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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
907
- 英文名:
Colony PCR Kit 2.0
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京菌落PCR试剂盒2.0现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京菌落PCR试剂盒2.0现货
品牌:百奥莱博
规格:50次
产地:国产|进口
英文名:Colony PCR Kit 2.0
菌落PCR是筛选重组子的有效方法,可以使质粒鉴定过程从两天缩短到几小时。但由于它直接以E.coli菌落为PCR而菌落中常常含有未进入细菌的、来源于连接反应的载体DNA和插入片段,所以十分容易产生假阳性。本产品针对此缺点进行了改良。
产品特点:
1. 无假阳性率,特殊的溶菌方式能有效降低菌落中未转化DNA 对PCR的干扰,使假阳性率低于5%,远低于绝大部分同类产品。
2. 简单快速,用户只需要提供PCR引物和E.coli菌落,不需要细菌培养和质粒提取,整个筛选过程从一天缩短到2-3小时,节约时间和成本。本产品与常用E.coli菌株和载体兼容。既可小规模筛选,也适用于大规模筛查。
3.高灵敏度,既可用于高拷贝质粒,也适合于低拷贝质粒。
4. PCR反应体系中含有惰性电泳染料,反映完成后可直接上样电泳,不需另加上样液。
5.处理过的菌落样品低温长期保存后仍能用于PCR 筛查。
6. 性价比高,价格跟质粒提取试剂盒相当,但节约一天时间。
| 成分 | 规格 |
| 溶菌液A | 0.5ml |
| 溶菌液B | 0.1ml |
| PCR 2.0 | 0.75ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 标记1.5mL塑料离心管,除样品管外,还必须加上阳性和阴性对照管。
在每个管中加入下列成份配制100μL 溶菌液:
| H2O(自备) | 88μl |
| 溶菌液A | 10μl |
| 溶菌液B | 2μl |
| 合计 | 100μl |
2. 用无菌牙签或无菌移液枪头从培养皿上挑取一个菌落或部分菌落,放入溶菌液中,充分震荡直到菌落彻底分散混匀。为方便回查,最好在培养皿上给已取样的菌落做好标记。
3. 重复第2 步直到待筛查菌落全部转移到相应的离心管中。
4.在阳性对照管中,加入已知含有待筛选质粒的菌落;如果没有此菌落,直接进入第6 步,用连接反应液直接作PCR的阳性对照。
5.在阴性对照管中,加入已知的不含有待筛选质粒的任何E.coli菌落(如常见的宿主细菌),其他处理同第2 步。
6. 将所有离心管置于37℃保温30分钟,然后转入100℃水浴处理10分钟。振荡混匀溶液数秒后10,000 g离心1分钟,转移上清到一新的离心管中待用。此溶液为样品DNA溶液。
7. 标记与第1 步数量相同的PCR 管,每个管中分别加入下列成份并充分混匀:
| 样品DNA溶液 | 1-5μl |
| PCR MagicMix | 15μl |
| 引物1(10 pmol/μL) | 1μl(自备) |
| 引物2(10 pmol/μL) | 1μl(自备) |
| Taq物DNA聚合酶(5U/μL) | 0.2-0.4μL(1-2U) |
| 补水到 | 30μl |
注意:引物选择有三种情况,
一是选用商品化的能与多克隆位点两边顺序结合的通用引物(如T7、T3、SP6等);
二是使用用户自己合成的能与插入片段结合的引物(如果插入片段是PCR产物,引物是现成的);
三是组合第一种情况和第二种情况的引物。选择前两种引物在筛查到重组子后还必须用其他方法(如质粒制备后酶切或使用载体引物/插入片段引物PCR)进一步确定插入方向。选择第三种引物则可以同时完成重组子筛选和DNA 插入方向确定两项工作。用户可以根据自己的具体情况选择。
8. 将PCR 管放入PCR 仪器中进行扩增,PCR 温度参数根据引物和模板情况由客户自己预先确定。
9. PCR结束后取10μl电泳直接进行琼脂糖电泳分析。(注:本试剂盒提供的PCR buffer中已经含有电泳染料和甘油,故可以直接上样)
北京菌落PCR试剂盒2.0现货极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
