支原体蛋白提取试剂盒
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支原体蛋白提取试剂盒

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  • 2025年07月15日
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      一年

    • 供应商

      BestBio贝博

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      50T

    贝博® BBproExtra® 支原体蛋白提取试剂盒适用于从各种支原体中提取总蛋白。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。 该试剂盒提取的蛋白具有天然活性,提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀、质谱等各种下游蛋白研究。 本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。

     

    使用方法
    1. 提取液准备:
    每500 μl提取液A中加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物,充分混匀后置冰上备用。
    2. 收集好的支原体样本用PBS洗涤后,加入300-500 μl冷的提取液A,充分混匀。
    3. 置2-8℃条件下振荡20-30分钟。至支原体裂解完全,沉淀体积明显减少。
    4. 将蛋白提取液在2-8℃低温下12000×g离心5-10分钟,取上清。
    5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即得支原体蛋白样品。
    6. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

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    1.蛋白浓度低?
    支原体蛋白丰度比较低,在条件允许的情况下,需要尽可能加大样本的上样量以提高蛋白浓度。
    处理部分样本时可能没有裂解完全,导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理,没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。

    2.用什么方法定量蛋白?
    建议用BCA法。不适合用Bradford法,因为试剂A中含有干扰Bradford法的组份,导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系,则可以用Bradford法定量。

    3.提取的蛋白具有活性吗?
    本试剂盒不含有离子型去垢剂组份,不破坏蛋白的结构,没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏,蛋白均保持其天然构象和活性。

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