第一链cDNA合成试剂盒哪里买

第一链cDNA合成试剂盒哪里买

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  • ¥200 - 1980
  • 百奥莱博
  • 北京
  • JN0002-PND
  • 2025年07月15日
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    • 英文名

      BalbScript 1st Strand cDNA Synthesis UltraMix

    • 库存

      587

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    第一链cDNA合成试剂盒哪里买是高品质的核酸扩增(PCR)产品,由北京百奥莱博供应,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多第一链cDNA合成试剂盒等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。


    名称:第一链cDNA合成试剂盒哪里买
    编号:JN0002
    规格:50次|100次
    品牌:百奥莱博
    产地:国产|进口
      本试剂盒是以mRNA或者总RNA为模板,高效合成第一链cDNA。本试剂盒使用M-MuLV反转录酶(JN0011),它的RNA酶H的活性与AMV反转录酶相比较低。该反转录酶可耐受42-50℃温度.试剂盒中含有重组RNA酶抑制剂(E055),可耐受55℃高温,有效防止RNA降解。试剂盒同时含有Oligo(dT)18,只以有poly(A)尾巴的mRNA为模板合成cDNA,使用本试剂盒也可采用序列特异性引物。合成的第一链cDNA能直接用作PCR或荧光定量PCR的模板,第二链cDNA的合成或线性RNA扩增,也可用于需要用带有放射性或非放射性核苷酸标记第一链cDNA的实验。

    试剂盒组成

     
    组份 JN0002-20次 JN0002-100次
    M-MuLV反转录酶(200 U/μl) 25μl 120 μl
    RNA酶抑制剂(40 U/μl) 25 μl 120 μl
    5xM-MuLV Buffer 150 μl 500 μl
    dNTP(10mM) 50 μl 250 μl
    Oligo(dT)18(100 μM) 25 μl 120 μl
    GAPDH正向引物(10 uM) 20 μl 20 μl
    GAPDH反向引物(10 uM) 20 μl 20 μl
    Water,nuclease-free 2x1.25 ml 2x1.25 ml

    注:2×RT-PCR Reaction Buffer中包含Taq DNA聚合酶、dNTP、Mg2+、RNase Inhibitor以及反应缓冲液。

    注意事项
    1、用DEPC处理实验用到的所有管子和枪头,或者购买已经证明无核酸酶的实验用具,整个实验过程戴手套并经常更换手套,避免RNA酶的污染。
    2、确保所用试剂及超纯水中无RNA酶污染。
    3、纯化过的RNA要保证不含有盐,金属离子,乙醇和*酚,因为以上成分会干扰第一链cDNA的合成反应。可采用乙醇沉淀RNA的方法去除掉痕量污染物。

    实验步骤:
    I.第一链cDNA合成
    1、融化后,将试剂盒中各组分混匀并稍微离心,离心后置于冰上。
    2、按顺序加入下表中的反应物。
    3、可选优化步骤。如果RNA模板GC含量高或者含有二级结构,可先将模板和引物的混合液轻轻混匀,短暂离心,65℃孵育5分钟,冰上冷却,离心,再置于冰上冷却。
    4、轻轻混匀,离心。
    5、如果使用Oligo(dT)18或者基因特异型引物,42℃孵育60分钟。如果使用随机六聚体引物,25℃.先孵育5分钟,随后42℃孵育60分钟。
    6、70℃加热5 min终止反应。
    反应产物可直接用于PCR反应或者在-20℃保存少于一周的时间。如想延长保存时间,建议使用-70℃保存。

    II.第一链cDNA的PCR扩增
    合成的第一链cDNA可直接用于PCR或qPCR。第一链cDNA反应液体积不能超过PCR反应体系的1/10。通常50 μl的PCR反应体系中,第一链cDNA反应液加入2μl。

    应用实例
    JN0002-Total-RNA-Extraction
    图例一)小鼠胚胎肝脏总RNA抽提。
    按百奥莱博RNA抽提试剂盒操作说明书抽提,起始组织量50mg;

    JN0002-GAPDH-RT-PCR
    图例二)百奥莱博第一链cDNA合成后PCR扩增目的基因。
    泳道1:某进口品牌;泳道2:百奥莱博第一链cDNA合成试剂盒扩增结果。(1ug总RNA反转录后,取1ul用于PCR检测,目的基因:GAPDH)

