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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
牛布氏杆菌病cELISA检测试剂盒(注:竞争法确证区分野毒和疫苗抗体)(竞争法)优惠的品牌:百奥莱博,是优质的动物疫病ELISA检测试剂盒产品,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多牛布氏杆菌病cELISA检测试剂盒(注:竞争法确证区分野毒和疫苗抗体)(竞争法)等动物疫病ELISA检测试剂盒产品请联系我司咨询订购。
名称:牛布氏杆菌病cELISA检测试剂盒(注:竞争法确证区分野毒和疫苗抗体)(竞争法)优惠
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
等级:科研试剂
规格:192次/盒
除牛布氏杆菌病cELISA检测试剂盒(注:竞争法确证区分野毒和疫苗抗体)(竞争法)优惠外,我公司正在打折促销以下产品:
·高致病猪蓝耳和猪蓝耳(hp-PRRSV/PRRSV)通用型(二合一)荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA468
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·金黄色葡萄球菌单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA258
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·大肠杆菌致贺毒素(Stx1)/(Stx2)双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA107
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·鸡肠炎沙门氏菌(SPP.E)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA544
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·诺沃克病毒(GI和GII)双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA025
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对诺沃克病毒GI型特异性引物,一对诺沃克病毒GII型特异性引物,分别结合一条特异性荧光探针,用一步法双重荧光RT-PCR技术对诺沃克病毒GI型RNA、GII型RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中诺沃克病毒GI型的探针报告基团为FAM,诺沃克病毒GII型的探针报告基团为HEX/VIC/JOE。
二、用途:
本试剂盒适用于喉咽棉拭子、泄殖腔棉拭子、各种组织样品、尿囊液、细胞培养液、分泌物或粪便及病毒分离培养物等标本中的诺沃克病毒的特异性检测。适用于诺沃克病毒GI型感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(40T/Kit)
组份 数量 规格
诺沃克荧光qRT-PCR反应液(Norovirus GI+GII-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(H5-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可按常规方法提取,也可采用商品化试剂盒提取病毒RNA。
6.2.1 取无RNA酶的1.5 mL Eppendorf离心管,做好标识。
6.2.2 加入600 μL 裂解液,200 μL样本,200 μL *仿,混匀器上振荡5 s,4℃ 12000 rpm离心15 min。
6.2.3 吸取步骤6.2.2中的上清液转移至新的无RNA酶的1.5 mL Eppendorf离心管中(避免吸出中间层),加入400 μL 异丙醇,颠倒混匀。
6.2.4 4℃ 12000 rpm离心15 min,弃上清;加入600 μL 75%乙醇。
6.2.5 4℃ 12000 rpm离心10 min,弃上清。打开离心管管盖,室温干燥5 min-10 min。
6.2.6 加入10μL 无核酸酶水,溶解管底的RNA,5000 rpm离心5 s,-20℃保存。若长期保存需放置-80℃冰箱。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(NorovirusGI+GII-qRT-PCRMIX)、酶混合物(EnzymesMIX),室温融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Norovirus GI+GII-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM和HEX/VIC/JOE。其中FAM基团检测GI,HEX/VIC/JOE基团检测GII。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC):FAM和HEX/VIC/JOE通道全部阴性。
(2)阳性对照(NorovirusGI+GII-PTC):FAM和HEX/VIC/JOE通道均有扩增。
(3)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1)FAM通道:Ct值≤35 Norovirus GI病毒核酸为阳性;Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明Norovirus GI病毒核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间,为灰区,需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明Norovirus GI病毒核酸阳性;否则判为样本阴性。
(2)HEX/VIC/JOE通道:Ct值≤35 Norovirus GII病毒核酸为阳性;Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明Norovirus GII病毒核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间,为灰区,需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明Norovirus GII病毒核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA酶。
(3)PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
牛布氏杆菌病cELISA检测试剂盒(注:竞争法确证区分野毒和疫苗抗体)(竞争法)优惠关键词:注:竞争法确证区分野毒和疫苗抗体,SYA651,牛布氏杆菌病cELISA检测试剂盒(注:竞争法确证区分野毒和疫苗抗体)(竞争法),百奥莱博
·东部/西部/委内瑞拉马脑炎病毒三重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA251
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·鲍曼不动杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA048
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·土拉弗朗西斯菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA132
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·蜱传出脑炎病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA240
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·肠出血性大肠杆菌(O104)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA082
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·小肠结肠炎耶尔森菌/弯曲菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA099
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·禽流感H7病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA156
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·H1/H3型流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA167
