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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
620
- 英文名:
Plant DNA column extraction kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输和保存
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应柱式植物DNA提取试剂盒怎么卖,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:柱式植物DNA提取试剂盒怎么卖
英文名:Plant DNA column extraction kit
规格:50次
品牌:百奥莱博
编号:BTN60602
本试剂盒是在植物DNA提取试剂盒基础上开发的柱式植物基因组DNA提取产品,可以用于多种植物基因组DNA(含叶绿体和线粒体DNA)的快速提取。
产品特点:
1. 纯度高,不含污染和抑制剂,可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、mμLtiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting,microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验。
2.产率一般在3-30μg/100mg样品。OD260/280一般在1.8以上。DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
3.适用范围广,可以使用于绝大多数植物的各种组织。
4. 不会发生离心柱堵塞现象。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 40ml |
| 溶液B | 20ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
注意:溶液A和溶液B容易产生沉淀,溶液B比较粘稠,用前均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分摇匀。
1. 65℃预热柱式植物DNA提取试剂盒溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取0.75mL加入到10mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取植物组织0.1-0.5 g左右,剪成微小的碎片,加入到有溶液A的10mL塑料离心管中并短暂匀浆。也可以液氮研磨后将粉末加入到管中(建议不要在陶器或玻璃研钵中破碎细胞,因为二氧化硅会非特异地吸附DNA,降低DNA 回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。
3. 将匀浆液(包括植物碎片)全部转移到新的1.5mL塑料离心管(此时匀浆液较为粘稠,可将枪头剪去一截后转移上清,不能吸取的植物碎片可以小心倒入)。
4.在匀浆液中加入0.5倍体积预热的溶液B到离心管中,颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。(由于溶液B比较粘稠,可以将1mL枪头剪去一截再吸取)。
5. 65℃水浴3~5分钟。如果室温放置,DNA产量会降低10-20%。
6. 加入200μl自备*仿,震荡混匀10-30秒,此时溶液将呈乳白色。
7. 12000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明,中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中,避免触及中间层的白膜。
8. 加入1.5倍体积的溶液C,颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中,室温放置至少2分钟。
9. 12000rpm室温离心1分钟,DNA 将吸附在离心吸附柱的膜上,倒弃收集管中的穿透液。
10. 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃穿透液。
11. 重复上步操作一次。
12. 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5mL离心管中。
13. 将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中,加50-100μL DNA 洗脱液2.0,室温放置3~5分钟。
14. 12000rpm室温离心1分钟即得植物DNA溶液。
15. 由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强,可以重复上步操作一次,以洗脱得到更多的DNA。
16. 直接取5-10μL电泳检测DNA,其余放冰箱备用。
使用效果:
图注:用本产品提取0.1g牵牛花叶片基因组DNA,60μL洗脱液洗脱,取15μL检测。泳道3和4为本产品提取效果,泳道1和2为某公司同类产品提取效果。本公司提取的牵牛花叶片基因组DNA 条带清晰,产量高。M为本公司Marker,染料为本公司绿如蓝核酸染料(BTN70909)。
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柱式植物DNA提取试剂盒怎么卖关键词:Plant DNA column extraction kit,BTN60602,柱式植物DNA提取试剂盒
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·羧苄青霉素*溶液
