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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
660
- 英文名:
One-step Bacteria DNA extraction kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输及保存(溶菌酶需要冰袋运输,-2
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
一步式细菌DNA提取试剂盒北京厂家现货的品牌:百奥莱博,是优质的DNA纯化产品,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多一步式细菌DNA提取试剂盒等DNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:一步式细菌DNA提取试剂盒北京厂家现货
英文名:One-step Bacteria DNA extraction kit
编号:BTN60806
产地:国产|进口
本试剂盒是在一步裂解式超快细菌基因组DNA提取试剂,其最大特点是快速,可以用于绝大多数革氏阳性和阴性细菌基因组DNA的快速提取。
试剂盒特点:
1. 操作简单,整个过程不到10分钟(对一个样品而言)。
2.产率一般在3-10μg/mL过液培养细菌。
3. OD260/280一般在1.8以上。
4. DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
5.适用范围广,可以使用于绝大多数细菌。
6. 也可以使用过夜培养细菌和菌落。
7. 得到的DNA可以直接用于PCR,酶切或其他分子生物学实验。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶菌酶 | 600mg |
| 一步式细菌裂解液 | 25ml |
| 专用上柱液 | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(溶菌酶需要冰袋运输,-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
一: 对革氏阴性细菌
1. 如果一步式裂解液产生沉淀,需要65℃预热直到沉淀溶解,摇匀待用。
2. 将0.1-1.5mL过夜培养的菌液转移到1.5mL塑料离心中,室温12000rpm离心1分钟沉淀细菌,弃上清。
3. 加入0.5mL一步式细菌裂解液到离心管中,吹打混匀。
4. 加入0.5mL专用上柱液到裂解液中,颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中,室温放置至少2分钟。
5. 12000rpm室温离心1分钟,DNA将吸附在离心吸附柱的膜上,倒弃收集管中的穿透液。
6. 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃穿透液。
7. 重复第6步操作一次。
8. 空甩半分钟,将离心吸附柱转移到新的离心管中。
9. 加50-100μL DNA洗脱液,室温放置3~5分钟。
10. 12000rpm室温离心1分钟即得DNA溶液。
二: 对革氏阳性细菌
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的细菌离心1分钟后,重悬于0.6mL溶菌液中(60mL自备超纯水+600mg溶菌酶),颠倒混匀5-10次后37℃保温30分钟(有的菌种可能需更长时间,需要自己根据细菌不同而决定)。
2. 12000rpm离心10分钟,小心弃上清。
3.后续处理接革氏阳性细菌处理的第3步。
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·T4 RNA连接酶
编号:BTN120421
英文名称:T4 RNA Ligase
规格:1000U
本酶催化ATP降解为AMP和焦磷酸的反应,释放的能量能使寡核苷酸的5´-P末端和3´-OH末端结合,也能催化分子内连接的环化反应以及分子间的连接反应。最小底物为NpNpNOH(3´-OH Oligomer、受体)、pNp(5´、3´-DP monomer、供体)。连接效率受供体和受体各自的碱基影响很大。与RNA相比DNA连接的效率较低。
产品用途:
1.单链RNA及单链DNA的3´-OH末端的标记。
2.单链Oligo RNA及单链Oligo DNA的合成。
3.合成全长cDNA。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:以Oligo(A)n为底物,在5℃、10分钟内使1pmol[5´–³²P]pCp 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。
·绿豆核酸酶
编号:BTN120408
英文名称:Mung Bean Nuclease
规格:2000U
绿豆核酸酶是来源绿豆芽单链特异性核酸内切酶,生成具有5´-P末端的单核苷酸或寡核苷酸。如果使用过量(1000倍),也可以将寡聚体完全降解为单核苷酸。过量的酶还可以降解双链DNA、RNA或者DNA-RNA杂交体,这时,它会选择性地降解富含AT的区域,易在A↓pN、T↓pN的位置降解,尤其在A↓pN位置上能100%降解,不易在C↓pC、C↓pG的位置降解。其作用原理图如下:
产品用途:
➤杂交作图(与S1核酸酶相比不易发生Nibbling现象,因此能得到正确的电泳带)。
➤ 双链DNA末端的平滑化(平滑化的效率依赖于碱基序列)。
➤在甲酰胺存在的条件下,切出基因编码区。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 绿豆核酸酶(10~50U/μL) | 2000U |
| 10×Buffer | 1ml |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
贮存Buffer:Tris-HCl(pH7.5)10mM,(CH3COO)₂Zn 0.1mM,Glycerol 50%。
反应Buffer(10×):CH3COONa(pH5.0)300mM,NaCl 1M,(CH3COO)₂Zn 10mM,Glycerol 50% 。
