北京6nt随机引物(抗水解)(0.5mM)哪里卖

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京6nt随机引物(抗水解)(0.5mM)哪里卖的品牌：百奥莱博，是优质的核酸扩增(PCR)产品，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多6nt随机引物(抗水解)(0.5mM)等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京6nt随机引物(抗水解)(0.5mM)哪里卖
产地：国产|进口
编号：BTN120679
规格：100μL
品牌：百奥莱博
本产品为具有外切酶抗性的随机引物，是单链随机寡核苷酸混合物，可高效、随机引发不同DNA的合成反应。本产品含有2个3´-末端硫代磷酸酯(PTO)修饰，对校正DNA聚合酶的3´至5´外切核酸酶有抗性。该引物还含有5´和3´-羟基末端。本产品浓度为500μm，可用于基因组DNA和质粒的链置换扩增以及随机引发的DNA标记。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

我公司的北京6nt随机引物(抗水解)(0.5mM)哪里卖，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·柱式植物油DNA提取试剂盒
编号：BTN101116
英文名称：Vegetable oil DNA column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是专门用于从各种植物油样品中提取微量植物油DNA的产品。

产品特点：
1. 操作简单，整个过程只需要20分钟左右，不需要额外地在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高，通过PCR 检测到的单拷贝的基因。
3. 安全无毒，不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
4.与PCR和荧光PCR 兼容。
5. 价廉物美，性价比远低于国外同类产品。
6.适用于各种材料，包括花生油、色拉油、酱油、菜籽油等样品。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	30ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液	5ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1.在1.5mL离心管中加入0.2mL液体植物油样品。
2. 加入0.6mL溶液A，室温振荡3～5分钟。注意：在4℃保存的溶液A会形成沉淀，用前需要加热到65℃使之彻底溶化。
3. 将溶液全部转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟。注意：不能只取水相。
4. 12000～15000g室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
5. 加入0.8mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
6. 12000～15000g室温离心半分钟。
7.在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-50μl DNA 洗脱液，然后将离心吸附柱套入一新的1.5mL离心管中，室温放置2分钟。
8. 12000～15000g室温离心1分钟，离心管中收集的样品即为植物油DNA。
9. DNA样品可以直接用于PCR，也可放-20℃长期保存。


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·端粒酶重复片段扩增试剂盒(TRAP试剂盒)
编号：BTN111009
英文名称：Telomeric Repeat Amplification Protocol Kit
规格：50次
本品是我司在经典TRAP技术基础上改良而得，专门用于快速测定人类细胞端粒酶的相对活性(需要跟对照样品比较)。端粒酶存在于85-90%的肿瘤组织中，因此通过检测端粒酶活性就能早期诊断大多数肿瘤。目前最常用的检测端粒酶活性的方法就是TRAP，它利用端粒酶能在外加的TS模板DNA的末端添加不同数量的TTAGGG序列这一特点，通过PCR检测延伸产物而高效检测端粒酶活性。原理如下：


产品特点：
1．一站式，提供从细胞裂解到PCR的所有试剂，但不含PAGE和银染试剂。
2．一管式操作，端粒酶延伸和PCR在同一体系中完成，方便快捷。
3．提供改良的、长为150bp的内参和含8个端粒序列的合成端粒，可有效排除PCR假阴性。内参长度远大于TRAP产物，不会干扰结果分析。
4．改良的TS模板和PCR引物，极大降低了引物二聚体的形成。
5．既可用于培养细胞，也可用于实体组织。
6．灵敏度高，最低可以检测到10个肿瘤细胞中的端粒酶活性。

试剂盒组成：

成分	规格
TRAP细胞裂解液	10mL
PCR Mix 3.0	1.5mL
合成端粒(PC)	50μL
TS-引物混合物(含内参)	300μL
超纯水	1mL
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、端粒酶的提取
注意：端粒酶是蛋白质和RNA组成的复合体，RNA极容易被降解，因此，提取端粒酶应该跟提取RNA一样，尽量在低温条件下快速操作，并且必须使用RNase-free的耗材，桌面最好用固相RNase清除剂清洁(BTN3090)清洁。
1．对冷冻的实体组织：将50-100mg冷冻组织在液氮中用预冷的研磨器研磨成粉末，再转移到预冷的玻璃匀浆器中，加入200μl预冷的TRAP细胞裂解液，温和手动匀浆数次后冰浴30分钟，每间隔数分钟涡旋振荡一次，共5-6次，然后直接进入第3步操作。为保证裂解效果，可在显微镜下观察。如果组织样品不足50-100mg，可以按比例降低TRAP细胞裂解液的用量。
2．对新鲜的培养细胞和组织：用自备的预冷PBS洗涤105-106个经过胰酶处理的细胞或50-100mg新鲜组织，3000g 4℃离心5分钟，弃上清；加入200μL预冷的TRAP细胞裂解液悬浮细胞或组织。对细胞：涡旋振荡10秒后置冰浴30分钟，每间隔数分钟涡旋振荡一次，共5-6次。对组织：在冰上用玻璃匀浆器轻柔匀浆后冰浴30分钟，每间隔数分钟涡旋振荡一次，共5-6次。如果细胞不足1×106或50-100mg，可按比例降低TRAP裂解液的用量。
3．12000-14000g 4℃离心20分钟。
4．收集160μL上清，先取部分用于测定蛋白质浓度，可通过测定215nm和225nm的光吸收得到，计算公式是蛋白质浓度(μg/μL)=0.144×(A215-A225)×稀释倍数，也可使用BCA法测定蛋白浓度。本试剂盒制备的细胞裂解物的蛋白浓度一般在10-750 ng/μL。知道各样品的蛋白浓度后，可用TRAP细胞裂解液将各样品的蛋白浓度调成一样便于比较，然后按10μL/管分装得到至少15管裂解物，放-80℃冷冻保存(可存放一年)。每个样品可取一管进行热灭活(95℃处理10分钟)后再放-80℃冷冻保存，此管将作为该样品的阴性对照。

