cDNA第一链合成试剂盒(逆转录试剂盒)(RT试剂盒)特价优惠

cDNA第一链合成试剂盒(逆转录试剂盒)(RT试剂盒)特价优

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  • ¥160 - 1680
  • 百奥莱博
  • BTN60906-PYW
  • 北京
  • 2025年07月10日
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      811

    • 英文名

      1st-Strand cDNA Synthesis Kit

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      低温运输

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博供应的cDNA第一链合成试剂盒(逆转录试剂盒)(RT试剂盒)特价优惠用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多cDNA第一链合成试剂盒(逆转录试剂盒)(RT试剂盒)等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。


    名称:cDNA第一链合成试剂盒(逆转录试剂盒)(RT试剂盒)特价优惠
    品牌:百奥莱博
    规格:50次
    英文名:1st-Strand cDNA Synthesis Kit
    产地:国产|进口
    本试剂盒提供合成cDNA第一链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成mRNA的全长cDNA拷贝。

    产品特点:
    1. 使用突变的反转录酶,内源RNase H活性低。
    2. 最长可合成13Kb的cDNA。
    3.可以使用oligo-dT、随机引物和RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提供)。
    4. 总RNA、poly(A)+RNA或特殊RNA 均可作为模板。
    5.可用于cDNA文库构建、RT-PCR、探针标记等。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    MMLV(含RI) 100μl
    RT Buffer(含dNTP) 300μl
    Oligo(dT)18引物(0.5μg/μL) 50μl
    Random Primer(0.2μg/μL) 50μl
    RNase-free水 1ml
    说明书 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:

    一:合成PCR用的1st-strand cDNA
    1. 按下表配制RT反应体系:
    RNA 模板  
    总RNA 100-500ng
    或poly(A)mRNA 10-500ng
    或专一的RNA 0.01pg-500ng
    注意:RNA样品不能含有基因组DNA污染。

    引物
    Oligo(dT)18(0.5μg/μL) 1μl
    或随机引物(0.2μg/μL) 1μl
    或RNA 模板专一性引物 15-20 pmol
    注意:随机引物与RNA 模板的比例跟cDNA 合成的平均长度成反比。
    RNase-free水 补水到13μL

    2. 70℃保温5分钟后立即冰浴。
    3. 再加入5μl RT Buffer(含dNTP)。
    4. 37℃保温5分钟。对富含二级结构的高GC RNA 模板,可以改成45℃保温5分钟。如果使用随机引物,则改成25℃ 5分钟。
    5. 加入2μL MMLV逆转录酶(含RI),反应终体积为20μL。
    6. 42℃保温60分钟(但如果使用随机引物,需要先25℃保温10分钟,然后再转移到42℃保温60分钟)。此步为RT反应。
    7. 70℃保温10分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的cDNA可以直接作为PCR 模板使用,不需要纯化。

    二:合成建文库用的1st-strand cDNA
    1. 按下表配制RT反应体系:
    RNA模板  
    poly(A)mRNA 1μg
    或专一的RNA 0.5-1μg
    注意:RNA样品不能含有基因组DNA污染。
    引物  
    Oligo(dT)18(0.5μg/μL) 1μl
    或随机引物(0.2μg/μL) 1μl
    或RNA模板专一性引物 100 pmol
    注意:随机引物于RNA模板的比例跟cDNA合成的平均长度成反比。
    RNase-free水 补水到13μL

    2. 70℃保温5分钟后立即冰浴。
    3. 再加入5μl RT Buffer(含dNTP)。
    4. 37℃保温5分钟。对富含二级结构的高GC RNA模板,可以改成45℃保温5分钟。如果使用随机引物,则改成25℃ 5分钟)。
    5. 加入2μl MMLV逆转录酶(含RI),反应终体积为20μL。
    6. 42℃保温60分钟(但如果使用随机引物,需要先25℃保温10分钟,然后再转移到42℃保温60分钟)。此步为RT反应。
    7. 70℃保温10分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的cDNA可以用于第二链cDNA的合成或放置在-20℃长期保存。

