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- 详细信息
- 技术资料
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271
- 英文名:
Tth DNA Polymerase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")Tth DNA聚合酶价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:Tth DNA聚合酶价格
英文名:Tth DNA Polymerase
编号:BTN90501
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:250U
本酶来源于嗜热菌Thermus thermophilus HB8。在有Mg2+等二价阳离子存在的情况下,具有DNA多聚酶活性。它与Taq酶一样被广泛用于PCR反应,但耐热性比Taq酶高,因此对高GC含量模板的PCR 也有较好的效果。本酶基本上没有3´→5´外切酶活性及5´→3´外切酶活性,所以也可用于双脱氧法测序。另外,本酶具有RTase活性,在Mn2+存在的情况下,RTase活性会得到强化。利用该特性,可以用来在同一管中进行逆转录反应和PCR反应,即一步法RT PCR。(但是,在Mn2+存在时,RT-PCR的准确性不高)此外,本酶与Taq DNA多聚酶一样,PCR产物可通过T载体进行TA克隆。
产品特点:
1.RT-PCR反应的特异性增加:在较高的温度下进行逆转录,增加了引物杂交和延伸的特异性。
2.二级结构减少:在较高的温度下进行逆转录,减少了由于RNA二级结构引起的问题。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Tth DNA聚合酶(5U/μL) | 50μl |
| 10×Tth Buffer | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
以λDNA为模板,以10×Tth Buffer(+MgCl2)作为缓冲液进行体积为50μL的PCR扩增反应为例
1.按下列组份配制PCR反应液。
| 成分 | 终浓度 | 用量 |
| Tth DNA聚合酶(5U/μL) | 1.25U | 0.25μl |
| 10×Tth Buffer(+MgCl2) | 1× | 5μl |
| dNTP Mixture(各2.5mM) | 各0.2mM | 4μl |
| 模板DNA | 50pg~1μg | 详见下表 |
| 引物1(10μM) | 0.1~1μM | 最多到1μL |
| 引物2(10μM) | 0.1~1μM | 最多到1μL |
| 灭菌蒸馏水 | 加到50μL |
推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量:
| 哺乳动物基因组DNA | 0.5~1μg |
| 酵母基因组DNA | 5~500ng |
| 细菌基因组DNA | 0.5~50ng |
| 质粒DNA | 5~500pg |
| PCR回收片段 | 1~100pg |
2.PCR反应条件
以λDNA为模板,扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下:
注:PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
注意事项:
1.循环测序:该酶为耐热性酶,可通过与PCR 同样的温度条件进行测序反应。由于其高温稳定性好,对于复杂高级结构的模板效果较好。
2.引物:用于耐热性酶测序的引物需比用于非耐酶测序的引物设定更长的时间。采用较短的引物时,可能会出现不能获得条带变淡的情况。
欲咨询购买Tth DNA聚合酶价格,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH7.5)(不含RNase)
编号:BTN60903
英文名称:RNase-Free Tris-HCl Solution
规格:250mL
·硫氧还蛋白
编号:BTN130870
英文名称:Thioredoxin
规格:5mg
硫氧还蛋白是一类广泛存在的热稳定的作为*载体的蛋白质(约12kDa)。在许多还原反应中作为*供体,特别是核苷二磷酸变成相应的脱氧产物和光依赖性的还原反应中。也以结构域的形式出现于二硫键异构酶中,在蛋白折叠过程中,硫氧还蛋白可以催化二硫键的正确形成。
·土霉素盐*(代"酸")盐溶液
编号:BTN120696
英文名称:Oxytetracycline HCl Solution
规格:10mL
本产品为溶于水:乙醇(2:1)混合液浓度为100mg/mL的土霉素盐*(代"酸")盐溶液,参考浓度为50mg/mL。土霉素烟酸盐(盐*(代"酸")土霉素;氧四环素盐*(代"酸")盐;地霉素;Oxytetracycline hydrochloride),分子式:C22H24N2O9·HCl,分子量是:496.89,CAS号:2058-46-0,土霉素盐*(代"酸")盐能阻止*基酰-tRNA与30S亚单位结合,从而抑制蛋白合成。抗菌谱:革兰氏阴性和阳性细菌。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
