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- 详细信息
- 技术资料
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355
- 英文名:
Apoptotic DNA extraction kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京凋亡DNA提取试剂盒优惠促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京凋亡DNA提取试剂盒优惠促销
英文名:Apoptotic DNA extraction kit
品牌:百奥莱博
编号:BTN130812
规格:24次
细胞凋亡是生命个体中的调控基因为了维持个体生命,调控细胞进行新陈代谢,促使不需要的细胞或者具有危险性的细胞自我凋亡(自杀)的现象,与细胞的发生、分化、生理现象(特别在免疫方面)有着密切关系。细胞凋亡时,染色体DNA以核小体为单位(185bp)进行DNA片断化产生DNA Ladder,这些被片断化了的DNA片段,可以使用电泳的方法进行检出。本试剂盒能够从培养细胞中选择性地提取片断化DNA,能够最大限度地抑制起妨碍作用的完整的染色体DNA的混入,并可以通过电泳法进行高效检出。
产品特点:
1.操作简便:使用Ready-to-Use型试剂。
2.高灵敏度:能够高灵敏度地检出凋亡细胞的片断化DNA。
3.高特异性:抑制完整的染色体DNA的混入,选择性地提取片段化DNA。
4.快速操作:整体操作约需2.5小时。
5.定量性:与荧光色素组合可以对片断化DNA进行定量。
6.安全性:不使用*酚*仿等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 120ml |
| 溶液B | 1ml |
| 溶液C | 120μl |
| RNase A溶液(2mg/mL) | 60μl |
| Proteinase K溶液(10mg/mL) | 30μl |
| 微量核酸沉淀剂 | 3ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.冰上操作,将细胞样品(106-107)重悬于0.5mL Hanks平衡盐溶液(自备)或其他常用细胞缓冲液中。
2.将细胞重悬液与5mL溶液A混合,轻柔颠倒混匀后冰上放置4小时。如果暂时不用,可在-20℃最长保存四周。
3.800g离心5分钟,彻底移弃上清。
4.在细胞沉淀中加入40μL溶液B重悬细胞沉淀,室温放置至少30分钟,期间摇动数次。为方便离心,可将细胞重悬液转移至新的0.5mL或1.5mL Eppendorf离心管中,
5.800g离心5分钟,将上清移入到新的Eppendorf管中,并在SpeedVac上真空离心浓缩15分钟。
6.向浓缩物中加入5μL溶液C和2.5μl RNase A溶液(2mg/mL),混匀后37℃保温30分钟。
7.再加入1μl Proteinase K溶液(10mg/mL)溶液,37℃保温30分钟。
8.加5μl电泳上样缓冲液(自备),常规0.8%琼脂糖电泳分离、EB染色并观察电泳条带。
9.如果所得凋亡DNA溶液需要纯化(溶液中有proteinase K等),需要继续纯化,则加入50μL酚*仿混合液(自备),震荡3分钟混匀,13000g离心3分钟后转移上清到新离心管中,再加入2倍体积(约100μL)微量核酸沉淀剂,混匀后13000g离心15分钟,弃上清,再用1mL 75%的乙醇洗涤一次,空气放干后加入适当体积的水或TE溶解沉淀,所得溶解即凋亡片段DNA溶液。
使用效果:
使用本产品提取细胞DNA效果图。M为DNA Marker,最大条带1.3Kb。
1为正常非凋亡细胞DNA。2为凋亡细胞DNA。
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·柱式白色念球菌RNA提取试剂盒
编号:BTN130847
英文名称:Candida albicans RNA Column extraction kit
规格:50次
·PCR级高GC的DNA清除剂
编号:BTN61203
英文名称:High GC DNA Scavenger
规格:1.5mL
本产品是我司开发的专门用于富含GC的DNA模板扩增的试剂。
产品特点:
1.高效,使用效果普遍好于常规的添加DMSO和甜菜碱的方法。
2.可以处理GC含量高达80%的DNA模板。
3. 操作简单,将本产品用于溶解DNA沉淀即可使用。
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
将乙醇沉淀的高GC DNA直接溶解在适量的本产品中,充分吹打均匀,然后直接将DNA加入PCR反应体系中进行PCR反应。加入的DNA溶液最好不要超过PCR终体积的1/10。剩余的DNA可以长期保存。
·小牛胸腺DNA溶液
编号:BTN131207
英文名称:Calf Thymus DNA Solution
规格:1mL
本产品是浓度为10mg/mL的、经过热变性处理的单链小牛胸腺DNA溶液,可以用于Southern、Northern预杂交,还可以用于酵母化学转化和电转化。本产品即开即用,非常方便。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·柱式血液RNA大量提取试剂盒
编号:BTN80902
英文名称:Blood RNA Column large-scale extraction kit
规格:5次
本试剂盒是在柱式血液RNA提取试剂盒(BTN71202)基础上开发的大提升级产品,专门从动物全血样品中快速提取总RNA。跟柱式血液RNA提取试剂盒相比,本产品具有下列特点:
1.大量提取,每次最多可处理 30mL血液。
2. 操作简单快捷,直接使用新鲜的或冷冻的抗凝全血样品,不需要裂解红细胞等任何预处理步骤,整个提取过程只需要十分钟左右,可以全在室温下进行。
3. 纯度高,OD260/OD280 均在2.0左右,得到的RNA可以直接用于RT-PCR和Northern杂交等研究。
4.产率一般为2-5μg/mL人血。
5.与常用的抗凝剂(包括肝素,EDTA,柠檬酸*,草酸*)兼容。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 100ml |
| 溶液B | 30ml |
| 溶液C | 100ml |
| 大提离心吸附柱 | 5套 |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将10-30mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到50mL塑料离心管中。
2. 12000~15000g室温离心5分钟,弃上清(血浆)。
3. 将20mL溶液A加入到血液细胞沉淀中,用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
4. 将6mL的溶液B和4mL *仿加入到离心管中,剧烈震荡30秒。
5. 12000~15000g室温离心3~5分钟,将上清液(为无色或浅红色)转移到另一干净离心管中。注意:转移的液体不要超过25mL,否则下一步不能加入等体积的溶液C。为防止污染,最好留少量上清液。下层有机相一般呈深红色,中间层为白色,含有DNA,蛋白质和其他细胞破碎物,避免触及或吸取。
6. 加入等体积的溶液C,充分颠倒混匀。
7. 分两次将溶液转移到离心吸附柱中,每次转移后12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加 25mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 重复步骤 8一次。
10.室温 12000~15000g离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的后续反应。
11. 将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入1mL RNA 洗脱液,室温放置1-2分钟。
12. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
14. RNA产量产率测定:将5-10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。人血RNA产率一般为2-5μg/mL。
15. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在2.0左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
疑难解答:
Q: 如何去除RNA样品中的DNA污染?
A:可以使用百奥莱博的非酶DNA 清除剂DNA ERASOL-2。
Q: 为何有的样品在第6 步离心后有很厚的中间层,上清很少。
A: 这是因为蛋白质变性不充分,可以适当减少血液的用量。白细胞多的血液容易产生这种情况。
北京凋亡DNA提取试剂盒优惠促销关键词:Apoptotic DNA extraction kit,凋亡DNA提取试剂盒,BTN130812
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