ERRE-GFP报告基因质粒优惠

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")ERRE-GFP报告基因质粒优惠，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：ERRE-GFP报告基因质粒优惠
英文名：ERRE GFP Reporter Plasmid
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：SY0215
规格：1μg
ERRE-GFP报告基因是用于检测ERRE转录活性水平为目的的报告基因。ERRE(ERR alpha response element) 是ERRα反应元件, ERRα优先结合ERRE中的位点。

ERRE-GFP报告基因主要应用于Estrogen Receptor Related Receptor信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。

pGMERRE-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个ERRE结合位点，可以高效地检测ERRE的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得ERRE-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM ERRE -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMERRE-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

我公司的ERRE-GFP报告基因质粒优惠，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·Sox2 萤火虫荧光素酶报告基因质粒
编号：SY0065
英文名称：Sox2 luciferase reporter plasmid
规格：1μg
Sox2-Luc荧光素酶报告基因（报告基因质粒）（Sox2 luciferase reporter plasmid）是用于检测Sox2转录活性水平为目的的报告基因。Sox2基因在核重编和诱导多功能干细胞（ipsc）方面有重要的作用。Sox2基因包括DNA结合的HMG box和携带Oct4的复合体，目的是维持多能性。

Sox2报告基因主要用于检测细胞中Sox2转录因子的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMSox2-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个Sox2结合位点，可以高灵敏度地检测Sox2的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得Sox2报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明
1. pGMSox2-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
2. Sox2的激活剂，可作为Sox2报告基因的阳性对照。

储存条件：-20℃。


ERRE-GFP报告基因质粒优惠关键词：ERRE GFP Reporter Plasmid,SY0215,ERRE-GFP报告基因质粒


·Goldview核酸染料(10000×)
编号：SY0243
英文名称：Goldview Nucleic Acid Gel Stain (10,000×)
规格：1ml
GoldView是一种可替代*化乙锭（EB）的新型核酸染料，采用琼脂糖凝胶电泳检测DNA 时，其与DNA发生结合并产生很强的荧光信号，灵敏度与 EB 相当，使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光，而单链DNA呈现红色荧光。GoldView特别适合大片段（＞1 kb）DNA的检测，灵敏度高。也可用于RNA的染色。

使用方法
1） 将100 ml琼脂糖凝胶溶液（浓度一般为0.8%-2%）在微波炉中融化。
2） 加入5-10 μl GoldView（若背景过高可以适当减少用量；若灵敏度过低，可以适当增加用量），轻轻摇匀，避免产生气泡。
3） 冷却至不烫手时倒胶，待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。
4） 电泳完毕，使用凝胶成像系统或可见光透射仪观测。注：若使用凝胶成像系统照相时，通过调节光圈、曝光时间选择合适的滤光片，可得到成像清晰、背景较低的照片。

注意事项
1） 胶厚度不宜超过0.5cm，胶太厚会影响检测的灵敏度。
2） 加入GoldView的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响。
3） GoldView特别适用于大片段（＞1 kb）DNA的检测。对于更小片段的DNA，特别是＜500bp检测信号可能很弱或者无信号。对于＜500bp的DNA染色，建议使用SYBR Green I 核酸染料。
4） 含GoldView的凝胶不适合进行胶回收实验。
5） Goldview的主要成分是吖啶橙，具有细胞渗透性，有一定的细胞毒性。建议操作人员使用时做好防护措施，带上手套和口罩。并妥善处理好废弃物。
6） 另提供无毒的EB替代物-Dured核酸染料（SY0244），强烈推荐使用。
7） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：RT。


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·RIPA裂解液(中)
编号：SY0316
英文名称：RIPA Lysis Buffer (Medium)
规格：100ml
本品属于裂解强度居中的RIPA裂解液，含有sodiu*(代"m") orthovanadate，sodiu*(代"m") fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂，可以有效抑制蛋白降解。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。

RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)，其本意是Radio Immunoprecipitation Assay，是一种传统的细胞组织快速裂解液，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有裂解作用。根据其裂解液的强度不同，大致可以分为强、中、弱三类。

注意事项
1）需自备PMSF。
2）裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3） 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：

(一) 细胞样品

1）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成5×105～1×106个细胞/管，然后再裂解。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。

（二）组织样品：

1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3）按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
【注】：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。

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