免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂)厂家

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北京百奥莱博专业生产供应免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂)厂家，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂)厂家
编号：SY0319
规格：100ml
产地：国产|进口
英文名：Lysis Buffer for WB/IP Assays (without enzyme inhibitors)
品牌：百奥莱博
本品WB/IP裂解液，是一种非变性条件下的裂解液，可以有效维持原有的蛋白间的相互作用。其主要裂解成分为1%的Triton X-100，不含蛋白酶、磷酸酶等抑制剂，裂解得到的蛋白样品可用于Western、IP、CoIP以及许多兼容1%Triton X-100的酶活性或者生物小分子的检测。

注意事项

1）本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂，使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂或不加酶抑制剂。
2）裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3）如果WB/IP裂解液得到的蛋白样品是用于酶活性测试或一些生物小分子的检测，需要测试标准品用该裂解液稀释后是否会显著影响标准曲线，如无显著影响，则可继续使用。
4） 用WB/IP裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
5）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

(一) 细胞样品
1）融解WB/IP裂解液（无抑制剂），混匀。取适当量的裂解液，根据实验目的决定是否添加适当酶抑制剂。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，需分装成5×105～1×106个细胞/管，然后再裂解。因为大团细胞较难裂解充分，而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触，相对比较容易裂解充分。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀、免疫共沉淀、酶或生物小分子检测等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入100μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150μl或200μl。

（二）组织样品：

1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解WB/IP裂解液（无抑制剂），混匀。取适当量的裂解液，根据实验目的决定是否添加适当酶抑制剂。
3）按照每20mg组织加入100-200μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。

关于免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂)厂家的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
7647-14-5 Sodium Chloride  *化*
PY01-171  酚酞  ind  25克  
N,N"-二琥珀酰亚胺基碳酸酯 Penicillin V potassiu*(代"m") salt 74124-79-1
ARB10375 人甘露糖(MN)酶标法分析 Human mannose,mn ELISA KIT
四草酸* L-Leucinol 6100-20-5
BTN80812 考马斯亮蓝染液 Coomassie Blue G-250 Stain Solution
Hanks平衡盐溶液(无酚红)  1×HBSS|5×HBSS 500ml
葡聚糖凝胶QAE-A25 Glycogen 52219-08-6
BOC-L-异亮*酸 Amberlite 732 13139-16-7
5-腺苷二磷酸二*盐 Brilliant cresyl bulue 16178-48-6
磷酸*缓冲液(pH7.5)  0.5mol/L 500ml
BTN60202 柱式DNA胶回收试剂盒 Column DNABACK
甲基磺酸乙酯 Magnesium trisilicate 62-50-0
ARB12080 大鼠内毒素(ET)Elisa定量检测 Rat endotoxin,et ELISA KIT
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·细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)
编号：SY0474
英文名称：Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
规格：20 rxn
Annexin V-Alexa Fluor488/PI细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-Alexa Fluor488/PI Apoptosis Detection Kit）是用Alexa Fluor488标记了的Annexin V作为探针，来检测细胞早期凋亡的发生，可用流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。

其检测原理为：在正常的活细胞中，磷脂酰丝*酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝*酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。

另外，本试剂盒中还提供了碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料，它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此，将Annexin V与PI联合使用时，PI 则被排除在活细胞（Annexin V-/PI-）和早期凋亡细胞（Annexin V+/PI-）之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被Alexa Fluor488 和PI 结合染色呈现双阳性（Annexin V+/PI+）。

试剂盒组份：
Annexin V-Alexa Fluor488————————100 μl
PI Staining Solution (20 μg/ml)————200 μl
4×Binding Buffer————————————4 ml

注意事项
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝*酸与Annexin V-Alexa Fluor488的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后，轻摇时胰酶与细胞充分接触，然后倒掉大部分胰酶，利用剩余的少量胰酶再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
4) 试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
5) Annexin V-Alexa Fluor488和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。

储存条件：4℃，有效期一年。


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ARB11364 人前心*肽(Pro-ANP)含量测试 Human pro atrial natriuretic Peptide,pro-anp ELISA KIT
ARB10672 人血管紧张素Ⅲ(ANGⅢ)代做ELISA实验 
植物基因组DNA提取试剂盒(柱式吸附) 
BTN130586 小鼠抗HSV标签单抗 Anti HSV-Tag Mouse Mab
BFD001 猪瘟病毒抗体检测试剂盒
溶菌酶(Lysozyme,10mg/ml)   5ml
50-02-2 Dexamethasone  地塞米松
ARB13817 豚鼠载脂蛋白A1(Apo-A1)酶免分析 
PY01-188  玉米浸粉  100克  
ARB13486 鸡促黄体激素(LH)免费代测 Chicken luteinizing hormone,lh ELISA KIT
对*二甲醛 Magnesium carbonate hydroxide 623-27-8
分子筛3A型 DL-Alanine 308080-99-1
1866-15-5 碘化硫代乙酰胆碱 Acetylthiocholineiodide
HEPES缓冲盐溶液(2×HeBS,pH6.7)   100ml
ARB10148 人Rho-A蛋白elisa检测说明书 Human rho-aELISA KIT
288-32-4 Imidazoie 咪唑
*化*乙醇溶液(1mol/L)   500ml
ARB12070 大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)elisa检测操作说明书 Rat neutrophil gelatinase-associated lipocalin,ngal ELISA KIT
反丁烯二酸 4-Amino-1-methyl-3-n-propyl-5-pyrazolecarboxamide 110-17-8
PY02-355  玉米吐温-80琼脂  250克  

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