    常用反应体系(20μl)
    模板RNA 总RNA(0.1 ng~5 μg)
    poly(A) mRNA(10 pg~0.5 μg)
    特异性RNA(0.01 pg~0.5 μg)
    引物 Oligo (dT)18引物1μl
    随机六聚体引物1 μl
    基因特异性引物15~20 pmol
    5×Reaction Buffer 4ul
    RNA酶抑制剂(20U/ul) 1ul
    dNTP(各10mM) 2.0μl
    M-MuLV反转录酶(200U/ul) 1μl
    ddH2O(Nuclease Free) 至20μl


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    第一链cDNA合成试剂盒哪里买关键词:JN0002,第一链cDNA合成试剂盒,BalbScript 1st Strand cDNA Synthesis UltraMix


    ·重组小鼠补体C5
    编号:JN1904
    英文名称:Recombinant Mouse Complement Component C5
    规格:10μg|50μg|500μg|1mg
    本品由我们的大肠杆菌表达系统制备而成,目的基因编码的Asn679-Arg755表达纯化得来。

    Complement C5质量控制:>95%(还原性SDS-PAGE)

    Complement C5制剂:冻干品

    Complement C5保存
    冻干蛋白置于-20℃以下可长期保存,室温条件下可稳定保存3周。
    复溶蛋白溶液可在4~7℃保存2~7天,可分装后置于-20℃保存三个月。

    Complement C5复溶
    打开试剂管前请先离心。
    复溶浓度推荐大于100 μg/ml。
    冻干蛋白请溶于ddH2O。
    复溶后,请根据用量分装冻存,避免反复冻融。

    关于Complement C5
    Mouse Complement C5 (C5a) is a glycoprotein that belongs to a family of structurally and functionally related proteins known as anaphylatoxins. C5a is a 77 amino acid peptide that is created by the C5a convertase proteolytic cleavage of C5 αchain in the classical and alternative complement pathway (C4b2a3b, C3bBb3b). Mouse C5a has fourαhelices, plus three intra-chain disulfide bonds that form a triple loop structure. C5a functions via G-protein coupled receptor (GPCR) (C5aR/CD88). C5a is a potent chemoattractant and anaphylatoxin that acts on all classes of leukocytes and on many other cell types including endothelial, smooth muscle, kidney, liver, and neural cells. It mediates IL-8 release from bronchial epithelial cells. It also triggers an oxidative burst in macrophages and neutrophils, causing release of histamine in basophils and mast cells. C5a anaphylatoxin activity on hepatocytes results indirectly from interaction with nonparenchymal cell via prostanoid secretion. Mouse C5a shares 60% and 82% sequence identity to human and rat C5a, respectively.


    第一链cDNA合成试剂盒哪里买关键词:JN0002,第一链cDNA合成试剂盒,BalbScript 1st Strand cDNA Synthesis UltraMix


    ·重组小鼠Cyclophilin A(CYPA)
    编号:JN1607
    英文名称:Recombinant Mouse Peptidyl-prolyl Cis-trans Isomerase A
    规格:10μg|50μg|500μg|1mg
    本品由我们的大肠杆菌表达系统制备而成,目的基因编码的Met1-Leu164表达纯化得来。

    Cyclophilin A/CYPA质量控制:>95%(还原性SDS-PAGE)

    Cyclophilin A/CYPA制剂:液体

    Cyclophilin A/CYPA保存:收到货后请置于-20℃,可保存6个月,避免反复冻融。

    关于Cyclophilin A/CYPA
    Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase A is a cytoplasm protein which belongs to the cyclophilin-type PPIase family and PPIase A subfamily. Cyclophilins(CyPs) are a family of proteins found in organisms ranging from prokaryotes to humans. These molecules exhibit peptidyl-prolyl isomerase activity, suggesting that they influence the conformation of proteins in cells. Cyclophilin A accelerate the folding of proteins. It catalyzes the cis-trans isomerization of proline imidic peptide bonds in oligopeptides. Cyclophilin A can interact with several HIV proteins, including p55 gag, Vpr, and capsid protein, and has been shown to be necessary for the formation of infectious HIV virions.



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