BTN131074型SDS-PAGE样品预处理试剂盒厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN131074型SDS-PAGE样品预处理试剂盒厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：BTN131074型SDS-PAGE样品预处理试剂盒厂家
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：BTN131074
规格：50次
英文名：Sample Preparation Kit for SDS-PAGE
本产品为SDS-PAGE电泳样品制备专用试剂盒。

产品特点：
1．减少由于不兼容污染物造成的电泳假象，提供重复性好的SDS-PAGE 结果。
2．快速且容易使用的离心管形式(微量离心)。
3．在20分钟以内将稀释的蛋白溶液富集成六倍浓缩液。
4．无需透析即可去除染料、还原剂、去污剂、糖、甘油、胍、尿素及硫*(代"酸")铵。
5．对于大多数蛋白可以得到75-85%的蛋白回收率。
6．洗脱缓冲液与BCA蛋白定量分析试剂盒兼容，因此可以对处理过的样品进行定量。
7．最少可以处理2微升样品。

试剂盒组成：

 

成份	规格
PAGEprep树脂(浆状物，溶剂为DMSO)	1mL
PAGEprep洗脱缓冲液	5mL
DMSO	27mL
离心收集管-硝酸纤维素薄膜滤器	50个
收集管	72个
泳道指示剂，非还原性上样缓冲液(5X)	5mL
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

想要了解更多关于BTN131074型SDS-PAGE样品预处理试剂盒厂家的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：
ARB13949 猪胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)elisa检测操作说明书 Porcine cholecystokinin,cck ELISA KIT
PY04-087  FBP溶液  1ml/支×10支  每支添加于100ml改良Skirrow琼脂培养基基础中，用于弯曲杆菌的选择性分离培养
酚酞-百里酚蓝指示剂   100ml
D-鸟*酸盐*(代"酸")盐 Caffeic acid 16682-12-5
ARB10302 人巨噬细胞刺激蛋白(MSP)elisa检测操作说明书 Human macrophage stimulating protein,msp ELISA KIT
ARB11396 人神经肽B(NKB)代做ELISA实验 Human neurokinins b,nkb ELISA KIT
BL1285 20×PBS, PH7.2-7.4,工作浓度0.01M
PY01-185  荧光素  ind  25克  
133-32-4 Indole-3-butyricacid(IBA)吲哚-3-丁酸(水溶)
H0301 新生牛血浆(去红细胞、无菌过滤) 100ml/500ml/500ml*20
PY02-020  *化十六烷基三甲铵琼脂  250克  
庆大霉素-两性霉素B混合溶液  100×双抗 100ml
BL0877 兔抗人IgA免疫血清
J0306                  兔抗山羊IgG(H+L)抗血清                        
F020211 兔抗狗IgG抗体 Rabbit Anti-Dog IgG
SJ0189 Dextran T-10  葡聚糖 T-10
F020234 山羊抗人γ链抗体 Goat Anti-Human IgG(γ chain)
PL0601 酵母高纯度质粒小量快速提取试剂盒
BTN131074型SDS-PAGE样品预处理试剂盒厂家关键词：Sample Preparation Kit for SDS-PAGE,BTN131074,SDS-PAGE样品预处理试剂盒


·动物线粒体纯化试剂盒A(粗提)
编号：BTN111207A
英文名称：Animal Mitochondria Purification Kit(A)
规格：5次
线粒体是非常重要的细胞器，它不但跟很多人类疾病相关，而且还是母系遗传研究的重要材料。对线粒体进行遗传研究和生化研究都需要纯化线粒体。本产品可用于纯化动物细胞线粒体的试剂盒。