    三:用对照模板合成cDNA(需要用同位素,需要对照的客户需要单独跟我司联*(代"系"))
    1. 按下表配制RT反应体系:
    对照RNA模板(0.5μg/μL) 2μl
    引物
     
    Oligo(dT)18(0.5μg/μL) 1μl
    或随机引物(0.2μg/μL) 1μl
    或对照专用引物 2μl
    RNase-free水 补水到13μl

    2. 70℃保温5分钟后立即冰浴。
    3. 再加入5μL RT Buffer(含标记dNTP,本试剂不提供)。
    4. 37℃保温5分钟。如果使用随机引物,则保温温度只能是25℃。
    5. 加入2μL MMLV 逆转录酶(含RI),反应终体积为20μL。
    6. 42℃保温60分钟(但如果使用随机引物,需要先25℃保温10分钟,然后再转移到42℃保温60分钟)。
    7. 加1μL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
    8.电泳检测。合成的cDNA的量一般有加入RNA总量的50%以上,电泳一般能出现1.1Kb的片段(如果使用随机引物,将出现多个小片段)。

    cDNA第一链合成试剂盒(逆转录试剂盒)(RT试剂盒)特价优惠极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:

    ·DNA marker(100-5000bp)
    编号:BTN70503Y
    英文名称:DNA ladder(100-5000bp)
    规格:50次
     本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

    储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5μL。

    使用效果:
    DNA ladder(100-5000bp)
    注:500bp条带为20ng/uL,其余每条带为10ng/uL

    疑难解答:
    a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
    b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
    c)本产品条带均匀,亮度相当,但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色,加大EB浓度等方法解决。


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    ·大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant化学感受态细胞
    编号:BTN140430
    英文名称:E.coli OmniMAX2-T1 Phage Resistant Chemical Competent Cell
    规格:0.1mL*10
     本产品是采用大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,本产品转化效率可达10⁹。本产品具有四环素抗性。

    菌株基因型为:F- {proAB+ lacIq lacZΔM15 Tn10(TetR)Δ(ccdAB)} mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80(lacZ)ΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169 endA1 recA1 supE44 thi-1 gyrA96 relA1 tonA panD

    储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。

    自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。

    使用方法:
    1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
    以下实验以50μL感受态细胞为例。
    2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
    3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
    4. 每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
    5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。

    注意事项:
    1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
    2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
    3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


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    ARB11910 人癌基因蛋白质p190/bcr-Abl elisa测定使用说明书 Human oncogene protein p190/bcr-abl ELISA KIT
    PY02-426  假单胞分离肉汤  250克  
    ARB11055 人*丙*酸(LPA)含量检测 Human l-phenylalanine,lpa ELISA KIT
    ARB10703 人多巴胺D1受体(D1R)酶标法分析 Human dopamine d1 receptor,d1r ELISA KIT
    D-泛酸* Reinecke salt 867-81-2
    木瓜蛋白酶 Silicotungstic acid hydrate 9001-73-4
    Tris*盐缓冲液(1×,pH7.8)   500ml
    花宝3号 α-Bromoisobutyric acid
    ARB13905 猪血管生成素2(ANG-2)酶免分析 Porcine angiopoietin 2,ang-2 ELISA KIT
    BL1137 BL21(DE3)感受态细胞
    PY02-327  5%-8%羊血琼脂基础  250克  
    磷钼酸水溶液(1%)   100ml
    F030310 胶体金标记羊抗乙肝表面抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBsAg*GOLD
    ARB12933 小鼠丝*酸/苏*酸蛋白*(代"磷")酸酶(STK)elisa检测 Mouse serine/threonine protein kinase,stk ELISA KIT
    L-高*丙*酸乙酯盐*(代"酸")盐 TBPB 90891-21-7
    天门冬*酸*基转移酶(AST)检测试剂盒(赖氏微板法)   100T
    N-甲基-D-葡糖胺 MBTH Hydrochloride 6284-40-8
    BL1225 Hanks,含**,含酚红(HBSS)

    我公司正在打折促销核酸扩增(PCR)全系列产品,恭候您的咨询选购cDNA第一链合成试剂盒(逆转录试剂盒)(RT试剂盒)特价优惠

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