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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Rosetta 2(DE3)pLacI
- 保质期:
有效期一年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
低温运输,-80℃保存
- 规格:
500ul甘油菌
| 菌株类型: | E.coli |
|---|---|
| 培养基: | LB培养基 |
| 生长条件: | 37 ℃, 有氧 |
| 基因型: | |
| 抗性: | 氯霉素 |
| 质粒转化条件: | 42 ℃热激 |
| 应用: | 蛋白表达 |
| 诱导方法: | IPTG |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| LM2018 | Rosetta 2(DE3)pLacI | 500ul甘油菌 |
¥1000.00 |
菌株特点
Rosetta系列菌株来源于BL21系列宿主菌,该系列菌株含有原本在大肠杆菌中稀少的真核细胞密码子,增加了真核细胞的蛋白表达水平。
Rosetta2(DE3)pLySs来源于Rosetta(DE3),本菌株含有pRARE2质粒,除了能够提供原Rosetta(DE3)宿主菌含有 的AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA六个稀有密码子的tRNA外,还提供了第七个稀有密码子CGG的tRNA。同时,pRARE2质粒具有氯霉素抗性。
Rosetta2(DE3)pLySs载体通过提供稀有密码子,使得该宿主菌相对于其他大肠杆菌,能够提供更加“通用”的蛋白质表达,从而提升目的蛋白表达水平。
DE3是溶源性的 λDE3, 所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。
pLacI基因型表明该菌株含有pACYC184质粒,该质粒含有Lac抑制子基因。
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文献和实验由它们的天然启动子驱动。在 Rosetta ( DE3 ) pLysS 和 Rosetta ( DE3 ) pLacI 中,稀有 tRNA 基因存在于分别带有 T7 溶菌酶和 lac 阻遏基因的同一质粒上。 Tuner 菌株为 BL21 的 lacZY 缺失突变株,能够调整培养物中所有细胞的蛋白表达水平。 lac 通透酶( lacY )突变使得 IPTG 均匀进入群体所有细胞,从而具有浓度依赖、水平均一的诱导表达。通过调整 IPTG 浓度,表达可从极低水平调节到极强、完全诱导的表达水平(通常
-1,pBADHis, pBADHislacZ,pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒:pCDFduet-1 以及pCDNA3.1,pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta(DE3),Rasettagame(DE3),Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒: pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
【专题讨论】原核表达秘笈之宿主菌株的选择!(接原原核表达研究者关心的10个问题贴)
的生产任务”——因为很难亲眼观察微观世界中表达是如何进行的,当出现问题时,我们需要经验判断问题所在。宿主细胞对原核表达可能会产生哪些影响呢? 知其然还要知其所以然。比如,菌株内源的蛋白酶过多,可能会造成外源表达产物的不稳定,所以一些蛋白酶缺陷型菌株往往成为理想的起始表达菌株。堪称经典的BL21系列就是lon和ompT蛋白酶缺陷型,也是我们非常熟悉的表达菌株。大名鼎鼎的BL21(DE3)融源菌则是添加T7聚合酶基因,为T7表达系统而设计。 真核细胞偏爱的密码子和原核系统有不同,因此,在用原核系统
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