Western转移缓冲液(5×),NC优惠促销

缓冲液配制指南

过硫酸胺 0.1 g ，加超纯水1.0 mL 溶解后，4 ℃ 保存，保存时间为 1 周。（-20 ℃长期保存） 30% 丙烯酰胺 溶于总体积为 50 mL 的水中，定容至 100 mL。室温保存于棕色瓶。 10× PBS（2L） NaOH 调 pH 值至 7.4，定容至 2 L。保存于室温。 还原型 5×SDS 上样缓冲液 混匀后，分装于 1.5 mL 离心管中，4 ℃ 可保存数周，-20 ℃ 可长期保存。 电泳液缓冲液 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 室温保存，1 次溶液可重复

以毛细管转移进行Northern Blotting转印实验方法与步骤

，静置5 min。 3) 根据图所示，依序在塑料盒上堆栈玻璃板、滤纸 (作为盐桥)、电泳胶、尼龙膜、三层滤纸、与吸水纸，以便以毛细管转移方式将RNA 转印于尼龙膜上;塑料盒内装入适量20×SSC，以便作为转移缓冲液。 以毛细管转移法进行核酸转印 注意： a. 滤纸与尼龙膜应先以20×SSC 润湿，再用于堆栈。 b. 在滤纸、尼龙膜、与电泳胶夹层间可能会有气泡存在，因此在放好电泳胶、尼龙膜或滤纸后，应立即检视，并以食指轻轻平移

免疫印迹（Western Blotting）实验

。 Western Blotting的protocol种类繁多，但大同小异，基本为上述几个步骤。要得到一个完美的实验结果，不仅需要优质的抗体，同时应对整个实验流程和体系进行严格的质量控制，才能最终达到你的实验目的。 影响免疫印迹成败的一个主要因素是抗原分子中可被抗体识别的表位性质。因为涉及到抗原样品的变性，只有那些识别耐变性表位的抗体可以与抗原结合。多数多克隆抗体中或多或少含有这种类型的抗体，所以在免疫印迹中常选用多克隆抗体。第二个影响因素是蛋白原液中抗原的浓度。一些表达量低的蛋白在免疫