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北京菌落PCR试剂盒2.0现货关键词:Colony PCR Kit 2.0,菌落PCR试剂盒2.0,BTN50901
·HRP标记内参抗体(GAPDH)
编号:BTN130593
英文名称:HRP Conjugated Loading Control Antibody(GAPDH)
规格:20μL
本产品包含三种最常用的HRP标记内参抗体,β-actin-HRP-Mouse mAb(BTN130592)、GAPDH-HRP-Mouse mAb(BTN130593)、β-Tubulin-HRP Mouse mAb(BTN130594),该系列抗体无需二抗孵育,可缩短实验周期,节约实验成本,大幅降低背景信息强度。
抗体类型:小鼠IgG1
应 用:Western blotting
建议浓度:1:1000~10000
交叉反应性:人,大鼠,小鼠
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
·RecA蛋白
编号:BTN130661
英文名称:RecA Protein
规格:200μg
RecA在基因重组中是不可缺少的,它参与DNA 修复和紫外线诱导的突变。RecA促进lexA抑制子、umuD蛋白和lambda抑制子的自裂解。切割LexA能使20多种基因不再受到抑制。体外研究证明,在ATP参与下,RecA促进单链DNA片断与同源双链DNA片断发生链置换。
产品特点:
1.电镜分析DNA结构;
2.D环突变;
3.用RecA蛋白包被的探针来进行文库筛选;
4.切割任意一个预先设计的位点;
5.RecA导全长cDNA克隆的亲合捕获。
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。
北京菌落PCR试剂盒2.0现货关键词:Colony PCR Kit 2.0,菌落PCR试剂盒2.0,BTN50901
·生物素化的β-半乳糖苷酶
编号:BTN131097
英文名称:Biotin-β-Galctosidase
规格:100U
本产品为生物素标记的β-半乳糖苷酶,在免疫组化和免疫印迹应用中与ONPG一起使用。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性单位定义:一个单位等于每分钟在37℃,pH7.3时水解1μmol ONPG。
·PVDF膜(0.45μm,13×20cm)
编号:BTN101123
英文名称:PVDF Membrane (Millipore)
规格:1张
聚偏*乙*(代"烯")(PVDF),是一种高强度、耐腐蚀的物质,可以结合蛋白质,而且可以分离小片段的蛋白质。使用PVDF膜前,需要先用无水甲醇预处理,再在transfer buffer中平衡方可使用,目的是活化PVDF膜上面的正电基团,使它更容易跟带负电的蛋白质结合。
储存条件:常温运输和保存,有效期两年。
·通用洗柱液
编号:BTN60408
英文名称:PVDF Membrane (Millipore)
规格:250mL
聚偏*乙*(代"烯")(PVDF),是一种高强度、耐腐蚀的物质,可以结合蛋白质,而且可以分离小片段的蛋白质。使用PVDF膜前,需要先用无水甲醇预处理,再在transfer buffer中平衡方可使用,目的是活化PVDF膜上面的正电基团,使它更容易跟带负电的蛋白质结合。
储存条件:常温运输和保存,有效期两年。
·中pH缓冲液套装
编号:BTN100829
英文名称:Medium pH Buffer Set
规格:30次
Native-PAGE,非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳是目前电泳法分离非变性蛋白质的主要方法,实验过程杜绝变性剂接触目的蛋白质,常用于同工酶的鉴定和提纯。本产品可快速制备分离胶,不含SDS,并确保配制分离胶的精确pH值。
产品组成:
| 成份 | 规格(30次*) |
| 4×浓缩胶配胶液(pH5.5) | 100ml |
| 4×分离胶配胶液(pH7.5) | 200ml |
| 中pH电泳液(pH7.0) | 10L(干粉) |
| 5×中pH上样液 | 1ml |
| 使用手册 | 1份 |
*注:1次是指的一次mini-Gel电泳
储存条件:常温运输及保存(5×中pH上样液需要-20℃保存),有效期为一年。
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