- ¥990
- 联迈生物
- LM12-155y
- 美国/中国
- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
PichiaPink Strain4
- 保质期：
有效期一年
- 供应商：
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件：
低温运输，-80℃保存
- 规格：
1 mL
| 名称 | 编号 | 规格 | 价格 | 手册 |
|---|---|---|---|---|
| 毕赤酵母Pichiapink-4菌种 | LM12-155y | 1 mL | 990元 |
使用说明：
联迈生物的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证，如存在质量问题，请在收到产品三个月内通知我司。收到甘油菌后，请及时在固体平板上划线培养，挑取单菌落接种到液体培养基中，震荡培养后使用并保存甘油菌。如需获取其他详细信息请登录我司官网联系QQ客服查询。
毕赤酵母Pichiapink-4菌种的培养方法：
菌种制作菌液的方法（以一瓶为例）1、取10公斤无菌水里面的2公斤烧开，然后加入1公斤的红糖，把红糖充分融化开，便于把红糖里面的有害菌消除。
2、把3公斤的红糖水和剩下的8公斤无菌水装到一个15公斤的容器里，混合均匀，等无菌水冷却到30-40度的时候加菌种1瓶。
3、把菌种和红糖水充分的搅拌均匀，口上盖一层塑料薄膜，要密封发酵，不能漏气。不要装的太满，要预留10-15%的缓冲空间，在发酵过程中会产生气体，装满容易涨破塑料容器。
4、发酵7-12天天左右，温度低要多发酵几天，打开瓶口，有气体产生。闻到酸香味夹杂酒糟味和红糖水的刺激性气味，到就证明发酵成功。（低于15度不能发酵；15-20度发酵20-15天；20-30度，发酵15-10天；30-40度发酵10-6天，发酵时间越长效果越好）；或者用PH试纸测试，PH值显示4-5之间即表明发酵成功。如果温度过低，强烈建议用取暖灯或者火炉等加热设备升温。
5、发酵成功后的菌液如果一次不能大量的使用完，就用小瓶子分装密封保存。使用一瓶打开一瓶。如果没有分装。
保存方法：1、菌液宜在常温下避光保存，底部稍有沉淀或浮有些微白沫均属正常，若气味不酸（PH应在4.5以下）或腐臭即已变质勿用。
2、每次用后盖紧瓶盖。保管得好，一年后无异味仍可使用，只是活性有所降低，需适当加大用量。
注意事项：1、制作菌液最好用深井水，若用自来水应放置24小时后用，水只需烧开1/5能够融化开红糖即可。
2、菌液不要与杀菌剂等药物同时混用，要用此类药物，相隔一天以上时间。
3、红糖用热水溶化后，水温降到30-40度，才能投入农盛乐菌种。过高或者过低均影响发酵效果。
4、制作菌液的过程中，不要频繁打开盖子，以免进入杂菌，影响发酵效果。
5、如若遇到特殊问题，请拨打销售电话详询，不要擅做主张，以免对你造成损失。
毕赤酵母Pichiapink-4菌种注意事项：
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅可用于实验室研究，不能用于动物，人体以及作为食品添加剂等用途。
2、使用甘油菌时可不完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可，也可完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，菌株的活力会逐渐下降。
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文献和实验， （3）电击后复活要快。 不过上面的确麻繁，理解加手熟就能达到，最后效率和菌种有关，一般能达到10的9方，有的能达到10的10方。不过现在我做普通转化就不麻繁，过夜菌彻底用EP管小离心，常温10%甘油洗干净，重悬后做电转，用LB或SOC复活立刻铺盘，只要洗的干净，还没有克隆转不出来的，半h就搞定了，只是每次都要鉴定，因为电转杯是反复用，怕别的残留污染。 7、问：转化了一个基因到毕赤酵母，蛋白有表达，但pcr无论如何也检测不到阳性的特性条带，该如何改进，请指点 参考见解：本人曾经遇到过同样情况，后来
(2)从接触甘油开始就保持恒0度， (3)电击后复活要快。 不过上面的确麻繁，理解加手熟就能达到，最后效率和菌种有关，一般能达到10的9方，有的能达到10的10方。不过现在我做普通转化就不麻繁，过夜菌彻底用EP管小离心，常温10%甘油洗干净，重悬后做电转，用LB或SOC复活立刻铺盘，只要洗的干净，还没有克隆转不出来的，半h就搞定了，只是每次都要鉴定，因为电转杯是反复用，怕别的残留污染。 7、问：转化了一个基因到毕赤酵母，蛋白有表达，但pcr无论如何也检测不到阳性的特性
基作点种分离纯化，挑选在补充培养基生上生长而在基本培养基上不生长的单菌落划YPD平板，4℃保存。2、pPICZαA原核宿主菌TOP10F’的活化培养TOP10F’做为菌种保存在－70℃条件下，在进行扩大培养抽提质粒之前，先要进行活化培养。接种TOP10F’于5ml LLB（加入25ug / ml Zeocin）中，37℃，200 rpm ，培养16～18小时。3、毕赤酵母表达的试验方法3.1线状质粒DNA的脱磷酸化处理重组载体只有被酶切线性化整合效率才能大大提高，环状质粒整合效率是很低的。选用不同
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