重组蛋白G现货价格

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百奥莱博专业生产销*(代"售")重组蛋白G现货价格，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：重组蛋白G现货价格
品牌：百奥莱博
规格：1mg
英文名：Streptococci protein G
产地：国产|进口
编号：BTN131080
本品为重组蛋白G，纯度＞90%，带His标签，分子量10kD。

储存条件：-20℃保存，有效期1年。

除重组蛋白G现货价格外，我公司正在打折促销以下产品：

·pUCm-T载体
编号：BTN160101
英文名称：pUCm-T vector
规格：1μg
本产品是一种高效克隆PCR产物(TA Cloning)的专用载体。本载体由pUC系列载体改造而成，在pUC载体的多克隆位点处插入特殊的限制性内切酶识别位点，酶切后能在载体的3´端形成悬挂的“T”末端。很多DNA聚合酶在进行PCR扩增时会在PCR产物双链DNA 每条链的3´端加上一个突出的碱基A。这样，pUCm-T载体的两端就可以和PCR产物的两端进行正确的AT 配对，在连接酶的催化下，就可以把PCR产物连接到，pUCm-T载体中，形成含有目的片断的重组载体。可以通过蓝白斑筛选有插入片断的重组克隆，大大提高了3´末端A 突出PCR产物的连接、克隆效率。本产品应用于进行TA 克隆，克隆PCR产物。对克隆后的PCR产物可以用M13通用引物进行DNA 测序。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一. 实验准备
1. PCR产物3´末端带有突出的A碱基：Taq、Tth、Ampli Taq、Klen Taq DNA聚合酶扩增的PCR产物3´末端均带有突出的A碱基。建议扩增的PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳进行回收，再进行连接转化实验。
2. PCR产物3´末端没有突出的A碱基：Pfu、Pwo、Tli或DeepVent等DNA聚合酶具有3´5´外切酶活性，其扩增的PCR产物末端可能不带有3´A，要对这种平末端PCR产物进行克隆，应先对其进行3´末端加A，再进行连接转化实验。

二.连接反应
3.在一个标准的10mL连接反应体系中，加入下列成分：

 

反应组分	10μl反应体系
插入的目的片段	xμL(0.2 pmol)
本产品	1μL(50 ng)
10×连接酶缓冲液	1μL
T4 DNA连接酶	3-5 U
补水到	10 L

 注意:一般最后加入T4 DNA连接酶。
4. 用移液器吹打反应混合液使之混匀后，16-23℃连接1～12小时(或按T4 DNA连接酶供货商提供的操作手册进行连接)。

三．细菌转化和鉴定
5. 将100μl感受态细胞置于冰上解冻后，完全解冻后轻轻将细胞均匀悬浮。
6. 加入上述5μl连接液，轻轻混匀，冰上放置30分钟。
7. 42℃水浴热激90秒，再冰上放置15～20分钟。
8. 加入400μl自备的SOC培养基，37℃ 200～250rpm振荡培养1小时。
9. 4000rpm离心5分钟，用枪头吸掉400μl上清液，用剩余的培养基将细胞悬浮。
10. 将细菌悬液均匀涂布在含20μl的IPTG(100mM)和100μl的X-gal(20mg/mL)的*苄青霉素抗性的自备的LB平板上。(涂布菌液的用量可以根据连接的效率及感受态细胞的转化效率而进行适当的调整。)
11. 将平板于37℃培养1小时，然后倒置培养过夜。(先将平板正向放置1小时，以吸收过多的液体。)

四．筛选
12.转化子的蓝白筛选：
 当外源DNA片段插入到pUCm-T载体中后，由于外源DNA的核酸序列存在改变了LacZ基因的编码，从而影响了其产物β-半乳糖苷酶α-片段的活性，因此重组克隆在-gal/IPTG 平板上呈现为白色，而非重组克隆呈蓝色。选择在IPTG/X-gal 平板上生长的白色菌落，用牙签挑至含*苄青霉素的液体培养基，37℃培养过夜。
13.转化子的鉴定：
1)用上述培养的白色菌落的菌液抽提质粒，用PstI单酶切或用其它合适的酶切,琼脂糖凝胶电泳检查片段大小，确定是否含有目的片段。
2)用M13通用引物或其它合适的引物直接进行测序来确定是否含有目的克隆。

