一管式双链cDNA合成试剂盒价格

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百奥莱博专业生产销*(代"售")一管式双链cDNA合成试剂盒价格，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：一管式双链cDNA合成试剂盒价格
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：One-Tube double-stranded cDNA Synthesis Kit
编号：BTN130308
本产品是用于一管式双链cDNA合成的试剂盒。cDNA第一链合成的原理是以OligodT为通用引物的、MMLV催化的逆转录反应。其原理如下：


cDNA第二链合成的原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口，再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链，其原理图如下：


产品特点：
1. 即开即用，含有合成两条cDNA链的所有试剂。
2.适用于含poly rA的RNA，对不含poly rA的RNA(如细菌RNA)，不能使用本试剂盒制备ds cDNA。
3.一管式进行，第一链cDNA合成后不需要任何处理，直接进入第二链的合成。
4. 所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。
5. 本试剂盒足够10次80μL体系的双链cDNA合成反应。
6. 如果需要合成全长cDNA，最好选用SMART全长cDNA双链合成试剂盒。

试剂盒组成：

 

成分	规格
Oligo dT引物	10μl
cDNA第一链合成缓冲液	40μl
MMLV 逆转录酶(200U/μL)	10μl
5×cDNA 第二链合成缓冲液	160μl
20×cDNA 第二链合成酶混合液	40μl
T4 DNA聚合酶	20μl
0.2 M EDTA溶液	40μl
超纯水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：mRNA的制备
本试剂盒不提供mRNA提取试剂，用户需自备相关试剂。

二：双链cDNA的合成
1.在一个干净的塑料离心管中，按下表设置cDNA合成反应：

成分	用量
自备mRNA样品	4μl(0.5-2μg)
Oligo dT引物	1μL
70℃ 2分钟后室温放置2分钟，短暂离心
cDNA 第一链合成缓冲液	4μL
MMLV 逆转录酶	1μL
轻柔吹打混匀后42℃保温90分钟合成第一链cDNA
超纯水	48μL
cDNA 第二链合成缓冲液	16μL
cDNA 第二链合成酶混合液	4μL
轻柔吹打混匀后，短暂离心，16℃保温2小时
自备的T4 DNA聚合酶	2μL
轻柔吹打混匀后，16℃继续保温30分钟
0.2M EDTA溶液	4μL

注：如果不需要将双链cDNA平末端化，则可以跳过T4 DNA聚合酶处理步骤。
2.电泳5μL检测cDNA质量。如果cDNA在0.5-10Kb的范围内呈模糊一片，则cDNA合格。如果没看见cDNA或有其他异常，需查找原因后再继续。
3. 所得cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA 文库构建、抑制性差减杂交等实验。

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PY02-361  七叶苷培养基  10克  
HC0217 尼龙细胞塞网
F030822 BIOTIN标记兔抗人IgG FC抗体 Rabbit Anti-Human IgG(FC)*BIOTIN
多聚甲醛溶液  10%|8%|3%|1% PFA 500ml
PY02-408  HC琼脂基础  250克  
F010101 小鼠抗乙肝表面抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBsAg
BTN90707 动植物总蛋白微量提取试剂盒 Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit
十八胺 ADA 124-30-1
ARB11814 人膜辅蛋白(MCP/CD46)ELISA代测服务 Human membrane cofactor protein,mcp ELISA KIT
ARB11811 人睾酮(T)检测服务 Human testoterone,t ELISA KIT
去氧野艽霉素盐*(代"酸")盐 PAR sodiu*(代"m") salt 73285-50-4
BTN130984 DNase I溶液 DNase I Solution
BTN120404 碱性磷酸酶,牛小肠 Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal
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1806-34-4 POPOP 1,4-双(5-*基恶唑)*
17502-048 N-2
BL1110 AP标记抗体稀释液
ARB13569 兔子白三烯B4(LTB4)Elisa方法检测 Rabbit leukotriene b4,lt-b4 ELISA KIT
F020110 山羊抗乙肝核心抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBcAg
对*二甲*(代"酸") 2,3-Dimethylmaleic anhydride 100-21-0
白细胞稀释液(计数用)   100ml
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·SDS-PAGE预制胶
编号：BTN100915
英文名称：Instant SDS-PAGE Gel
规格：10块
本产品是一种高性能低成本聚丙*(代"烯")酰胺预制凝胶，广泛应用于遗传学，分子生物学，细胞生物学，微生物学，植物学等各个学科领域中蛋白质的分离及分子量的测定。本产品是将凝胶事先配制好，制成预制胶，使用者可直接上样进行电泳。

