Tricine-SDS PAGE阴极电泳液(干粉) 蛋白质研

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")Tricine-SDS PAGE阴极电泳液(干粉) 蛋白质研究，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：Tricine-SDS PAGE阴极电泳液(干粉) 蛋白质研究
编号：BTN81226
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：Tricine SDS-PAGE Anode Buffer
本产品为干粉型Tricine-SDS-PAGE阴极电泳液，加水配制后即可直接使用，非常方便。

储存条件：常温运输和保存，有效期两年。

想要了解更多关于Tricine-SDS PAGE阴极电泳液(干粉) 蛋白质研究的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：

·TBE电泳液，10×
编号：BTN90313
英文名称：10×TBE Buffer
规格：250mL
TBE Buffer全名为Tris-Borate-EDTA buffer。它主要用于DNA的琼脂糖电泳和DNA和RNA的PAGE电泳。跟TAE相比，其特点是含硼*(代"酸")，可能会影响连接等后续酶反应。硅胶模回收时，回收率比TAE低。缓冲能力强于TAE，可反复使用几次。PAGE电泳最好使用1×，琼脂糖电泳可以使用0.5×。线性双链DNA的泳动速度慢于TAE。最好不要使用含甘油的上样品液，因为甘油可使硼*(代"酸")多次解离，改变pH。

储存条件：常温运输及保存、有效期一年。长时间放置可能会出现沉淀。

·包涵体中量纯化试剂盒
编号：BTN90509
英文名称：Inclusion Body Midiprep Kit
规格：5次
本产品是我们公司包涵体微量纯化试剂盒(BTN90508)的中量提取升级产品，用于中量，快速的提取高质量的包涵体。

产品特点：
1．中量提取，一次可以处理30-50mL的菌液，一次中量提取相当于10-20次微量提取。
2．操作简单快速，整个过程只要四十分钟左右。
3．大规模提取，可以在15-50mL离心管中完成。
4．能有效去除包涵体中的细胞壁和细胞膜等非重组蛋白成份，使重组蛋白所占比重达到60%以上。
5．细胞裂解通过非离子洗涤剂的化学裂解法，裂解更加温和。
6．得到的包涵体可以用于重折叠。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	25ml
溶液B	250ml
包涵体溶解液	25mL
溶菌酶	3g
Benzonase(1U/μL)	125μl
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，但溶菌酶和Benzonase需要低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

准备工作：
将3g溶菌酶全部加入到25mL溶液A中溶解，然后根据每次的需要量(一次大量提取需要5mL)分成1mL/只放-20℃待用。每次只取用一管含溶菌酶的溶液A。
包涵体中的重组蛋白一般比溶解状态中的蛋白质更能够抵抗微量内源性蛋白水解酶的降解，如果实验发现得到的重组蛋白确有降解，则需要在溶液A中新鲜加入自备的蛋白酶抑制剂混合物(BTN80808)。

一、细胞裂解和包涵体的纯化：
1．在蛋白诱导期结束时，转移30mL菌液到一个干净的塑料离心管中。
2．5000-7,000rpm室温离心3分钟，小心弃上清。
3．加入5mL含溶菌酶的溶液A重悬细胞。
4．室温放置10-20分钟裂解细菌，其间可以用手轻弹离心管混匀。
5．-20℃冷冻至凝固。凝固有利于裂解细菌，所以一定要凝固到细菌溶液变成固体。
6．室温水浴解冻。如果裂解充分，细菌释放出的DNA将使裂解物十分粘稠。如果不粘稠，说明裂解不充分，需要重复3-6步，否则完整细菌将和包涵体一起沉淀，影响包涵体的纯度。如有条件最好在显微镜下检查细菌是否充分裂解。
7．加入25μL的Benzonase(1U/μL)，脱色摇床上摇晃直到裂解液不再粘稠，一般需要30分钟左右(检查方式是将裂解物倾倒转移到另一离心管中，在转移过程中看其是否粘稠)。
8．5000-7,000rpm 4℃离心5分钟，小心收集上清。上清含有以可溶形式存在的重组蛋白，可以保留作为SDS-PAGE对照样品。
9．将沉淀(主要由包涵体构成)悬浮在25mL的溶液B中，轻柔混匀后室温放置5分钟。
10．5000-7,000rpm 4℃离心10分钟，小心收集上清,可以作为包涵体第一次洗涤的对照样品。
11．将沉淀(主要由包涵体构成)悬浮在25mL的溶液B中，轻柔混匀后室温放置5分钟。
12．5000-7,000rpm 4℃离心10分钟，小心收集上清作为包涵体第二次洗涤的对照样品。一般洗涤两次就能够得到足够纯净的包涵体，如果需要更多洗涤，需要用户单独购买包涵体洗涤液(溶液B)。
13．得到的沉淀即为包涵体，可以长期放置在冰箱待用或直接进入包涵体的溶解步骤。

