乳酸脱*酶活性的试剂盒。
本试剂盒可以用于常规的乳酸脱*酶活性的检测,更常用于以LDH释放为指标的细胞毒性检测。同时,基于细胞总乳酸脱*酶活性的检测,本试剂盒也可以用于检测细胞增殖和细胞毒性检测。
细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的破坏会导致细胞浆内的酶释放到培养液里,其中包括酶活性较为稳定的乳酸脱*酶(lactate dehydrogenase, LDH)。通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH的活性,就可以实现对细胞毒性的定量分析。LDH释放被看做细胞膜完整性的重要指标,并被广泛用于细胞毒性检测。LDH释放被认为是以前使用放射性的51Cr标记细胞,随后通过51Cr释放进行 细胞膜完整性检测的安全有效的替代方法。
本试剂盒的基本原理是,在乳酸脱*酶的作用下,NAD+被还原生成NADH,NADH和INT (2-p-iodophenyl-3-nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脱*酶(diaphorase)催化反应生成NAD+和强生色物甲臜(formazan),在490nm波长下产生吸收峰,从而可以通过比色来定量乳酸脱*酶的活性。吸光度与乳酸脱*酶活性成线性正相关。该酶联反应原理的示意图如下:

试剂盒组份(100次为例):
LDH释放试剂——————1.5ml
乳酸溶液———————2ml
酶溶液————————1ml×2
INT溶液(10X)—————0.2ml
INT稀释液——————2ml
注意事项:
1. 冷冻会使样品中部分乳酸脱*酶失活,4℃可放置2-3天。建议样品准备好后尽量当天完成测定。
2. 如果检测细胞培养液中的乳酸脱*酶,由于血清含有乳酸脱*酶,建议血清的使用浓度不要超过1%,并最好使用热灭活血清。如果一定需要使用10%血清,在检 测时一定要设置没有细胞,但加入了相同体积培养液的对照孔,以用于消除背景。
3. 细胞过度生长、密度过高、离心速度过大、培养箱内外温差过大,都会造成细胞释放乳酸脱*酶增加。
4. 如果希望进行乳酸脱*酶活性的绝对定量,用户需自备乳酸脱*酶标准品。
储存条件:-20℃,有效期一年。
北京现货EMSA上样缓冲液(Gel-Shift上样缓冲液)(无色,10X)(国产,进口)关键词:无色,10X,EMSA上样缓冲液(Gel-Shift上样缓冲液)(无色,10X),EMSA/Gel-Shift Loading Buffer,YT187
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