产品特点：
1．即开即用，用户不需要自己配制各种溶液，优化各种条件。
2．有粗提和精提两个选择，但是精提需要超速离心机。粗提所得线粒体可以直接用于蛋白分析(SDS-PAGE、Western Blot、ELISA等)、蛋白组分析和线粒体DNA纯化。精提线粒体可以用于偶联分析和体外线粒体蛋白合成等实验。
3．本产品一次可以处理约2×108个培养细胞，30mg培养细胞(相当于15瓶150mm培养细胞)可以纯化到到0.5-1.5mg线粒体。
4．本产品适用于各种动物悬浮培养细胞和贴壁培养细胞，不能用于动物实体组织。
5．提供线粒体染液，可以在操作中随时监测纯化过程中线粒体的完整性。

试剂盒组成：

粗提型(BTN111207A)

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	250ml
蔗糖	80g
詹纳斯绿B染色液(0.2%)	1ml

精提型(BTN111207B)

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	250ml×2
蔗糖	100g
詹纳斯绿B染色液(0.2%)	1ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，保存期限一年。

使用方法：
注意：线粒体膜对温度高度敏感，所以整个操作必须在冰上或冷室进行，所要用到的溶液和离心管都必须预先冷却，否则线粒体容易破裂。

一、准备工作(此步骤同柱式动物线粒体DNA提取试剂盒中线粒体提取步骤)。未用完的下列溶液需要-20℃保存，否则容易长菌。下次使用前务必让沉淀溶解并摇晃均匀。
1．将溶液A和溶液B放冰上预冷待用。
2．配制1.7M高比重溶液(仅限BTN111207B精提型试剂盒，BTN111207A粗提型试剂盒不需要配制此溶液)：36克蔗糖用溶液B溶解并定溶到60mL，冰上预冷待用。
3．配制1.0M低比重溶液，BTN111207A粗提型试剂盒需要100mL，配制方法是将34克蔗糖用溶液B溶解并定溶到100mL，冰上预冷待用。111207B粗提型试剂盒需要150mL，配制方法是将51克蔗糖用溶液B溶解并定溶到150mL，冰上预冷待用。
4．配制线粒体重悬液，BTN111207A粗提型试剂盒需要200mL，配制方法是将150mL溶液B和50mL 1.0M低比重溶液混合；BTN111207B精提型试剂盒需要300mL，配制方法是将225mL溶液B和75mL 1.0M低比重溶液混合，即得300mL 线粒体重悬液，冰上预冷待用。

二、线粒体粗提(此步骤同柱式动物线粒体DNA提取试剂盒中线粒体提取步骤)
5．如果提取材料是单层细胞，先用60mL自备的PBS缓冲液洗涤2×108个培养的单层细胞，共洗涤2次。然后用塑料刮匙刮下细胞，重悬在60mL PBS缓冲液中。如果是悬浮细胞，则1000g 4℃离心10分钟收集2×108个细胞，再用60mL PBS缓冲液洗涤2次，最后将细胞重悬在60mL PBS缓冲液中。
6．用平甩转子(swinging-bucket rotor)离心机1000 g 4℃离心10分钟，吸弃上清，保留细胞沉淀。
7．加入5倍体积(以细胞沉淀的体积为基数)的预冷的溶液A，轻柔重悬细胞。
8．冰上放置4-5分钟。注意：冰浴时间不要超过5分钟。
9．如果是成纤维细胞，由于其难以裂解，可将细胞重悬液在-80℃放置20-30分钟后再化冻，然后进入下步操作。如果不是成纤维细胞，则直接进入下步操作。
10．将细胞重悬液体转移到预冷的Dounce玻璃匀浆器中(工作体积为10-15mL，间隙为0.12 mm，最好是玻璃材质，否则线粒体产率会降低)匀浆适当次数。细胞株不同，其最适匀浆次数不同，一般需要40次-60次左右。匀浆是线粒体纯化最关键的步骤，故匀浆前最好先通过预实验确定最适匀浆次数，方法是每匀浆5-10次后，取2-3μl匀浆液到载玻片上，然后在相差显微镜下观察，完整细胞数量降低到20%以下为佳。
11．加入1/3体积的、预冷的1.0 M低比重溶液，轻柔混匀。
12．用平甩转子离心机4℃ 1000 g离心10分钟。沉淀含残留完整细胞、细胞碎片和细胞核，上清液含线粒体。
13．转移上清液到离心管中，冰上放置。在显微镜下检测上清液中线粒体的完整性。具体做法是先滴50μL左右上清液到载玻片上，再滴入50μl詹纳斯染液绿B染色液20分钟，油镜下观察，蓝绿色颗粒状物即为线粒体。
14．用固定角度转子(fixed-angle rotor)离心机4℃ 15000g离心15分钟，弃上清，所得棕黑色沉淀即为粗提线粒体沉淀。
15．用10mL线粒体重悬液重悬线粒体，4℃ 15000g离心15分钟，弃上清。
16．重复上步一次。
17．最后用适量的线粒体重悬液重悬线粒体，可用于各种后续实验(本试剂盒不提供相关试剂)，如果用于下面的精提操作，则用10mL线粒体重悬液重悬。

