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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Tuner(DE3)pLacI
- 保质期:
有效期一年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
低温运输,-80℃保存
- 规格:
500ul甘油菌
| 菌株类型: | E.coli |
|---|---|
| 培养基: | LB培养基 |
| 生长条件: | 37 ℃, 有氧 |
| 基因型: | |
| 抗性: | 氯霉素 |
| 质粒转化条件: | 42 ℃热激 |
| 应用: | 蛋白表达 |
| 诱导方法: | IPTG |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| LM2007 | Tuner(DE3)pLacI | 500ul甘油菌 |
¥1000.00 |
菌株特点
Tuner系列菌株是LacZY去除的BL21突变菌株,这可以通过细胞培养来调节蛋白表达水平。lac通透酶(lacY)突变使得IPTG能够进入所有的细胞菌内。
不像乳糖或者阿拉伯糖,IPTG是一个可以通过lac通透酶途径进入细胞内的诱导剂。这使得菌株可以使得IPTG的蛋白诱导具有IPTG的浓度依赖性。与 pET系列载体联合使用,可以使得蛋白表达从低表达水平到超高表达水平进行有效调节。蛋白表达水平低的情况下,目的蛋白可能会具有更好的可溶性和生理活 性。
Tuner系列菌株的蛋白表达水平可以通过IPTG浓度进行精确的调节,具有严格的浓度依赖性。
Tuner系列菌株是lon和ompT蛋白酶缺陷型菌株。
DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5启动子下携带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。
pLacI基因型表明该菌株含有pACYC184质粒,该质粒含有Lac抑制子基因。
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文献和实验由它们的天然启动子驱动。在 Rosetta ( DE3 ) pLysS 和 Rosetta ( DE3 ) pLacI 中,稀有 tRNA 基因存在于分别带有 T7 溶菌酶和 lac 阻遏基因的同一质粒上。 Tuner 菌株为 BL21 的 lacZY 缺失突变株,能够调整培养物中所有细胞的蛋白表达水平。 lac 通透酶( lacY )突变使得 IPTG 均匀进入群体所有细胞,从而具有浓度依赖、水平均一的诱导表达。通过调整 IPTG 浓度,表达可从极低水平调节到极强、完全诱导的表达水平(通常
很多新手在问做原核表达需要考虑的载体和菌株的选择,现系统地解答一下,供新手借鉴。
以 AccepTor TM 载体或 perfectly Blunt a 载体形式提供,便于快速 PCR 克隆 · 目标基因无基础水平表达,消除了毒性基因产物相关的质粒不稳定性 · 表达水平与经典 pET 载体相同 · 用 Tuner TM (DE3)pLacI 宿主菌实现真正的表达水平“变阻器”控制。 PET 系统:大肠杆菌中蛋白表达的金字招牌 pET 载体中,目标基因克隆到 T7 噬菌体强转录和翻译信号控制之下,并通过在宿主细胞提供 T7 RNA 聚合酶来诱导表达。 Novagen
High Level Expression of Recombinant Proteins in E. coli
) plus pRARE Tuner(DE3) lacZY deletion mutant ADA494(DE3) trxB mutant Origami(DE3) trxB and gor mutations Expression Plasmid Elements Origin of Replication (ColE1) Selectable marker (ampicillin, kanamycin or chloramphenicol resistance)
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