操作提示：
1. PCR产物的纯度：
 连接反应前需用琼脂糖凝胶电泳检测PCR反应产物，如果电泳检测PCR产物条带弥散，或出现非特异条带，则需要切下目的条带，用胶回收试剂盒对目的片段进行回收。若PCR产物电泳检测只有预期大小的明显条带，也应使用PCR产物纯化试剂盒直接纯化PCR产物，以除去引物二聚体。不经纯化的PCR产物在某些条件下可直接用于连接，但由于引物二聚体和PCR产物中其它物质的影响，造成含有插入片段的阳性克隆数减少，因而需要筛选很多克隆方可得到含有目的PCR产物的阳性克隆。
2. 平端PCR产物
 具有校正活性的热稳定性DNA聚合酶如Pfu、Pwo、Tli在进行PCR扩增时产生平端PCR产物。这种平端PCR产物可以进行3´末端加A 尾后连接到pUCm-T载体中，采用这种方法进行连接，可大大提高克隆的效率。
3.优化插入片段和载体的摩尔比
1)pUCm-T载体优化的插入DNA片段和载体的摩尔比为3:1，采用3-10:1的连接比例也可成功进行连接。如果你的PCR产物开始连接的不理想，则有必要优化连接比例。
2)PCR产物的量可采用以下公式进行换算：
PCR片段的量(ng)= [加入载体的量(ng)×插入片段大小(kb)/载体大小(kb)]×插入片段和载体的摩尔比
4.筛选含插入片段的转化子
插入片段成功克隆到pUCm-T载体中，可阻断β-半乳糖苷酶的编码序列，因而重组克隆可在指示培养基上通过颜色进行筛选。大多数情况下含有PCR产物的克隆菌为白色，如果PCR片段和LacZ基因在同一读码框内，即PCR片段碱基数是3的整数倍(含3´-A)，并且读码框无终止密码子，则重组克隆菌可能为蓝色。

质粒图谱：



重组蛋白G现货价格关键词：Streptococci protein G,重组蛋白G,BTN131080


·酸酚
编号：BTN100803
英文名称：Acidic Phenol
规格：100mL
本品是将重蒸馏用乙酸*酸性缓冲液充分饱和而得，pH在4-5之间，不会再吸收样品的水分，可以直接用于RNA提取。

储存条件：常温运输和保存、避光。有效期一年。

疑难解答：
Q：离心后为何酚相在下面？
A：*酚的比重是1.071，水饱和*酚的比重更低，只比纯水稍重。如果水溶液中有较高浓度的盐和其他成分(细胞裂解后也会释放出大量的如核酸，糖分等细胞成分)，其比重很容易超过*酚，在此情况下离心，*酚将在下层，水相将在上层，取样时需要十分小心。如果要使*酚相在下层，可以使用比重更大的酚-*仿-异戊醇混合液。

·ATP溶液(100mM)
编号：BTN120625
英文名称：ATP Solution，100mM
规格：0.25mL
本产品纯度在98%以上(HPLC检测)，不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染，可以直接用于体外RNA转录合成。

ATP分子式为C10H13N5O13P3Na3，分子量是573.1，消光系数为15.4×103 M-1×cm-1(pH7.0)，λmax为259nm。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·辛甲基硫吡喃葡萄糖苷(OTG)
编号：BTN131045
英文名称：1-s-octyl-β-D-thioglucopyranoside
规格：5g
OTG全名是1-s- 辛基-β-D-硫吡喃葡萄糖苷)，它是一种广泛用于溶解膜蛋白的非离子型去垢剂。已发现在一些生物系统中，该产品不受β 半乳糖苷酶的影响。光学上透明并且可透析。与辛甲基β 葡糖苷的溶解能力相同，但稳定性更好。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。


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133-32-4 Indole-3-butyricacid(IBA)吲哚-3-丁酸(水溶)
PY01-184  紫脲酸铵  ind  25克  
BTN111105 MTT检测试剂盒 MTT Assay Kit
ARB12624 大鼠维生素D(VD)尿液中含量检测 Rat vitamin d,vd ELISA KIT
9014-01-1 碱性蛋白酶(1：200000)
F030806 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgG2a抗体 Goat Anti-Mouse IgG2a*BIOTIN
BTN80805 柱式毛发DNAOUT Column Hair DNAOUT
BTN90504 XL1-Blue感受态细胞 XL1-Blue Competent Cell
ARB12165 大鼠白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ)elisa检测说明书 Rat soluble interleukin-2 receptor,IL-2srβ ELISA KIT
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SDS-PAGE凝胶配制试剂盒   30T
ARB10163 人TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)检测服务 Human tgf-beta-inducible early response gene-1,tieg1 ELISA KIT
肉桂酰胺 Lysing Enzymes 621-79-4

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