产品特点：
1．分辨率高，条带清晰，电泳效果极佳；
2．保存期长，常温12个月；
3．胶夹打开极为轻松，无需起撬工具；
4．专利loading guide，加样方便；
5．兼容目前市场各种电泳槽，如BIORAD(11/3/Tetra System)，天能和君意东方等；
6．可用于SDS变性及非变性电泳；
7．8%，12%及6%-18%梯度等多种不同浓度供选择；
8．电泳时间短，在200V电压下，电泳30分钟即可完成。

使用效果：


产品组成：

成分	规格
预制胶	10块
电泳缓冲液粉末	1包
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

自备试剂：SDS-PAGE上样液。

使用方法：
1．在操作前请将产品配套的电泳缓冲液粉末溶解至3L待用。
2．撕开包装取出胶，将预制胶固定在电泳槽(Bio-Rad Mini-PROTEAN(11/3/Tetra System)或Hoefer Mighty Small(SE 250/ SE 260/ SE 280))中，加入电泳缓冲液没过梳齿部位，推荐的缓冲液使用量为300mL。
3．双手按住梳子左右部位将其平稳缓慢拔出，上样后电泳。使用150v -200v电压，30-40分钟，电泳过程中无需变换电压。
4．电泳结束后，取出胶板。由于本预制胶特殊设计，胶夹很容易打开。使用镊子或者梳子即可轻轻撬开。


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·痰液采集器
编号：BTN130938
英文名称：Sputum collector
规格：1个

·柱式动物DNA提取试剂盒
编号：BTN71206
英文名称：Animal DNA column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是在我司动物DNA提取试剂盒的基础上改良而得的柱式升级产品，主要用于快速提取新鲜或冷冻的动物组织中的基因组DNA。

产品特点：
1. DNA更加纯净，大多数DNA样品的OD260/280值在1.8-1.9之间。
2. DNA产率一般在200μg/g左右(跟组织种类密切相关)。
3.可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应。
4. 操作更加简单，离心吸附操作代替离心沉淀，整个过程室温操作约10分钟，适合大规模样品处理。
5. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
6. 性价比高，质量和国外同类产品相当，但价格更便宜。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	40ml
溶液B	20ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存、有效期一年。

使用方法：
注意：溶液A容易产生沉淀，溶液B十分粘稠，用前均需要在65℃水浴中加热使沉淀溶解或粘稠度降低，用前充分摇匀。

1. 根据使用材料的不同进行下列操作：
a)对贴壁细胞：吸尽培养液，在每10平方厘米细胞中加入0.8mL预热的溶液A，用枪充分吹打以确保细胞全部裂解，然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。
b)对悬浮细胞：离心收集细胞，吸尽液体，在每1-5×106悬浮细胞中加入0.8mL预热的溶液A，用枪充分吹打以确保细胞全部裂解。然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。如果是fibroblasts或carcinoma细胞，0.8mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜或冷冻的组织：先将剪切成小块的新鲜组织或冷冻保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中，每50-100mg组织加0.8mL预热的溶液A，用剪切式匀浆器匀浆30秒左右，然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA)，建议组织的使用量不要超过50mg。
d)对DNAhold保存组织：先用纸吸去DNAhold液体后再剪切成小块，其余操作同新鲜或冷冻组织的处理。
2. 加入0.4mL预热的溶液B到裂解液中。由于溶液B十分粘稠，可将1mL枪头剪掉一截再用，也可以用称量方法加0.4 g。加入溶液B后需要颠倒数次充分混匀。
3. 65℃水浴5-10分钟。如果室温放置，DNA产量将降低10-20%。
4. 加入0.2mL自备*仿，振荡器上充分振荡混均30秒，此时溶液将呈乳白色。一定要确保离心管底的液体被震荡起来。
5. 12000～15000g室温离心2分钟。上清透明，中间层为白膜(蛋白层)。
6.小心将上清液平均转移到两个新的离心管中，避免触及中间的白膜。
7. 每个管中加入1.5倍体积的溶液C，充分颠倒混匀。
8. 分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液，然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液)。
9. 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
10. 加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
11. 12000～15000g室温再离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
12.室温放置半分钟使残留乙醇挥发。
13. 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中，加入50-100μL DNA洗脱液2.0，室温放置离心吸附柱1-2分钟。
14. 12000～15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为DNA样品，可以立即使用或存放于冰箱待用。

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