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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
His-tag
- 形态:
液体
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
- 克隆性:
多克隆
- 适应物种:
含His-tag的重组蛋白
- 保质期:
二年
- 目录编号:
SY0644
- 级别:
单克隆
- 库存:
241
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 宿主:
小鼠
- 应用范围:
WB,ELISA
- 浓度:
1mg/ml
- 靶点:
His-tag
- 抗体英文名:
HRP-conjugated His-tag, Mouse mAb
- 抗体名:
HRP标记小鼠抗His-tag单克隆单克隆抗体
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的HRP标记小鼠抗His-tag单克隆抗体厂家用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多HRP标记小鼠抗His-tag单克隆抗体等一抗产品请联系我司咨询订购。
名称:HRP标记小鼠抗His-tag单克隆抗体厂家
英文名:HRP-conjugated His-tag, Mouse mAb
编号:SY0644
规格:100μl(>200次)
品牌:百奥莱博
本品为HRP标记小鼠抗His-tag单克隆抗体,HRP标记小鼠抗His标签单克隆抗体。推荐稀释比例:WB(1:4000~16000)
His标签是由6个组*酸(His-His-His-His- His-His)组成的短肽,可与多种蛋白形成融合蛋白,基于组*酸的咪唑环与金属离子(如镍离子)起化学作用而生成螯合的原理,可以利用His-Tag标签纯化His融合蛋白。由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His融合标签与其他标签相比有很多明显优势,是目前融合标签中使用最为广泛的一种。
本品为HRP标记的His-tag抗体,可特异性识别来源于多种物种(如细菌、昆虫、哺乳动物)的位于N端或C端His的融合蛋白。抗体具有高灵敏度,高特异性和高亲和力。
产品类型:小鼠单抗(mouse mAb IgG1)
反应性:含His-tag的重组蛋白
宿主:Mouse
应用:WB
克隆号(Clone NO.):9C11
免疫原:偶联KLH的6×His多肽
缓冲液:含50%甘油的PBS,pH7.3
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
HRP标记小鼠抗His-tag单克隆抗体厂家极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·10×RIPA裂解液(中)(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂)
编号:SY0320
英文名称:10×RIPA Lysis Buffer (Medium),without enzyme inhibitors
规格:100ml
本品属于裂解强度居中的RIPA裂解液,裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。本品为10倍浓缩液,使用时需稀释成1×工作液。
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),其本意是Radio Immunoprecipitation Assay,是一种传统的细胞组织快速裂解液,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有裂解作用。根据其裂解液的强度不同,大致可以分为强、中、弱三类。
注意事项
1)本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂,使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂。
2)裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3) 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
(一) 细胞样品
1)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂。
【注】:如需加入PMSF,请在使用前数分钟内加入,使其最终浓度为1mM。
2)贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成5×105~1×106个细胞/管,然后再裂解。
3)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。
(二)组织样品:
1)把组织剪切成细小的碎片。
2)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂。
【注】:如需加入PMSF,请在使用前数分钟内加入,使其最终浓度为1mM。
3)按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4)用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
【注】:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
HRP标记小鼠抗His-tag单克隆抗体厂家关键词:小鼠抗His-tag,SY0644,HRP标记小鼠抗His-tag单克隆抗体,His-tag抗体
·高分辨率琼脂糖(PCR级)
编号:SY0256
英文名称:High Sieving Agarose
规格:5g
琼脂糖(Agarose)是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体,提取自琼脂或者含琼脂的海藻,结构上是一种线性聚合物,由β-D-吡喃半乳糖(1-4)连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂,常用于通过凝胶电泳或者印迹法(如Northern或Southern)来进行日常核酸分析,也适用于蛋白应用,如辐射状免疫扩散(RID)实验。
本品为PCR级高分辨率琼脂糖,对PCR产物、小片段DNA具有较高的分辨率,适宜分离20bp-800bp的DNA片段,其分离效果可与聚丙*(代"烯")酰胺相媲美。此外,还具有如下特点:
1)易溶解,胶液更清澈,可以配制高达5%的凝胶;
2)很低的背景;
3)品质稳定等。
琼脂糖的基本参数,包括:
1) 硫*(代"酸")盐含量(sulfate content)——纯度指标,因为硫*(代"酸")根是存在琼脂糖内的主要离子基团;
2) 凝胶强度(gel strength)——施加于凝胶使之断裂的外力;
3) 胶凝点(Gel point)——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中,琼脂糖溶液具有滞后性,因此,胶凝点不等同于胶熔点。
4) 电渗(EEO)——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移,但是解离的阳离子就会朝负极迁移,从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动,则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。
产品性质
