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真菌组蛋白提取试剂盒

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      一年

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    • 供应商

      BestBio贝博

    • 规格

      50T/100T

    贝博® BBproExtra® 组蛋白提取试剂盒提供了一种简单而应用广泛的方法以及相应的试剂提取组蛋白。适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织,如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取组蛋白。提取过程简单方便。组蛋白提取产物的产量大约0.4 mg 每107 个细胞或100 mg 组织,不同的细胞和组织中,产量差异很大。 提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、组蛋白修饰实验比如乙酰化、甲基化、sumoylation等下游蛋白研究。

     

    1.蛋白浓度低?
    处理部分样本时可能没有裂解完全,导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂E和A的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理,没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
    2.用什么方法定量蛋白?
    建议用Bradford法。不适合用BCA法。

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    1. 提取液制备:
    每500 μl蛋白提取液A中加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物混匀后置冰上备用。
    2. 取100mg真菌样本用手术剪刀尽可能剪碎,加入蛋白提取液A,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
    3. 将组织匀浆吸入一预冷的干净离心管中,在4℃条件下振荡20-30分钟。
    4. 在4℃,1000×g条件下离心5分钟,弃沉淀,收集上清。
    5. 在4℃,16000×g条件下离心15分钟,弃上清,留沉淀。
    6. 沉淀中加入100 μl组蛋白提取液B。
    7. 用200 μl枪头反复吹打混匀或充分涡旋振荡混匀,置4℃冰箱过夜存放。
    8. 在12000×g条件下离心10分钟,收集上清。
    9. 在上清中加入10-25 μl 试剂C充分混匀。
    10. 加入上样缓冲液混匀后煮沸,分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

     

     

     

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