二、包涵体的溶解：
1．在包涵体沉淀中加入5mL包涵体溶解液，用枪头充分吹打后漩涡震荡。如果低温放置，包涵体溶解液会产生沉淀，必须45-65℃溶化并混匀后才能使用。
2．室温放置1小时使蛋白质充分溶解。
3．20000g 4℃离心20分钟，小心收集上清，保留不溶性沉淀。注意：检查离心管能否承受此离心力。SDS-PAGE检查是否大部分重组蛋白都在上清中。如果没有，说明包涵体没有完全溶解，需要用适当增加包涵体溶解液的用量。
4．得到的蛋白质溶液可以用于复性等试验。由于不同的蛋白质有不同的最佳复性条件，所以本公司不能提供统一的复性溶液，需要用户自己摸索。
 注意：包涵体纯化过程中引入了溶菌酶、DNase和RNase等外源蛋白质，在SDS-PAGE分析时可能有额外条带出现。


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·Southern DNA Marker DL2000(DIG标记)
编号：BTN120654D
英文名称：Southern DNA Marker DL2000(Labeled by DIG)
规格：20次

·GAL指示剂培养基
编号：BTN130899
英文名称：GAL Indicator Medium
规格：250mL
GAL指示剂培养基是一种用来记录半乳糖发酵能力的培养基，可以实时监测发酵过程产生半乳糖的能力。本产品为优化的MAL指示剂培养基，包含有菌株所需要的全部营养成分和指示剂，即开即用，方便使用。

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

·蛋白marker(3.3～20.1kD)
编号：BTN70102A
英文名称：Protein Marker(3.3-20.1kD)
规格：15次
本产品为蛋白质电泳标准系列，为已知的标准蛋白质混合物，在SDS-PAGE时可以作为分子量标准，估计其他蛋白质的分子量大小。

产品特点：
1．简单，不需要自己单独购买各种蛋白质配置。
2．本产品有粉末型和溶液型两种，十分稳定。
3．本系列三种产品涵盖从 3.3 KD-200 KD的分子量范围。

所含成分及其分子量		A型	B型	C型
肌球蛋白重链	200.0KD			有
*调素结合蛋白	130.0KD			有
兔磷酸化酶B	97.4KD		有	有
牛血清白蛋白	66.2KD		有	有
兔肌动蛋白	43.0KD		有	有
牛碳酸酐酶	31.0KD		有
人生长激素	22.0KD
大豆胰蛋白酶抑制剂A	20.1 KD	有	有
鸡蛋清溶菌酶	14.4KD	有	有
人工合成肽1	7,823D	有
人工合成肽2	5,856D	有
人工合成肽3	3,313D	有

产品组成：

成分	A型	B型	C型
蛋白分子量标准A型(低分子量)	15T	-	-
蛋白分子量标准B型(中分子量)	-	20T	-
蛋白分子量标准C型(高分子量)	-	-	10T
1×SDS-PAGE上样液	0.5ml	0.5ml	0.5ml
说明书	1份	1份	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

使用方法：

一、干粉型的使用：
1．开封后将1×SDS-PAGE上样液加入到样品管中溶解蛋白质粉末，各分子量标准所需的1×SDS-PAGE上样液的体积如下:
低分子量标准(BTN70102A)需要150μL。
中分子量标准(BTN70102B)需要200μL。
高分子量标准(BTN70102C)需要100μL。
2．沸水浴中加热 5分钟。
3．短暂离心后将溶液按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中，置-20℃长期保存。
4．使用时每次取一管，室温放置直到液体融化后，沸水浴中加热3～5分钟，即可上样进行SDS-PAGE电泳。BTN70102A型推荐使用Tricine-甘油SDS-PAGE胶、BTN70102B 推荐使用12%的分离胶、BTN70102C 推荐使用8%的分离胶。
5．电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色，染色后出现的带型见上表。

二、溶液型的使用：
1．将溶液按每管一次电泳的用量分装到塑料离心管中冻存，每次只用一管，这样避免反复冻融。
2．使用时取一管室温放置直到液体融化。
3．沸水浴中加热3～5分钟后趁热上样并进行SDS-PAGE电泳。BTN70102A型推荐使用Tricine-甘油SDS-PAGE胶、BTN70102B 推荐使用12%的分离胶、BTN70102C 推荐使用8%的分离胶。
4．电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色，染色后出现的带型见上表。

疑难解答：
1.分子量不同，SDS-PAGE的分离胶和浓缩胶浓度不同。需要自己根据具体情况调整。
2.电泳之后可将胶进行染色观察，如果使用传统配方进行染色时效果不好或考虑其毒性，请选择本公司的一步式蓝色PAGE染液(BTN61204)，该产品具有染色快，无毒，灵敏性高等物点，是常规蛋白染色液的替代品。


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