Dam甲基转移酶现货促销

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百奥莱博专业生产销*(代"售")Dam甲基转移酶现货促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：Dam甲基转移酶现货促销
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：Dam Methyltransferase
编号：BTN120505
Dam甲基转移酶能对序列中的腺嘌呤(N6)进行甲基化。

产品组成：

 

成份	规格
Dam甲基转移酶(8U/μL)	62.5μL
10×Buffer	1mL
使用手册	1份

活性定义：1单位指在10μl反应体系中，37℃条件下，1小时能保护1μg λDNA不被Mbol限制性内切酶切割所需要的酶量。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。


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Dam甲基转移酶现货促销关键词：Dam Methyltransferase,Dam甲基转移酶,BTN120505


·TBE电泳液，10×
编号：BTN90313
英文名称：10×TBE Buffer
规格：250mL
TBE Buffer全名为Tris-Borate-EDTA buffer。它主要用于DNA的琼脂糖电泳和DNA和RNA的PAGE电泳。跟TAE相比，其特点是含硼*(代"酸")，可能会影响连接等后续酶反应。硅胶模回收时，回收率比TAE低。缓冲能力强于TAE，可反复使用几次。PAGE电泳最好使用1×，琼脂糖电泳可以使用0.5×。线性双链DNA的泳动速度慢于TAE。最好不要使用含甘油的上样品液，因为甘油可使硼*(代"酸")多次解离，改变pH。

储存条件：常温运输及保存、有效期一年。长时间放置可能会出现沉淀。

·超级杂交液(原位杂交)
编号：BTN130906
英文名称：Super hybrid solution(In situ hybridization)
规格：10mL
本产品为我司开发的即用型原位杂交专用核酸杂交液。既可以用于RNA原位杂交、DNA原位杂交，也可以用于FISH原位杂交等试验。

原位杂交是在一定生物结构基础之上的核酸杂交。这种结构基础可以是一条染色体；一个细菌；更大结构基础是细胞和组织。基本原理是两条核苷酸单链片段，在适宜的条件下，通过*键结合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA 双键分子，应用带有标记的(有放射性同位素，如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高*(代"辛")等非放射性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针，与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交，然后可用放射自显影等方法予以显示，在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在并定位；用原位杂交技术，可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。此方法有很高的敏感性和特异性，可进一步从分子水平来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

使用方法：(以检测mRNA序列为例)

培养细胞和冰冻切片
1. 玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为DμLbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4. 30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5. 暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片加20μL预杂交液(提前加入鲑鱼精DNA，终浓度为100μg/ml)。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
 注：靶DNA的变性，DNA-DNA杂交检测中，在杂交前需要增加靶DNA的变性步骤(对mRNA的原位杂交无需此步)。样品DNA的变性可能会造成样品形态学的部分破坏，此步是实验中需要优化的一个步骤。实验时可以摸索变性时间、变性温度等参数以获得最佳条件。可以将探针的变性和样品DNA变性同步进行：将样品和探针溶液加盖盖玻片，置于烘箱80℃变性 ，处理5-10 min，后冷却至37℃进行杂交。
8.杂交——按每张切片20μL杂交液(探针浓度约为1ng/μL；杂交液提前加入鲑鱼精DNA，终浓度为100μg/ml)，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃ 0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃ 0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃ 30分钟。甩去多余液体，不洗。
11. 根据探针标记物，选择相应显色方法显色、复染，脱水、封片。
12. 结果观察。

石蜡切片
 如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
5.其余步骤和冰冻切片6-11步相同。
6. 结果观察。


Dam甲基转移酶现货促销关键词：Dam Methyltransferase,Dam甲基转移酶,BTN120505


·红色DNA上样液(6×,非甘油)
编号：BTN130958A
英文名称：DNA Loading Buffer(Red)
规格：10mL

·单细胞裂解液(RNA提取)
编号：BTN130804
英文名称：Single Cell Lysis Solution
规格：1mL
本产品为单细胞RNA提取专用裂解液，本裂解液经多次优化，含有多种去污剂、变性剂和盐，可有效抑制核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏，维持核酸结构的稳定含有常用。纯化所得RNA可用于测序、单细胞PCR等实验。本产品足够使用200次以上。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期两年。

·海洋动物DNA提取试剂盒(柱式提取)
编号：BTN130401
英文名称：Marine animal DNA column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是在柱式动物DNA提取试剂盒(BTN71206)试剂盒基础上优化改良而得，专门针对海洋动物的基因组DNA提取的试剂盒，可用于鱼类、虾类、贝类、蟹类等海洋动物和水产动物的荃因组DNA提取，可以有效去除海洋动物组织中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。

产品特点：
1. 使用本试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规分子生物学操作，如:酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等试验。
2. 操作简单安全，1小时内即可获得超纯的基因组DNA，纯化过程中不需要使用*酚*仿等有机试剂。
3. 应用广泛，适用于多种动物细胞和动物组织等。
4. 性价比高，质量和国外同类试剂盒相当，价格更低。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
蛋白酶K溶液(20mg/mL)	1ml
溶液B	15ml
溶液C	13ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	15ml
通用洗脱液	15ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(蛋白酶K溶液需要低温运输，-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
使用前请先在溶液C和通用洗柱液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

1. 切取不多于30mg的组织材料，放入装有200μL溶液A的离心管中，涡旋振荡15秒。注意：根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20mg。如果需要去除RNA，可加入40μL RNase A(10mg/mL)溶液(客户自备，BTN3160)，振荡15秒，室温放置5分钟。
2. 加入20μL蛋白酶 K溶液(20mg/mL)，涡旋混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。在56℃下放置，直至组织完全溶解，简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。注意：不同组织裂解时间不同，通常需0.5-2小时即可完成。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全，虾和鱼类组织1小时。每小时振荡混合样品2-3次，每次振荡混匀15秒。
3. 加入200μl溶液B，充分颠倒混匀，70℃放置10分钟，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。注意：加入溶液B时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA 量少和提取出的DNA 不纯。
4. 加入200μl 无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
5. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个离心吸附柱中(吸附柱放入收集管中)，12000rpm(～13,400×g)离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放回收集管中。
6. 向离心吸附柱中加入500μl溶液C(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm(～13,400×g)离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
7. 向吸附柱中加入600μl 通用洗柱液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm(～13,400×g)离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
8. 重复操作步骤7。
9. 将吸附柱放回收集管中，12000rpm(～13,400×g)离心2分钟，倒掉废液。将吸附柱置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
10. 将吸附柱转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μl 通用洗脱液，室温放置2-5分钟，12000rpm(～13,400×g)离心2分钟，将溶液收集到离心管中。注意：通用洗脱液的体积不应少于50μl，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱中，室温放置2分钟，12000rpm(～13,400×g)离心2分钟。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用超纯水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5 范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA 降解。

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