TKB1

TKB1

菌株类型:	E.coli
培养基:	LB培养基
生长条件:	37 ℃,  有氧
基因型:
抗性:	四环素
质粒转化条件:	42 ℃热激
应用:	毒性蛋白表达
诱导方法:	IPTG

订购信息

产品编号	产品名称	规格	价格
LM1146	TKB1	500ul甘油菌	¥1000.00

菌株特点

作为E.coli B宿主菌，主要用来进行蛋白表达，细胞内缺少lon蛋白酶和ompT外膜蛋白酶，能够有效避免目的蛋白的降解。

TKB1感受态细胞是BL21(DE3)衍生而来，含有酪氨酸激酶(Tyrosine Kinase)。BL21(DE3)TK感受态细胞，简写为TKB1，带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝，该基因的启动子是LacUV5。

通过IPTG诱导表达的T7 RNA聚合酶，允许其下游目的蛋白表达，从而实现对下游目的蛋白的可控诱导型基因表达。

TKB1感受态细胞内含有一个能有诱导表达酪氨酸激酶基因的质粒（pTK）。

TKB1感受态细胞能够转化进去ColE1 Origin为复制起点的，包含有编码磷酸化目的基团或者蛋白的质粒。如果目的蛋白是构建在一个含有亲和标签的融合表达载体上面，那么对于磷酸化蛋白的纯化就会相对比较容易。

从TKB1感受态细胞中纯化得到的目的蛋白，能够用来筛选表达库，或者亲和纯化和蛋白印记酪氨酸磷酸化蛋白。

TKB1制作程序：

使用说明：
联迈生物的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证，如存在质量问题，请在收到产品三个月内通知我司。收到甘油菌后，请及时在固体平板上划线培养，挑取单菌落接种到液体培养基中，震荡培养后使用并保存甘油菌。如需获取其他详细信息请登录我司官网联系QQ客服查询。
TKB1的培养方法：
菌种制作菌液的方法（以一瓶为例）1、取10公斤无菌水里面的2公斤烧开，然后加入1公斤的红糖，把红糖充分融化开，便于把红糖里面的有害菌消除。
2、把3公斤的红糖水和剩下的8公斤无菌水装到一个15公斤的容器里，混合均匀，等无菌水冷却到30-40度的时候加菌种1瓶。
3、把菌种和红糖水充分的搅拌均匀，口上盖一层塑料薄膜，要密封发酵，不能漏气。不要装的太满，要预留10-15%的缓冲空间，在发酵过程中会产生气体，装满容易涨破塑料容器。
4、发酵7-12天天左右，温度低要多发酵几天，打开瓶口，有气体产生。闻到酸香味夹杂酒糟味和红糖水的刺激性气味，到就证明发酵成功。（低于15度不能发酵；15-20度发酵20-15天；20-30度，发酵15-10天；30-40度发酵10-6天，发酵时间越长效果越好）；或者用PH试纸测试，PH值显示4-5之间即表明发酵成功。如果温度过低，强烈建议用取暖灯或者火炉等加热设备升温。
5、发酵成功后的菌液如果一次不能大量的使用完，就用小瓶子分装密封保存。使用一瓶打开一瓶。如果没有分装。
保存方法：1、菌液宜在常温下避光保存，底部稍有沉淀或浮有些微白沫均属正常，若气味不酸（PH应在4.5以下）或腐臭即已变质勿用。
2、每次用后盖紧瓶盖。保管得好，一年后无异味仍可使用，只是活性有所降低，需适当加大用量。
注意事项：1、制作菌液最好用深井水，若用自来水应放置24小时后用，水只需烧开1/5能够融化开红糖即可。
2、菌液不要与杀菌剂等药物同时混用，要用此类药物，相隔一天以上时间。
3、红糖用热水溶化后，水温降到30-40度，才能投入农盛乐菌种。过高或者过低均影响发酵效果。
4、制作菌液的过程中，不要频繁打开盖子，以免进入杂菌，影响发酵效果。
5、如若遇到特殊问题，请拨打销售电话详询，不要擅做主张，以免对你造成损失。
TKB1注意事项：
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅可用于实验室研究，不能用于动物，人体以及作为食品添加剂等用途。
2、使用甘油菌时可不完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可，也可完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，菌株的活力会逐渐下降。