| CAS: | 39346-81-1 |
| 外观(Appearance) | 白色粉末 |
| 凝胶强度(Gel Strength) | ≥750g/cm2(1.5% gel) |
| 凝胶温度(Gel Point) | ≤33℃(1.5% gel) |
| 融胶温度(Melting Point) | ≤70℃(1.5% gel) |
| 电渗值(EEO, -mr) | ≤0.10 |
| 外观(Appearance) | 无色清澈胶液 |
| 硫*(代"酸")盐(Sulfate, %) | ≤0.10% |
| 水分: | ≤10% |
| 灰分(Ash Content) | ≤0.5% |
| DNA酶(DNase) | Not detected |
| RNA酶(RNase) | Not detected |
| 蛋白酶(Protease) | Not detected |
| 核酸内切酶(Endonuclease) | Not detected |
使用方法
1)配制适量电泳及制胶用的缓冲液(根据电泳需要,配制合适浓度的电泳及制胶缓冲液),倒入合适三角瓶中。【注意】:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2)根据制胶量及凝胶浓度,加入准确称量的琼脂糖粉(总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量)。
3)在微波炉中加热溶解琼脂糖,设置中火加热至沸腾,保持胶液沸腾约 30s,戴上防热手套,移开三角锥瓶,小心摇动三角锥瓶,重悬未溶解颗粒,再次用高火加热1分钟(或加热直至琼脂糖完全溶解)。请戴上防热手套,小心摇动三角锥瓶,使琼脂糖胶液充分均匀。
【注意】:必须保证琼脂糖充分完全溶解,此时琼脂糖胶液清澈,否则,会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡,停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4)使溶液冷却至60℃左右,如需要可在此时加入*化乙锭(EB)溶液使其终浓度为0.5µg/ml,并充分混匀。
【注意】:*化乙锭是一种致癌物质。使用含有*化乙锭的溶液时,请戴用手套。建议使用我司提供的EB无毒替代品(YeaRed 核酸染料,Cat# 10202),使用时仅需用制胶缓冲液稀释至1×工作液即可。
5)将琼脂糖溶液倒入制胶模具中,在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在3-5mm之间。
6)在室温下使胶凝固(大约30min-1h),然后放置于电泳槽中进行电泳。
【注意】:凝胶不立即使用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存,一般可保存 2~5天。
琼脂糖浓度与DNA分离范围
| 线性DNA片段大小(bp) | 20-250 | 50-500 | 100-1200 | 500-2000 |
| 琼脂糖浓度(%) | 5.0 | 4.0 | 3.0 | 2.0 |
HRP标记小鼠抗His-tag单克隆抗体厂家关键词:小鼠抗His-tag,SY0644,HRP标记小鼠抗His-tag单克隆抗体,His-tag抗体
1239-45-8 *化乙锭 Ethidium Brmide
CYB163034 羊抗兔IgG(全分子)-RBITC
加拿大树胶 POPOP 8007-47-4
ARB11966 大鼠CD3分子(CD3)酶免分析 Rat cluster of differentiation 3,cd3 ELISA KIT
PY01-186 脑心浸粉(牛) 250克
ARB12059 大鼠己糖激酶(HK)ELISA检测服务 Rat hexokinase,hk ELISA KIT
透明质酸* Tannic acid 9067-32-7
ARB11441 人桩蛋白(PAx)Elisa分析 Human paxillin,pax ELISA KIT
ARB12656 大鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA代测服务 Rat a disintegrin and metalloprotease 8,adam8 ELISA KIT
2′-脱氧腺苷-5′-三磷酸三*盐 Z-L-aspartic acid
ZCBTH03 高比活牛凝血酶 500ku
BL0932 RBITC标记兔抗山羊IgG抗体
BTN80810 一站式SDS-PAGE电泳套装 One-Stop SDS-PAGE Pack
KT221 Golden Easy PCR System
改良Gram-Weigert革兰染色液(**(代"胺")结晶紫法) 5×50ml
ARB11045 人青少年2型血色素沉着症/幼年型血色病相关蛋白2(HFE2)代做ELISA实验 Human hemochromatosis type 2/uvenile-uman homolog,hfe2 lisa kit
ARB14204 小鼠组蛋白H3(Histone-H3)血清中含量检测
ARB13735 兔脂蛋白*(代"磷")脂酶A2(Lp-PLA2)定量分析 Rabbit lipoprotein-associated phospholipase a2 ,lp-pla2
活性蛋白提取试剂盒 Active protein extraction kit 50T|100T
T4 DNA ligase 100U
ARB12565 大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)酶标法分析 Rat glial cell line-derived neurotrophic factor,gdnf ELISA KIT
HC0129 3MM滤纸
北京百莱博科技有限公司是一抗产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购HRP标记小鼠抗His-tag单克隆抗体厂家。
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文献和实验Monoclonal Mouse Anti-Digoxin 产品详情 HRP辣根过氧化物酶标记小鼠抗地高辛Digoxin单克隆抗体 HRP-conjugated IgG Fraction Monoclonal Mouse Anti-Digoxin 产品
切片中的抗原。(6)生产厂家。我的经验是国外著名抗体生产商原装抗体质量一般没问题,但有点贵;而国内分装厂家用的一抗工作液,价格便宜,但有时结果的稳定性和重复性稍差,尤其不同批次重复性较差。(7)价格与质量的矛盾。我个人认为一抗原装质量可能会好点,因为许多一抗避免反复冻融,且在稀释液中稳定性较差(若时间长),但价格较贵。2、二抗选择要点(1)种属来源。主要根据一抗种属来源来决定购买二抗来源,如一抗是小鼠来源,那二抗就买抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。(2)标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记
Buffer、洗涤Buffer 、封闭液为阴性对照。 4. 洗涤Buffer洗板三次,加入1:2500稀释的HRP标记的抗人IgG, 100ml/well,37°C孵育1h. 5. 洗涤Buffer洗板三次,加入显色液,100 ml/well,避光反应10~15min. 6. 加入H2SO4终止反应,50 ml/well。 7. ELISA Reader 读取OD490 光密度值,分析和比较病人血清和正常血 清中TFAR19自身抗体的表达水平。 2. Western blot 分析原发
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