编号:BTN120683
英文名称:Carbenicillin Disodiu*(代"m") Salt
规格:1mL
本产品是浓度为50mg/mL的羧苄青霉素*溶液,澄清透明,pH值在6.0-8.0之间。羧苄青霉素*(羧苄青霉素二*盐;羧苄青霉素*;羧苄青;卡比西林),分子式:C17H16N2O6SNa2,分子量:422.37,CAS号:4800-94-6。溶于水和乙醇。抗菌谱包括革兰氏阴性和阳性细菌、假单胞菌属等,可用于配制细胞培养基。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
·酵母tRNA溶液(精提)
编号:BTN70904B
英文名称:Yeast tRNA Solution
规格:1.5mL
本产品分A和B两个规格,浓度均为5mg/mL。A是酵母tRNA粗提液,用作制备更高纯度(如分子生物级)酵母tRNA的原材料。B是精提液,是经过本公司柱式RNAadsorp纯化的分子生物学级别的酵母tRNA溶液,不含蛋白质和DNA污染,OD260/OD280在1.9左右,可直接用作微量RNA提取和回收的助沉剂,也可以用作原位杂交、Northern杂交的封堵剂,对于探针为RNA的杂交试验尤其适用。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:以tRNA粗提液(BTN70904A)为材料,酚法制备tRNA精提液(BTN70904B)
1.在1倍体积的tRNA粗提液中加入一倍体积的自备Tris饱和酚,振荡混匀后12000~15000g离心3分钟得上清。
2.在上清中再加入一倍体积的自备Tris饱和酚和0.2倍体积自备的*仿,振荡混匀后12000~15000g离心3分钟得上清。
3. 重复此步直到酚相和水相之间没有白膜出现。一般需要2-4次抽提。
4.在上清中加入0.1倍体积的自备3M NaAc(pH5.2)和2倍体积的自备无水乙醇,振荡混匀。
5. 12000~15000g离心15分钟以上,小心移弃上清。
6. 用1mL自备 75%乙醇洗一次(即加入1mL 75%乙醇,振荡混匀后12000~15000g离心5分钟,小心移弃上清)。
7. 短暂离心数秒,小心移弃残留液体,所得沉淀即是精提的酵母tRNA,可以溶解在自备的DEPC水中,UV测定其浓度,然后直接用于各种分子生物学实验。
注意:tRNA比较短,又是单链,所以电泳时结合EB等染料的能力很弱,测定其浓度时最好不要使用电泳比较法,而要使用分光光度法。
注意:此法得率较高,但缺点是不能去除部分多糖污染,因为多糖也能在醇沉淀时沉淀下来。如果最后得到的溶液带颜色,则需要用本公司柱式RNAadsorp精提,详细过程见该产品使用说明书。
二:tRNA精提液(BTN70904B)作为核酸助沉剂
1.在核酸(DNA或/和RNA)溶液中,加入适当浓度的盐离子,盐离子不同其终浓度也不相同,具体如下:
| 盐 | 终浓度 |
| NH4OAc(醋酸铵) | 0.5M |
| NaCl(*化*) | 0.25M |
| NaOAc(醋酸*) | 0.3M |
2. 加入本产品使其终浓度为20μg/mL,混合均匀。
3. 加入两倍体积的乙醇,混合均匀。
4. 冰上放置15分钟。
5. 12000~15000g离心15分钟以上,小心移弃上清。
6. 用1mL 75%乙醇洗一次(即加入1mL 75%乙醇,振荡混匀后12000~15000g离心5分钟,小心移弃上清)。
7. 短暂离心数秒,小心移弃残留液体。
8. 将沉淀溶于适当缓冲液中待用。
注:由于tRNA是多聚核苷酸激酶和末端转移酶的底物,因此如果回收的DNA或RNA要用于此类反应,就不能使用tRNA作为助沉剂。如果回收的RNA要用于RT-PCR,使用tRNA可能会对反应的特异性产生干扰。
三:tRNA精提液(BTN70904B)作为杂交封堵剂
本产品可以作为原位杂交、Northern杂交和RNA斑点杂交的封堵剂,也可以作为Southern杂交和DNA 斑点杂交的封堵剂,但不适于作为菌斑杂交。其在杂交液或预杂交液中的终浓度为100μg/mL。
如果使用RNA探针,最好使用本产品做封堵剂,以保护RNA探针。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP321 快捷型植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片2. 研钵 液氮3. 移液器及配套无菌枪头(200 μl ,1ml),1.5 ml离心管4. 异丙醇,70%乙醇,干净吸水纸5. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机本文版权归天根生化科技(北京)有限公司所有,仅供个人学习使用,请勿转载
在 RIPA 不可溶组分中,如果样品又是研磨困难的组织样品,则优先选择对膜蛋白和小分子量蛋白提取效率更高且不需要匀浆仪的 Invent 柱式法工具进行总蛋白提取[1]。 * 目标蛋白在某个特定细胞器上(内质网,高尔基体,溶酶体,线粒体,内体等)表达,且蛋白表达量较低,若用总蛋白检测时条带较弱,则推荐使用 Invent 柱式法工具富集特定细胞器蛋白后再检测,提高检出效率。 * 研究蛋白定位或研究蛋白转运过程,推荐使用 Invent 柱式法工具进行细胞组分分离,将样品分离为不同组分如分成细胞核,细胞浆,细胞
、 实验流程 1、 总DNA提取 使用DNA提取试剂盒提取植物基因组DNA,通过紫外分光光度计检测或用标准品跑胶检测。一般来说,100ng的基因组DNA作为反应模板是足够的。 2、 EcoR1酶消化(20ul体系/样品) 3、Mse1酶消化(20ul体系/样品) 5、 预扩增(20ul体系/样品) sample 4ul Primer
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