活性定义:以热变性小牛胸腺DNA为底物,在37℃、pH5.0的条件下,1分钟内产生1μg的酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
一步式细菌DNA提取试剂盒北京厂家现货关键词:One-step Bacteria DNA extraction kit,BTN60806,一步式细菌DNA提取试剂盒
·X-gal溶液
编号:BTN80910
英文名称:X-Gal Solution
规格:10mL
本产品为浓度为20mg/mL的无色液体。X-Gal是E.coli β-半乳糖苷酶的底物,水解后呈现蓝色。其原理如下:
由于许多常用的克隆质粒载体的多克隆位点都是通过定点诱变的方法被安置在lacZ基因中,所以如果在培养基中加入IPTG诱导剂和X-Gal,则就可以根据菌落的颜色判断菌落中质粒是否携带插入片段(克隆成功与否)。
储存条件:低温运输、-20℃避光保存、有效期一年。
·谷胱甘肽琼脂糖(GST-琼脂糖)
编号:BTN120101
英文名称:Glutathione Agarose
规格:2mL
谷胱甘肽琼脂糖亲和基质是结合谷胱甘肽(GSH)的4%浓度的交联珠状琼脂糖基质,可用于结合和分离纯化带有谷胱甘肽硫转移酶(GST)等谷胱甘肽亲和性蛋白质分子,特别是重组表达的GST融合蛋白。可用于带有GST标签的重组蛋白的纯化和GST pull-down实验。
产品特点:
1.特异性高,不与非GST融合蛋白相结合。
2.高结合量,每毫升基质可结合5~10mg重组GST融合蛋白。
3.高度灵活,可填装任意品牌的柱子。
储存条件:低温运输,4℃保存(切勿冻结),有效期一年。
·Denhardt溶液(非同位素探针)
编号:BTN91104B
英文名称:Denhardt Solution
规格:250mL
本产品是最经典的、用于核酸膜杂交时降低膜对标记探针的非特异结合的试剂,早在Southern杂交出现前10年由Denhardt发明,该产品可用与Southern(含单拷贝基因)、Northern、非同位素杂交(B型规格),与硝酸纤维素膜、尼龙膜等各种常用的核酸杂交介质兼容。A和B分别适用于同位素和非同位素探针。
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。
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·一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒
编号:BTN80201
英文名称:One-step Endotoxin-free plasmid DNA extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在一步式质粒DNA提取试剂盒2.0(BTN70903)和液相内毒素清除剂(BTN60607)两产品的基础上开发出来的无内毒素质粒DNA提取试剂。用本产品提取的质粒DNA,内毒素的污染浓度低,适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。
试剂盒特点:
1.在提取质粒前去除内毒素(存在于细菌表面),从源头上避免料内毒素和质粒DNA 接触,从根本上防止了内毒素对质粒DNA的污染。
2. 独创的一步法质粒DNA提取技术,操作快捷,只需要5-10分钟。
3.质粒回收率高,一次处理后90%的质粒DNA可以回收回来。
4. 得到的质粒DNA可以直接用于转染等实验。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 菌体内毒素清除剂 | 200ml |
| 溶液A | 50ml |
| 吸附柱活化液 | 25ml |
| 离心吸附柱(小提) | 50只 |
| 离心吸附柱(小提)套管 | 50只 |
| 通用预洗液 | 50ml |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(溶液A最好4℃保存),有效期一年。
使用方法:
一:菌体内毒素的清除
1. 收集1.5-3mL E.coli 饱和菌液,12000rpm离心1分钟,弃上清,得到细菌沉淀。
2.在沉淀中加入1mL菌体内毒素清除剂,温和混匀后10000-12000rpm离心1分钟,弃上清(含内毒素)。
3. 再重复上述操作3次,得到的菌体沉淀可以直接进入下面的一步法质粒DNA提取操作。
二:一步法质粒DNA提取
4.在菌体沉淀中加入0.6mL溶液A(用前需摇匀),充分吹打或振荡30秒裂解细菌,直到裂解液变澄清(一般需要半分钟左右)。注:此方法丌同于碱裂解法,故可以充分吹打或振荡。
5.活化离心吸附柱:在离心吸附柱中加入0.5mL 吸附柱活化液,套上收集管后室温放置2分钟,然后12000rpm离心2分钟,倒弃穿透液,再将吸附柱套上收集管后待用。活化后的离心吸附柱必须立即使用。如果丌活化,质粒得率将低20-40%左右。
6. 将第4 步得到的裂解液全部转移到离心吸附柱中,室温静置2分钟使质粒DNA 不膜结合。注意:必须静止2分钟,否则质粒DNA 丌容易吸附上。
7.室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。
8.在离心吸附柱中加入0.6mL的通用预洗液(注意:是通用预洗液,丌是通用洗柱液,丌要用错。通用预洗液非常容易产生沉淀,用前需要加热到60℃左右使之融化,混匀后再用),室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。
9.在离心吸附柱中加入0.6mL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。
10.在离心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。
11.室温12000~15000g离心半分钟,甩干残留液体。
12. 将离心柱置于一个新的1.5mL自备塑料离心管中,加入30-100μL DNA洗脱液2.0,室温放置2分钟。
13. 12000~15000g离心半分钟,离心管底溶液即无内毒素质粒DNA。
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