BTN60706型一管式琼脂糖凝胶DNA回收试剂厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN60706型一管式琼脂糖凝胶DNA回收试剂厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：BTN60706型一管式琼脂糖凝胶DNA回收试剂厂家
英文名：One-tube DNA agarose gel recovery reagent
编号：BTN60706
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：30次
本产品可以直接从溶化的琼脂糖凝胶中沉淀回收单双链DNA的产品，也堪称最快速的胶回收试剂,操作时间只有玻璃奶式和柱式胶回收方法的1/3左右。本产品也可以用于单双链RNA胶回收。

产品特点：
1.超快，整个过程不到15分钟(对一个样品而言)，由溶胶(3分钟)，放置(2分钟)，沉淀(5分钟)和两次洗涤(各1-2分钟)几步组成。
2. 纯度高，回收产物可以直接用于连接、酶切、PCR、测序等各种反应，不影响后续酶反应。
3. 回收率高，一般大于50%。
4.适用范围广，可用于回收普通琼脂糖凝胶能够分离的DNA片段(一般在100bp-50 Kb 之间)，而柱式同类产品几乎都不能回收50 Kb的超大片段。
5.一管式操作，不需要任何样品转移步骤，使大片段DNA 保持完整，同时减少了污染的可能。
6. 既可用于回收单双链DNA，又可用于回收单双链RNA。
7.扩容性好，可以在一个离心管中(包括15mL或50mL离心管)进行大规模回收，没有最大吸附量的限制；而柱式胶回收试剂都受最大吸附量的限制。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	9ml
溶液B	3ml
溶液C	30ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。
  溶液A呈淡黄色，溶液B呈红色，如果颜色发生变化，则表示pH已经改变，请弃之不用。溶液C为无色液体，会在瓶底产生少量晶体状产生沉淀，用前无需溶化，避开沉淀直接取上清液使用)。

使用方法：
1.从琼脂凝胶上切下目的DNA片段，放入1.5mL离心管中。尽可能多地去掉不含DNA的胶。如果方便最好称重以便估计需要的溶胶液(空的1.5mL离心管EP 约0.9 克，一片普通胶片的重量在0.05-0.1 克左右)。
2. 按0.1 克胶加300μL溶液A的比例加入溶液A，65℃保温3分钟使胶融化。其间可用摇晃几次以促进凝胶融化。如果放量使用，溶化胶的时间可能需要延长。
3. 待胶完全溶化后，按0.1 克胶加100μL溶液B的比例加入溶液B，充分混匀。如果回收20 Kb以上的DNA片段，混匀时需要温和震荡；对20 Kb以下的DNA片段，可以剧烈震荡。
4.室温静置至少2分钟，此时管内将出现大量红色颗粒状沉淀。此步十分关键，不能省略而直接离心。
5. 13000 g室温离心5分钟后，小心吸弃上清，管底将有黄豆大小的红色沉淀。
6. 加入0.8mL溶液C，充分震荡混匀。注意：溶液C瓶底有晶体状沉淀，用前无需溶解，但取用溶液C时需要避开沉淀。
7. 13000 g室温离心2分钟，小心吸弃上清，管底将有芝麻大小的白色沉淀。
8. 再用0.2mL溶液C重复第6-7 步一次，管底还有芝麻大小的白色沉淀。
9.小心吸弃上清后即得纯化的DNA沉淀，加入少量TE或水，充分吹打溶解。最后还会有少量白色不溶沉淀，属于正常现象。

疑难解答：
Q：电泳为何不能检测到回收的DNA？
A：最可能原因是各步加入溶液后没有充分震荡混匀，其次是沉淀在各步吸弃上清时候不小心吸走而丢失，三是溶液A和溶液B的pH发生改变。
Q：电泳时为何有残留荧光物在加样孔中？
A：可能是琼脂糖凝胶中的杂质吸附的DNA，吸取DNA样品时最好短暂离心，只取上清液。这些不溶杂质一般不影响后续反应。使用高纯度的琼脂糖可以减少杂杂质的污染。我们一般使用OXOID的琼脂糖，得到的DNA可以用于常见的分子生物学后续反应。