三、线粒体精提(需要超速离心机)
18．在跟超速离心机匹配的50mL的离心管中，加入10mL预冷的高比重溶液，再在上面加上10mL预冷的低比重溶液，最后再加上10mL线粒体粗提液。
19．70000g 4℃离心40分钟，线粒体将位于高比重溶液和低比重溶液之间区域。
20．小心用广口吸管吸出线粒体到新的离心管中，加入等体积的线粒体重悬液。
21．用平甩转子离心机1000 g 4℃离心10分钟，吸弃上清，保留线粒体沉淀。
22．用10mL线粒体重悬液重悬线粒体，在平甩转子离心机上4℃ 1000g离心10分钟，吸弃上清，保留线粒体沉淀。
23．再重复上步一次。
24．最后用适量线粒体重悬液重悬线粒体，得到线粒体精提液。可以直接用于Lowry法蛋白浓度测定，也可以用于其他后续实验。


BTN131074型SDS-PAGE样品预处理试剂盒厂家关键词：Sample Preparation Kit for SDS-PAGE,BTN131074,SDS-PAGE样品预处理试剂盒


·动态浊度法内毒素定量试剂盒
编号：BTN131204
英文名称：Eendotoxin Quantification Kit(Dynamic turbidity method)
规格：1.7×10支
鲎试剂为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品，鲎试剂中含有Ｃ因子、Ｂ因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下(温度，pH值及无干扰物质)，细菌内毒素激活C 因子，引起一系列酶促反应，使鲎试剂产生凝集反应形成凝胶。随着凝胶的形成，反应液的吸光度(OD值，浊度)增加，OD值增加的速度与内毒素浓度成正相关。换言之，OD值上升某一预设限值(启动OD)所需要的时间(定义为启动时间)与内毒素浓度成负相关，启动时间的对数与内毒素浓度的对数成线性关系，据此，可以定量供试品的内毒素浓度。本试剂盒的检测限为0.01 EU/mL～10 EU/mL。

储存条件：低温运输，低温运输，4℃避光保存，有效期两年。

自备试剂：细菌内毒素标准品(BTN140405)、无内毒素水(BTN130502)(可从本公司另购)

