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- 2025年10月31日
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上海三抒生物科技有限公司
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文献和实验Yeast Two-Hybrid Screening to Test for Protein–Protein Interactions in the Auditory System
We describe a protocol to screen for protein-protein interactions using the Gal-4 based yeast two-hybrid system. In this protocol, we describe serial transformation of bait into an already constructed cDNA library in yeast AH109 cells
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或测序做进一步的验证分析。 构建好诱饵载体还要同时转化诱饵蛋白酵母菌株如Y187和靶蛋白酵母菌株如AH109，进行毒性和自激活性检测，证明诱饵蛋白的表达对酵母正常生长没有毒性，同时也不能自身激活酵母报告基因的表达，可用于筛选文库或研究蛋白间的相互作用。第二个要考虑的问题就是靶蛋白载体或酵母双杂cDNA文库的构建。 一般在编码靶蛋白的基因或cDNA两端加上同源重组序列，然后与靶蛋白载体如pGADT72Rec共同转化靶蛋白酵母菌株如AH109，在酵母同源重组酶的作用下，靶
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