二、TRAP反应
5．确定每个TRAP反应的细胞裂解物用量：为便于分析比较，每个TRAP反应所用的蛋白量(或细胞数)必须一样。由于细胞裂解物中一般都有高浓度的不明Taq DNA聚合酶抑制物(TRAP失败最常见的原因)，因此最佳结果往往是用稀释10-1000倍后的细胞裂解物得到。建议用一个样品稀释不同浓度做TRAP预实验。
6．在PCR管中按下表设置TRAP反应(50μL反应体系，以A和B两个样品为例)：

成份	A样品管	A阴性 对照管	B样品管	B阴性 对照管	实验 阴性对照	实验 阳性对照
A样品	2μl	-	-	-	-	-
A阴性对照	-	2μl	-	-	-	-
B样品	-	-	2μl	-	-	-
B阴性对照	-	-	-	2μl	-	-
TRAP细胞裂解液	-	-	-	-	2μl	-
合成端粒	-	-	-	-	-	2μl
TS引物混合物	6μl	6μl	6μl	6μl	6μl	6μl
PCR Mix	25μl	25μl	25μl	25μl	25μl	25μl
超纯水	17μl	17μl	17μl	17μl	17μl	17μl

 注：为避免污染，最好等其他样品加完并盖上盖后再加合成端粒。
7．吹打混匀后进行PCR扩增，扩增条件(仅供参考，用户可优化)如下：

步骤	温度	时间
端粒酶延伸	30℃	30min
端粒酶灭活	95℃	5min
PCR(循环35次)	94℃	30s
	55℃	60s
	72℃	30s

三、PAGE-银染检测及结果解读(本试剂盒不含PAGE-银染检测试剂盒)
8．取5μL PCR反应液进行10%非变性PAGE电泳-银染显色实验(需另购本公司PAGE电泳套装和银染试剂盒)。如果背景高(主要是由反应体系中的蛋白成分引起)，可以先进行PCR产物纯化再进行PAGE电泳和银染。
9．跟预期结果(见下表)比较。如果结果跟下表不一致，则需要按具体情况分析原因。

现象	样品管结果	样品阴性 对照结果	实验阴性 对照结果	实验阳性 对照结果
典型TRAP条带 (条带数不限)	有则有端粒酶活性 无则无端粒酶活性	不出现	不出现	不出现
阳性对照的TRAP 条带(仅8条带)	不出现	不出现	不出现	出现
150bp内参	可出现可不出现	出现	出现	出现

 注：本试剂盒所用引物产生的典型TRAP条带最小条带为59bp。

疑难解答：
1．如果样品管有内参带，但没有TRAP条带，可能是端粒酶活性低或者失活。制备细胞裂解物时可在TRAP细胞裂解液中加入1/100体积的RNase抑制剂以抑制RNase活性，并在端粒延伸反应后增加DNA纯化一步，纯化后的DNA再用于PCR。此两步法TRAP需要用户自备DNA纯化试剂和dNTP。
2．如果样品对照管(端粒酶已经灭活)出现TRAP条带，可能是TRAP产物污染，需要使用洁净的PCR管和PCR试管架。样品制备、PCR设置和电泳需在不同房间进行。也可能是端粒酶没有彻底灭活，建议用RNase酶解法或酶解+热灭活法。
3．实验阴性对照管的实验结果中出现TRAP条带，可能是引物二聚体，可采取两步法TRAP，并且将DNA模板加入到70℃预热的PCR Mix3.0中再进行PCR。
4．实验结果不好时，可以直接采取2步法，先做端粒酶延伸和灭活，然后再纯化DNA，用纯化的DNA做PCR。此法需要用户自备dNTP。


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BTN90504 XL1-Blue感受态细胞 XL1-Blue Competent Cell
ARB12165 大鼠白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ)定量分析 Rat soluble interleukin-2 receptor,IL-2srβ ELISA KIT
ARB10454 人生长调节致癌基因α/黑素瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)含量检测 Human growth-regulated oncogeneα/melanoma growth stimulating activity,groα/mgsa ELISA KIT
A0301 优级新生牛血清(无菌采制) 100ml/200ml/500ml
增强革兰氏染色液   4×10ml|4×100ml|4×250ml
依来铬*蓝R D-Prolinamide 3564-18-9
*丙*(代"酮")酸* 5′-UDP,2Na 114-76-1
Luxol Fast Blue染色液   50ml
PY04-103  维生素K1  2.5mg/支×10支  每支添加于100ml 灭菌冷却至50℃的PYG培养基基础中  培养双歧杆菌用于有机酸代谢产物的测定
ARB13720 兔诱导型一氧化*(代"氮")合成酶(INOS)Elisa分析 Rabbit inducible nitric oxide synthase,inos ELISA KIT
ARB13484 鸡细胞凋亡抑制因子Elisa方法检测 Chicken  inhibitor of apoptosis,iap ELISA KIT
3-[N-(1,1-二甲基-2-羟yi基)]*基-2-羟丙*(代"烷")磺酸 N-Cbz-Hydroxy-L-proline 68399-79-1
68990-09-0 BeefExtract 牛肉膏
台盼蓝染色液(1%)   10ml|50ml
HC0270 Conbitips Plus分液管适配器(50ml)
BL0973 鸡外周血淋巴细胞分离液
L-酪*酸 L-Glutamic acid 60-18-4
PY02-215  破伤风梭菌培养基基础  250克  

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