北京现货柱式酵母质粒DNA提取试剂盒优惠价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货柱式酵母质粒DNA提取试剂盒优惠价，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货柱式酵母质粒DNA提取试剂盒优惠价
规格：50次
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
本试剂盒是专门用于提取酵母质粒DNA的产品(不适用于酵母dsRNA质粒)。本产品根据酵母细胞壁十分坚硬的特点，在细菌质粒碱裂解法的基础上，增加了高效裂解酵母细胞壁的预处理步骤，可在1小时左右得到可以用于PCR或转化酵母质粒DNA。

试剂盒特点：
1.快速，整个过程只需要一个小时左右，可同时处理多个样品。
2. 得到的酵母质粒DNA 纯度高，可直接用于转化和PCR等实验。
3.可以从平板上的菌斑或液体培养的酵母中抽提质粒DNA。
4. 安全，不需使用玻璃珠、酚、*仿等试剂。
5. 每5-10mL 酵母培养液一般可以提取到1μg左右的高拷贝酵母质粒DNA。
6. 即开即用，经济实惠，客户自己不需要准备额外的试剂。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	13ml
溶液C	13ml
溶液D	18ml
破壁酶	50mg
RNase A溶液10mg/mL)	0.15ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(RNase A溶液4℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 将5-10mL 酵母过夜液体培养物分多次转移到1.5mL塑料离心管中。每转移一次后，需要12000～15000×g室温离心1分钟，然后吸弃液体培养基。注意：不要使用培养时间超过16小时的酵母液体培养物，否则质粒DNA产量偏低；也不要使用超过10mL的酵母液体培养物，否则破壁不充分，降低质粒DNA产量。
2. 加入1mL自备的无菌水，充分震荡混匀，12000～15000×g室温离心1分钟，吸弃上清。
3. 加入600μl溶液A，充分震荡细胞沉淀重悬，95℃保温10分钟。
4. 12000～15000×g室温离心1分钟，弃上清液。
5. 加入250μl含破壁酶的溶液B(配制方法是将本试剂盒提供的50mg 粉末状的破壁酶和0.15mL RNase A溶液全部加入到装有13mL溶液B的塑料瓶中，轻柔摇晃混匀后使用。未用完的部分需要分装成小份然后放-20℃保存，否则破壁酶很容易失去活性)，吹打混匀。
6. 37℃保温30分钟，延长保温时间到60分钟有利于细胞壁的裂解。注意：放置较长时间后，溶液B中的裂壁酶会逐渐失活，额外再加入一些裂壁酶(如蜗牛酶、Lyticase、Zymolyase、Lywallzyme等，总浓度为1mg/mL)可以极大提高产量。
7. 将离心管放冰浴冷却后，加入250μl溶液C，轻轻颠倒混匀直至裂解液变得澄清，然后室温放置5-10分钟。注意：不要剧烈震荡，否则基因组DNA 将断裂并污染质粒DNA。
8. 加入350μl溶液D，轻轻颠倒混匀几次，管内将出现白色沉淀物，然后冰浴放置10-30分钟(如果质粒较长，最好放置30分钟)。
9. 12000～15000×g室温离心6-10分钟，将上清液转移到离心吸附柱中。
 注意：不要将漂浮在液面的沉淀物(如果有的话)转移到离心吸附柱中。上清液可以分多次转移。
10.室温下放置至少2分钟以让质粒DNA 充分结合到离心吸附柱上。
11.12000～15000×g室温离心1分钟，弃穿透液。
12. 将500μl 通用洗柱液加入离心吸附柱中，12000～15000×g室温离心1分钟，弃穿透液。
13. 重复上步操作一次。
14.12000～15000×g室温离心1分钟去除离心吸附柱中残留液体。不要此步省略，否则残留洗液将影响后续的电泳、PCR和转化实验。
15. 将离心吸附柱套在一干净的1.5mL塑料离心管中，加入30-100μl DNA 洗脱液2.0(加入的量取决于预期的DNA浓度)至离心吸附柱的膜的中央。
16.室温下放置至少2分钟。
17.12000～15000×g室温离心1分钟以洗脱DNA。
18. 如有必要，可以再加入适量DNA 洗脱液2.0洗出残留的DNA。第二次洗脱得到的DNA的产量约为第一次的30-50%。不要将已经洗脱的、含DNA的溶液再加上去。

关于北京现货柱式酵母质粒DNA提取试剂盒优惠价的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·生物素化兔IgG
编号：BTN131102
英文名称：Biotin-Rabbit IgG
规格：5mg
本产品为生物素标记的IgG，溶于含有0.04%叠氮*的PBS或HBS(10mM HEPES，0.15M NaCl，pH7.8)。可用于检测细胞或组织中的低浓度的Fc受体或抗免疫球蛋白抗体。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·核酸印迹膜染液
编号：BTN70104
英文名称：Nucleic Acid Membrane Stain
规格：250mL
本产品可以对已经转移到印迹膜上的DNA和RNA进行快速染色，在不需要UV等仪器条件下确认转膜效果。可以用于Southern、Nothern和碱变性胶印迹膜。

