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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
Protease Cocktail, EDTA-free, 100×DMSO Stock Solution
- 库存:
773
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free, 100×DMSO储液库存在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京现货蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free, 100×DMSO储液库存
编号:SY0324
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:Protease Cocktail, EDTA-free, 100×DMSO Stock Solution
细胞裂解后的蛋白粗提物中含有大量的内源性蛋白酶,这些酶可以降解细胞提取物中的蛋白。因此为了防止蛋白纯化过程中目的蛋白不受蛋白酶的破坏,需要加入蛋白酶抑制剂对其进行活性抑制。
本品是多种常见蛋白酶抑制剂的混合物,包含AEBSF、Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin、Pepstatin A多种成分,广谱抑制来源于动植物、细菌、酵母等组织或细胞内的多种蛋白酶,如丝*酸蛋白酶、半胱*酸蛋白酶、*肽酶、酸性蛋白酶等。另外,本品不含EDTA(一种金属蛋白酶抑制剂),特别适用于活性中心为金属离子依赖的蛋白。兼容于后续的固定化金属离子亲和层析(Immobilized metal-chelate affinity chromatography, IMAC)、2-D 凝胶电泳以及天然凝胶电泳等蛋白分析实验。
本品为溶于DMSO的溶液,以100×储存液的形式提供,可用于WB, Co-IP, Pull-down assay, IF, IHC,激酶研究等多种分析。
使用方法:使用前将本品取出回温至室温,样品分析前按照1:100(v/v)的比例加入到样品溶液中,混匀即可。
储存条件:-20℃,有效期一年。
注意事项
1)本品具有广谱的蛋白酶抑制活性,但是不具有磷酸酶抑制剂活性。若进行磷酸化蛋白的研究,可使用我司的磷酸酶抑制剂混合物(100×)(Cat#SY0311)。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
北京现货蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free, 100×DMSO储液库存极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)
编号:SY0321
英文名称:1×RIPA Lysis Buffer (Strong),without enzyme inhibitors
规格:100ml
本品为裂解强度相对较强的RIPA裂解液(1×),裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),其本意是Radio Immunoprecipitation Assay,是一种传统的细胞组织快速裂解液,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用。根据其裂解液的强度不同,大致可以分为强、中、弱三类。
注意事项
1)本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂,使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂。
2)裂解样品的所有步骤均需在冰上或4℃进行。
3) 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
(一) 培养细胞样品:
1)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF等抑制剂,使PMSF的最终浓度为1mM。
【注】:请根据实验情况选用酶抑制剂。
2)贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。
(二)组织样品:
1)把组织剪切成细小的碎片。
2)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF等抑制剂,使PMSF的最终浓度为1mM。
【注】:请根据实验情况选用酶抑制剂。
3)按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4)用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
【注】:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
北京现货蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free, 100×DMSO储液库存关键词:SY0324,Protease Cocktail, EDTA-free, 100×DMSO Stock Solut,蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free, 100×DMSO储液
过氧化物酶染色液(氧化WG-KI法) 2×10ml|2×20ml
A8060-58 牛血清白蛋白Albumin from bovine serum
BFD010 猪弓形体病毒抗体检测试剂盒
ARB10462 人生长激素释放多肽(GHRP)ELISA代测服务 Human growth hormone releasing Peptide,ghrp ELISA KIT
9050-68-4 Sephadex G-10 medium(葡聚糖凝胶G-10)
BTN100601 细胞核微量制备试剂盒 Nuclei Miniprep Kit
2,2’-联喹*(代"啉")-4,4’-二羧酸* Trans-zeatin Riboside 979-88-4
PY08-075 磷酸盐缓冲液 225ml 20瓶/箱 用作稀释液
ARB11985 大鼠HepAssocIn(HPS)代做ELISA实验
BTN131225 Carnoy固定液 Carnoy Solution
BTN71204 柱式凝固血液DNAOUT Column Blood Clot DNAOUT
乙醇氧化酶 Taq plus DNA Polymerase 9073-63-6
内源性链亲和素封闭液 100ml
533-67-5 2-deoxy-D-glucose 2-脱氧-D-核糖
北京现货蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free, 100×DMSO储液库存关键词:SY0324,Protease Cocktail, EDTA-free, 100×DMSO Stock Solut,蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free, 100×DMSO储液
·罗丹明Red-X标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号:SY0687
英文名称:Rhodamine Red-X AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG (H+L)
规格:100μl
本品是由Rhodamine Red-X标记的山羊抗小鼠IgG(H+L),使用抗原偶联的琼脂糖微珠从山羊抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的小鼠IgG分子,也会与其他小鼠免疫球蛋白的轻链结合。可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应,但不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。
Rhodamine Red-X 的Amax(最大激发波长)为570nm,Emax(最大发射波长)为590nm。本品适合做单标实验。要做多标(multiple-labeling)实验,建议使用经过与相近物种血清蛋白或者免疫球蛋白预先经过亲和吸附处理的二抗。
浓度:0.75 mg/ml
缓冲液:0.005M 磷酸*,0.125M *化*, pH 7.6
荧光素:Rhodamine Red-X, Amax=570, Emax=590
稳定剂:7.5mg/ml BSA(无IgG,蛋白酶),50% 甘油
防腐剂:0.025% 叠氮化*
推荐稀释比例:1:25~100(适用于大多数实验)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
我公司正在优惠促销蛋白质研究等系列产品,期待您的咨询选购北京现货蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free, 100×DMSO储液库存。
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文献和实验4 ,溶于800 ml水中,用HCl调pH至7.4,用纯水定容至1 L; (2) EDTA 储存液: 18.61 g Na 2 EDTA·2H 2 O,溶于70 ml纯水中,用10 mol/L NaOH调节pH值至8.0 (约需2 g NaOH颗粒),定容为100 ml。可高压灭菌后分装备用; (3) 亮肽素储存液 (50 μg/ml,100×) 10 mg/ml溶于水,-75℃保存;使用时配成50 μg
, KCl 0.2 g, Na2HPO4 1.44 g, KH2PO4,溶于800 ml水中,用HCl调pH至7.4,用纯水定容至1 L; (2) EDTA 储存液: 18.61 g Na2EDTA·2H2O,溶于70 ml纯水中,用10 mol/L NaOH调节pH值至8.0 (约需2 g NaOH颗粒),定容为100 ml。可高压灭菌后分装备用; (3) 亮肽素储存液 (50 μg/ml,100×) 10 mg/ml溶于水,-75℃保存;使用时配成50 μg/ml储液,-20℃保存
, KCl 0.2 g, Na2HPO4 1.44 g, KH2PO4,溶于800 ml水中,用HCl调pH至7.4,用纯水定容至1 L; (2) EDTA 储存液: 18.61 g Na2EDTA•2H2O,溶于70 ml纯水中,用10 mol/L NaOH调节pH值至8.0 (约需2 g NaOH颗粒),定容为100 ml。可高压灭菌后分装备用; (3) 亮肽素储存液 (50 μg/ml,100×) 10 mg/ml溶于水,-75℃保存
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