我公司的BTN60706型一管式琼脂糖凝胶DNA回收试剂厂家，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
百里酚蓝-酚酞指示剂   100ml
PY04-086  亚碲酸*溶液  20mg/支×10支  每支添加于100ml葡萄糖球菌增菌肉汤培养基基础中，用于金黄色葡萄球菌增菌培养
69-78-3 5,5-二硫代双(2-硝基*(代"*")甲*(代"酸")) DTNB
ARB11190 人降*素基因相关肽(CGRP)elisa检测说明书 Human calcitonin gene related Peptide,cgrp ELISA KIT
*化银 PLP 7783-90-6
丙*(代"酮")酸检测试剂盒(二硝基*(代"*")肼微板法)   100T
四正丁基碘化铵 D-LDH 311-28-4
58-85-5 D-Biotin(Vitamin H)   D-生物素
2′-脱氧鸟苷-5′-二磷酸三*盐 2-IP 102783-74-4
D-半乳糖醛酸 TES 91510-62-2
2,4-二羟基-6-甲基*甲*(代"酸") Fmoc-Ala-OH 480-64-8
Tris-Maleate缓冲液(0.1mol/L,pH5.08-8.45)   500ml
ARB13902 猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)代做ELISA实验 Porcine vascuolar cell adhesion molecule 1,vcam-1 ELISA KIT
001007 小鼠血清
BTN60706型一管式琼脂糖凝胶DNA回收试剂厂家关键词：BTN60706,一管式琼脂糖凝胶DNA回收试剂,One-tube DNA agarose gel recovery reagent

BL1386 SABC小鼠IgG-FITC/POD双标kit
反-4-甲氧基肉桂酸 TIM 943-89-5
CBZ-L-丝*酸 5′-NT 1145-80-8
Carnoy固定液   100ml|500ml
BTN81208 印迹膜抗体稀释液 Antibody Dilution Buffer
BTN130924 口腔采样拭子 Oral Swab
70-18-8 L-谷胱甘肽(还原型)/还原型谷胱甘肽
脂肪组织固定液   500ml
PY02-429  假单胞CFC选择性培养基基础  250克  
CYB164043 人白蛋白-HRP
F030630 FITC标记兔抗人IgG抗体 Rabbit Anti-Human IgG*FITC
PY02-397  APT琼脂  250克  
DL-丙*酸 Diphenylcarbinol 302-72-7
ARB11154 人肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)elisa检测说明书 Human mast cell tryptase,mct ELISA KIT
二聚对二甲* Brilliant Yellow 1633-22-3
67-42-5 EGTA  乙二醇－双－(2－*基乙基)四乙酸
琼脂糖凝胶6FF X-GalNAc
BTN130859 M13mp18 DNA M13mp18 DNA
芽孢染色液   3×20ml|3×50ml
SJ0409 MUG4 甲基伞形酮葡萄糖苷酸
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·PCR法DNA探针标记试剂盒
编号：BTN90604A
英文名称：PCR DNA Labeling Kit
规格：5次
PCR标记的原理是用带标记的dNTP进行PCR，最后得到的PCR产物将带有标记，可以直接用于杂交试验。其原理示意图如下：


产品特点：
1.一站式，本试剂盒提供经过优化的试剂，不需要用户自己摸索。
2. 足够10次50μl体系的常规PCR(用于制备标记反应的模板和设置对照反应)和5次50μl体系的标记反应。
3.一次标记可以得到μg级的双链DNA探针或约700ng的单链DNA探针，足够多次杂交实验用。
4. 既可用于制备双链探针，也可以用于单链探针。
5. 90604A需自备含标记核苷酸的dNTP，90604B和90604C分别含生物素和地高*(代"辛")标记的底物。自备的标记包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。
6. 本产品得到的探针参入率一般为4-5%(每100个核苷酸中有4-5个将带有非同位素标记)，有效降低了空间阻碍，检测效果最佳。
7.可以用于Southern和Northern Blot、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等分析。

试剂盒组成：

成分	规格
2×标记专用PCR Mix	500μl
dNTP，2mM each	50μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP	25μL(仅B有)
含DIG-11-dUTP的dNTP	25μL(仅C有)
超纯水	1ml
说明书	1份