产品特点：
1. 无毒环保，来于一种常用的灭菌剂。
2.快速方便，5-10染色即可直接照相保存或扫描保存。
3.可逆，可被预杂交液中的SDS 洗脱，不影响后续杂交反应。
4. 灵敏度为20 ng/条带(包括DNA和RNA)，跟EB相当。
5.跟各种印迹膜兼容，可用于Gene-Screen、BioTrace RP、Zeta-Probe、Nytran、Hybond、Duralon等尼龙膜，也可用于PVDF 膜和硝酸素膜时背景稍高)。
6.可以反复使用。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
1. 按常用的印迹法、电转法等方法将电泳胶中的DNA或RNA转移到印迹膜上并根据印迹膜的性质进行UV 交联或加热烘烤，将核酸固定。
2. 如果是RNA甲醛变性胶的印迹膜，最好用去离子水洗涤印迹膜30秒钟以除去甲醛(甲醛会干扰染色)
3. 将湿润的印迹膜浸入到装有足够印迹膜染液(本产品)的容器中。如果印迹膜很干，则需要先用1×SSPE或1×SSC溶液湿润。
4.室温下轻柔摇晃染色5-10分钟。印迹膜上DNA或RNA量大时染色时间可能不需要5分钟，染色时间过长背景会增加。
5. 将染液倒回到试剂瓶中以备下次使用。
6. 用自备的去离子水清洗印迹膜三次，每次5-10秒。DNA或RNA 条带将呈现蓝色，背景将呈现淡蓝色。注意：洗涤时间不要太长，否则固定在印迹膜上的核酸在低盐条件下(在去离子水中)容易脱落。
7. 用滤纸吸去多余的水份，此时可以用铅笔在印迹膜上作标记(Southern杂交膜可以标记DNA分子量标准的位置，Northern杂交膜可以标记18S和28S RNA的位置，它们分别对应于2 Kb和5 Kb的大小)，也可以将印迹膜放在白色背景下照相(最好使用黄色滤光片)或者扫描以保存实验结果。
8. 如果预杂交液中有SDS，则印迹膜不需要脱色，可以直接用于预杂交。
 如果预杂交液中不含SDS，需将染色后的印迹膜浸入到含1% SDS的1×SSPE或1×SSC溶液中在室温下摇晃直到颜色脱去，一般需要15分钟。

使用效果：

图注：3μg总RNA和0.24-9.5Kb RNAladder(左)转移到Nytran膜上面后用本产品染色的效果图。


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·一管式拭子DNA提取试剂盒
编号：BTN60501
英文名称：One-tube swab DNA extraction kit
规格：100次
本试剂盒专门用于从口腔拭子中快速提取能够用于PCR的基因组DNA。也可以用于提取微量血液，精液，血斑/精斑等法医物证的DNA。

产品特点：
1.快速，整个操作过程只需要十分钟，在一个离心管中完成。
2. DNA样品可直接用于PCR反应。
3.样品可以在4℃长期保存。
4. 不需要使用任何有毒的试剂。
5. 性价比高。

试剂盒组成：

成分	规格
无菌拭子	100只
1.5mL离心管	100只
溶液A	50ml
溶液B	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存。有效期一年。

使用方法：
1. 将医用棉球拭子涂抹面颊的口腔内表面约十次，放入加有0.5mL溶液A的1.5mL塑料离心管中。
2. 剪去口腔拭子柄部，留药棉头于离心管中，盖上离心盖后振荡一分钟。
3. 95℃保温5分钟，用镊子取出离心管中药棉头，并在离心管壁尽量挤出其中的液体。
4. 加入50μl的溶液B，振荡半分钟。
5.室温12000 g离心2分钟。
6. 直接取上清作为模板加入到PCR反应体系中进行扩增，所加量以PCR的总体积的1/５为宜(即50μl的PCR 体系加10μl处理液)。
7. 剩余样品放4℃保存。

使用效果：

图注:用本产品提取涂抹面颊后的拭子的口腔上皮细胞DNA，最后分别取5μl(5号样)和10μl(10 号样)作为模板进行PCR,反应完后取10μl上样电泳。扩增片段为人-actin基因，长度为610bp，M表示100bp DNA Ladder，最大片段为600bp。电泳在SuperBuffer-2中进行，300 V，5分钟。

疑难解答：
Q：能否浓缩第六步上清中的DNA？
A：可以用盐/乙醇法浓缩DNA，用浓缩后的DNA做模板扩增效果更好。


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