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·沙门菌/志贺菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA096
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·副伤寒沙门杆菌单重荧光PCR检测试剂盒(有甲乙丙三型)
编号:SYA060
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·人副流感病毒1型/3型双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA187
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对人副流感病毒1 型特异性引物,一对人副流感病毒3 型特异性引物,分别结合一条特异性荧光探针,用一步法双重荧光RT-PCR 技术对人副流感病毒1 型/3 型RNA 进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中人副流感病毒1 型的探针报告基团为FAM,人副流感病毒3 型的探针报告基团为VIC/HEX/JOE。
二、用途:
本试剂盒适用于各种咽拭子、鼻拭子样品等临床样品中人副流感病毒1型/3型的特异性检测。适用于人副流感病毒1型/3型感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
人副流感1型/3型反应液(PIV1/PIV3-qRT-PCR MIX) 1管 576μL/管
qRT 酶混合物(qRT Enzymes MIX) 1管 192μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
人副流感1型/3型阳性对照(PIV1/PIV3-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取4μL 加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR 反应液(PIV1/PIV3-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 12µL N×12µL
酶混合物 4µL N×4µL
总量 16µL N×16µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N 个PCR 反应管中分别加入16μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PIV1/PIV3-PTC)4μL,10000rpm 瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 50℃ for 30 min
预变性 1循环 95℃ for 5 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 10 sec
55℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM和VIC(若仪器无VIC通道,可选择HEX或JOE通道)。其中FAM基团检测PIV1,VIC/HEX/JOE基团检测PIV3。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX 参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):FAM和VIC/HEX/JOE通道均无扩增。
(2) 阳性对照(PIV1/PIV3-PTC):FAM和VIC/HEX/JOE通道均有扩增。
以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效
8.3 结果判定
(1) FAM通道:Ct值≤35 PIV1核酸为阳性;Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明PIV1核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间,为灰区,需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明PIV1核酸阳性;否则判为样本阴性。
(2) VIC/HEX/JOE通道:Ct值≤35 PIV3核酸为阳性;Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明PIV3核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间,为灰区,需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明PIV3核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA 酶。
(3) PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
牛布氏杆菌病cELISA检测试剂盒(注:竞争法确证区分野毒和疫苗抗体)(竞争法)优惠关键词:注:竞争法确证区分野毒和疫苗抗体,SYA651,牛布氏杆菌病cELISA检测试剂盒(注:竞争法确证区分野毒和疫苗抗体)(竞争法),百奥莱博
BL1213 0.1%吕氏碱性美蓝染色液
苏丹Ⅲ酒精饱和溶液 100ml
PY02-352 假单胞菌琼脂基础培养/CN琼脂基础 250克
134-03-2 抗坏血酸* Sodium ascorbate
ARB10564 人过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)酶标法分析 Human peroxisome prolifeRator-activated receptor γ,ppar-γ ELISA KIT
F030812 BIOTIN标记山羊抗兔IgG抗体 Goat Anti-Rabbit IgG*BIOTIN
N-乙酰-L-酪*酸乙酯 D-Theronine 36546-50-6
BL0940 生物素化人IgG抗体
BL1323 dTTP(100mM)
BL0840 羊抗人C3纯化抗体
SJ0820 *百里香酚蓝
4-甲氧基偶氮* Cresol Red sodiu*(代"m") salt 2396-60-3
BL0907 FITC标记兔抗山羊IgG抗体
BTN131223 Zenker固定液 Zenker Solution
Kodak D-19显影粉剂 1L
三*基甲*(代"烷") Glycine ethyl ester HC1 519-73-3
α-*乙酸 Rhodamine 123 86-87-3
BTN131012 萤火虫荧光素 Luciferin
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购牛布氏杆菌病cELISA检测试剂盒(注:竞争法确证区分野毒和疫苗抗体)(竞争法)优惠。
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文献和实验(第二抗体)检测已与固相抗原结合的抗体。●竞争法 检测抗原或小分子半抗原、抗体,以测抗原为例,使待测抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合,结果如待测抗原含量越多,与固相抗体结合的酶标抗原就越少,显色越浅,二者呈负相关。 ELISA原理 今后的发展方向●聚苯乙烯表面的高级制备。已有的技术是酰肼化(聚二氟乙叉,PVDF);生物素化;预包被多聚赖氨酸等,均是专利产品。●酶促信号放大的改变,如酶促荧光、酶促化学发光等。ELISA临床意义●各型肝炎的特征及标志物 乙肝二对半的模式及临床意义 HBsAg HBeAg
。 (七)酶联免疫吸附试验 酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay.ELISA)简称酶联试验,已广泛用于多种寄生虫感染的宿主体液(血清,脑脊液等)以及排泄分泌物(尿,乳,粪便等)内特异抗体或抗原微粒的检测。根据检测要求,试验可分多种类型,常用者有:用于检测抗体的间接法;检测IgM的双夹心法;检测抗原的双抗体夹心法;以固相抗体检测抗原的竞争法以及竞争抑制法等(图21-8)。 图21-8 酶联免疫吸附试验常用
于阿米巴病、锥虫病、棘球蚴病、旋毛蚴病、血吸虫病等血清学诊断。 (七)酶联免疫吸附试验 酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay.ELISA)简称酶联试验,已广泛用于多种寄生虫感染的宿主体液(血清,脑脊液等)以及排泄分泌物(尿,乳,粪便等)内特异抗体或抗原微粒的检测。根据检测要求,试验可分多种类型,常用者有:用于检测抗体的间接法;检测IgM的双夹心法;检测抗原的双抗体夹心法;以固相抗体检测抗原的竞争法以及竞争抑制法等(图
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