使用方法：

一、设备准备
除热原试管、除热原吸头、除热原加样槽、除热原96孔微板。
旋涡混合器、移液器、多道移液器、试管架。
带温育系统的动态光度测定仪器及配套软件，例如，微板鲎试仪ELx808及软件TALgent或Gen5。
二、实验操作
1.动态光度测定仪器的设定，以微板鲎试仪ELx808为例：
a)预热仪器，设置温育温度为37ºC。
b)设置模板及程序:设定读板波长为630nm，设定动力学参数：读板120分钟，每30秒读一次。
2.内毒素标准溶液配制：
a)标准曲线所采用的内毒素浓度可以为2至10倍稀释的系列(如0.5，0.25，0.125，0.0625 EU/mL或10，1，0.1，0.01 EU/mL)。
b)取自备的细菌内毒素标准品1支，用砂轮沿安瓿颈部划痕，开启，加入适量(建议在0.5mL- 1.2mL之间)自备的无内毒素水，置旋涡混合器上剧烈振摇5分钟。
c)将上述内毒素溶液进一步用自备的无内毒素水稀释成所需浓度，每稀释一步均应在旋涡混合器上剧烈振摇1分钟。(稀释的内毒素溶液静置时间超过10分钟，用前在旋涡混合器上剧烈振摇1分钟，放置4小时以上的内毒素溶液应丢弃。)
3. 阴性对照为无内毒素水。
4. 鲎试剂的溶解：按标示量加无内毒素水于鲎试剂中，轻轻振摇使鲎试剂完全溶解。注意不要用旋涡混合器剧烈振摇。溶解的鲎试剂应在10分钟内使用。若采用多道移液器，将溶解的鲎试剂转移到除热原加样槽，并轻轻摇匀。
5.在微板鲎试仪ELx808上操作：
a)取除热原微板，在各孔中分别加入100μl无内毒素水、内毒素标准溶液，或供试品。
b)将微板放置于鲎试仪中，37ºC温育10分钟。
c)温育结束后，用移液器或多道移液器加入100μl鲎试剂(避免产生气泡)，中速振摇10秒混匀，在630nm波长处，每30-60秒读一次，读板120分钟。
三、数据处理
设定启动OD(可以设为0.02，一般可以在0.02到0.04之间)，软件自动给出其启动时间(T)。
建立标准曲线：lgT = b lgC + a，其中T为启动时间，C为内毒素的浓度，b为直线斜率，a为Y轴截距。
当实验数据同时满足如下三个条件时实验才有效：
a)标准曲线的浓度点≥4，标准曲线的相关系数r≤-0.980。
b)标准曲线最低点的T值小于阴性对照的T值。
c)供试品平行管的平均值在标准曲线的区间内。

注意事项：
1. 该试剂盒用于体外细菌内毒素的定量检测，严禁试剂以任何途径进入机体。
2. 接触试剂及供试品的所有器皿必须是除热原的。试验过程应防止微生物的污染。该说明书中的除热原指内毒素浓度小于0.005 EU/ml。
3. 供试品的pH值应在6.0–8.0之间，若超出此范围，需用除热原的缓冲液、0.1M*氧化*或0.1M盐*(代"酸")调节。
4. 当供试品中可能存在鲎试验的干扰物质时，须进行干扰试验，参见供试品的干扰试验。

供试品的干扰试验：
1. 当对新药或无内毒素检查项的品种建立内毒素检查法时，必须进行干扰试验；
2. 当鲎试剂、供试品的来源、配方、生产工艺改变，或试验环境中发生了任何有可能影响试验结果的变化时，必须重新进行干扰试验；
3. 当供试品中可能存在鲎试验的干扰物质时，须进行干扰试验。

步骤如下：
1. 选择标准曲线中点或一个靠近中点的内毒素浓度(设为λm)，作为供试品干扰试验中添加的内毒素浓度，如采用标准曲线为10，1，0.1，0.01 EU/mL系列时,可以用供试品配制0.1 EU/mL内毒素浓度作为实验的供试品阳性对照。
2. 用供试品溶液配制浓度为λm的内毒素溶液(即含λm内毒素的供试品阳性对照)，测量出该溶液的内毒素浓度，称为Cs；
3. 测量出未添加外源内毒素的供试品溶液内毒素浓度，称为Ct；
4. 计算该试验条件下的回收率R＝(Cs–Ct)/λm×100％；
5. 当R在50％～200％之间，则认为在此试验条件下供试品溶液不存在明显干扰作用；
6. 当R在50％～200％之外，需对供试品进行系列稀释或进行其它处理消除干扰，每一稀释溶液都重复步骤2-4，直到内毒素的回收率R在50％～200％之间。选择回收率R最接近100％的稀释倍数进行内毒素检测。

北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒，更多试剂产品需求，欢迎来电咨询选购BTN131074型SDS-PAGE样品预处理试剂盒厂家。