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北京博蕾德生物科技有限公司
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文献和实验值最好接近 72℃ GC 含量(composition)过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的 GC 含量不能相差太大。另外,上下游引物的 Tm 值(melting temperature)是寡核苷酸的解链温度,即在一定盐浓度条件下,50% 寡核苷酸双链解链的温度。有效启动温度,一般高于 Tm 值 5-10℃。 若按公式 Tm=4(G+C+2(A+T)估计引物的 Tm 值,则有效引物的Tm为 55-80℃,其 Tm 值最好接近 72℃ 以使复性条件最佳。 4、引物 3' 端要避开密码
guidelines:Ambion researchers find that siRNAs with 30-50% GC content are more active than those with a higher G/C content.Since a 4-6 nucleotide poly(T) tract acts as a termination signal for RNA pol III, avoid stretches of > 4 T's or A's in the target
1 based on the following guidelines: Ambion researchers find that siRNAs with 30-50% GC content are more active than those with a higher G/C content. Since a 4-6 nucleotide poly(T) tract acts as a termination signal for RNA pol III
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