·*霉素干粉
编号:BTN60102
英文名称:Chloramphenicol Powder
规格:1g
*霉素是白色至微黄色针状结晶或片状结晶。分子式为C11H12Cl2N2O5,分子量为323.13。真空时升华。无臭,味苦。易溶于醇类,微溶于乙*(代"醚"),不溶于*、石油醚和植物油。水溶液呈中性。熔点150.5~151.5℃。在干燥时稳定,在弱酸性和中性溶液中较安定,煮沸也不见分解,遇碱类易失效。
结构式:
储存条件:常温运输、4℃保存、有效期一年。
Tth DNA聚合酶价格关键词:BTN90501,Tth DNA聚合酶,Tth DNA Polymerase
·人超氧化物歧化酶
编号:BTN130869
英文名称:Human Superoxide Dismutase
规格:10kU
超氧化物歧化酶(SOD),别名肝蛋白、奥谷蛋白,SOD是一种源于生命体的活性物质,能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。其催化超氧化物自由基O-2和*离子反应形成过氧化*和分子氧的酶。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:在25℃,pH7.8,3.0mL反应体系中,在黄嘌呤氧化酶存在的条件下抑制50%细胞色素C还原所需的酶量定义为一个酶活单位。
·石蜡包埋组织RNA提取试剂盒
编号:BTN81102
英文名称:FFPE RNA Extraction Kit
规格:30次
石蜡包埋组织本是珍贵的分子生物学研究材料,但是由于它们的保存时间一般都比较长,很不容易从中提取到可以进行PCR的RNA,存在的主要问题是RNA的降解和脱蜡过程中样品的丢失。本产品是专门用于从甲醛和非甲醛固定的石蜡包埋组织中快提RNA的试剂
试剂盒特点:
1.一管式操作,避免了可能的交叉污染和样品RNA的丢失。
2.含一步离心式脱蜡试剂,不需要使用有毒的二甲*,健康环保。
3. 能有效去除基因组DNA的污染,得到的RNA可直接用于RT-PCR反应。
4. 即开即用,客户自己不需要准备额外的试剂。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 30mL |
| 溶液B | 3mL |
| 溶液C | 5mL |
| 溶液D | 15mL |
| 微量核酸沉淀剂 | 30mL |
| RNase-free水 | 10mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,4℃保存(溶液C需要-20℃放置),有效期一年。
使用方法:
1. 将5片厚度为6-8μM的石蜡包埋组织切片转移到1.5mL塑料离心管(最好使用螺旋盖离心管)中并加入1mL溶液A,在振荡器上以最大速度振荡10秒。
2. 加入75μL溶液B,在振荡器上以最大速度振荡10秒。
3. 7000×g室温离心2分钟,溶液将形成两个相,其中组织切片位于下相。
4.小心吸弃上层液体。
5. 将离心管放入真空离心机中抽干下层的液体,一般需要一小时。
6. 加入150μL溶液C,55℃保温过夜。
7. 短暂离心,95℃保温10分钟。
8. 加入0.5mL溶液D,充分震荡半分钟。
9. 加入0.1mL自备*仿,振荡器上充分振荡混均30秒。
10. 13000-5000×g室温离心3~5分钟。
11. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中。下层有机相(蓝色)和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下100μL上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的DNA。
12.在上清液中加入两倍体积的微量核酸沉淀剂,振荡器上振荡30秒混匀。
13. 13000-15000g室温离心5分钟,离心底的侧面将形成RNA沉淀。如果需要提高RNA回收率,可以将离心时间延长到20或30分钟。
14.小心吸弃上清液,注意不要吸弃RNA沉淀。
15.在含RNA沉淀的离心管中加入1mL自备的75%乙醇,振荡混匀30秒。
16. 13000-15000g室温离心1分钟。
17.小心吸弃上清液,注意不要吸弃RNA沉淀。
18. 短暂快速离心,用移液枪小心吸弃残留乙醇(约50μL)。注意不要吸弃沉淀。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
19.室温放1-2分钟后立即加入50-100μL RNA溶解液使RNA沉淀溶解。千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥,否则RNA将变得十分难溶。样品立即使用或存放于-80℃待用。
20. RNA完整性的电泳检测:
21. RNA产量产率测定:将5-10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
22. RNA纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
Tth DNA聚合酶价格关键词:BTN90501,Tth DNA聚合酶,Tth DNA Polymerase
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