注：标记专用PCR Mix不含dNTP。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：准备工作
1. 按常规的方法设计PCR引物，使探针长度在400-800bp之间。过短则标记参入少，探针杂交信号强度减弱；过长则非特异杂交增加，背景变强。
2. 根据PCR引物优化PCR条件。
3. 由于标记的dNTP比较珍贵，所以本试剂盒不推荐以基因组DNA或其他复杂DNA为模板直接进行PCR标记，而是建议采取下述的两步法标记来提高成功率，即先制备非标记PCR产物，再以之为模板制备标记的PCR产物。
二：非标记PCR产物的制备
4. 设置50μL PCR的反应体系：

成份	用量
2×标记专用PCR Mix	25μl
dNTP，2mM each	5μl
自备的探针引物一(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的探针引物二(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的模板DNA	1μg基因组DNA或1ng质粒DNA
超纯水	补到50μL

5. 按已经优化的PCR参数进行PCR。
6.电泳检测和胶回收所需的PCR产物，并定量。用10 pmol引物一般能得到1μg左右的PCR产物(具体取决于PCR产物的长度)。注意：最好采取胶回收而不是PCR回收以避免残留引物干扰后续的标记PCR。
三：标记PCR反应(最好做一个不加标记的对照用于定量)
说明：在设置下面反应时，如果加一种引物，就得到单链标记的PCR产物；如果加两种引物，则得到双链标记的PCR产物。由于双链PCR探针在杂交前虽然要变性成单链后使用，但杂交时变性的双链彼此还会复性，这种复性会与探针-靶DNA杂交反应相竞争，降低杂交效率，因此强烈推荐使用单链标记的DNA探针。

成份	样品	对照
2×标记专用PCR Mix	25μl	25μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP或 含DIG-11-dUTP的dNTP或 自备的含其他标记dUTP的dNTP	5μl	不加
dNTP，2mM	不加	5μl
双链标记：探针引物一和引物二 单链标记：探针引物一或引物二	每种50 pmol 一种50 pmol	每种50 pmol 一种50 pmol
上步胶纯化所得PCR产物 (单链标记可用100ng)	10 ng	10 ng
超纯水	补到50μL	补到50μL

 注意：本试剂盒提供的dNTP混合物中，标记底物与非标记底物的比例已经进过优化，如果自备标记dUTP，其与dTTP的最佳比例需要优化，标记不同，比例不同。对DIG-11-dUTP，最佳比例1：3；对BrdUTP，最佳比例为1：1。
7. 按第5步的PCR参数进行标记PCR，但需要进行下列修改：一是循环数增加到35-55个循环。由于模板为纯化后的PCR产物，探针对扩增长度完整性要求不高(长度不均的探针由于能形成网络结构，效果反而更好)，所以可以增加循环数；二是延伸时间增加15秒，因为标记dUTP参入到DNA的速度比常规的dTTP慢；三是降低复性温度5-7℃，因为标记核苷酸参入到DNA后，新模板的Tm值将降低。
8. 标记探针的定量：取标记反应和对照反应的产物1-5μl，在琼脂糖凝胶上跟浓度已知的DNA marker一起电泳，并判断探针的浓度。由于标记反应的PCR产物中额外带有非同位素的配体(生物素，地高*(代"辛")等)、因此其泳动速度将慢于非标记PCR产物(但同位素标记不能用此法)。
 注意：如果扩增的是单链DNA探针，其结合EB的能力远低于双链DNA(EB是嵌合到双链碱基对之间的，而单链DNA没有碱基对，只有一些局部区域折叠形成的有限双链区，因此能结合的EB很少)，因此EB染色的强弱不能准确反应DNA的浓度，可以采用银染定量(跟marker比较)。一般100ng模板按上述条件经过单链PCR扩增可得到700ng左右探针。
9. 剩余的PCR标记产物可以不经过纯化，直接加入(对单链PCR探针)杂或加热变性并急冷后加入(对双链PCR探针)到杂交液中使用。如果暂时不用请放-20℃长期保存。如果需要纯化，请使用乙酸铵/乙醇沉淀法。

我公司生产供应销*(代"售")的核酸电泳和回收正全品类优惠促销，十分期待您的咨询选购BTN60706型一管式琼脂糖凝胶DNA回收试剂厂家。