细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluo

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)销*(代"售")在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)销*(代"售")
产地：国产|进口
英文名：Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
编号：SY0474
品牌：百奥莱博
Annexin V-Alexa Fluor488/PI细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-Alexa Fluor488/PI Apoptosis Detection Kit）是用Alexa Fluor488标记了的Annexin V作为探针，来检测细胞早期凋亡的发生，可用流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。

其检测原理为：在正常的活细胞中，磷脂酰丝*酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝*酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。

另外，本试剂盒中还提供了碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料，它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此，将Annexin V与PI联合使用时，PI 则被排除在活细胞（Annexin V-/PI-）和早期凋亡细胞（Annexin V+/PI-）之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被Alexa Fluor488 和PI 结合染色呈现双阳性（Annexin V+/PI+）。

试剂盒组份：
Annexin V-Alexa Fluor488————————100 μl
PI Staining Solution (20 μg/ml)————200 μl
4×Binding Buffer————————————4 ml

注意事项
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝*酸与Annexin V-Alexa Fluor488的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后，轻摇时胰酶与细胞充分接触，然后倒掉大部分胰酶，利用剩余的少量胰酶再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
4) 试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
5) Annexin V-Alexa Fluor488和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。

储存条件：4℃，有效期一年。

除细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)销*(代"售")外，我公司正在打折促销以下产品：

·MEF3-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号：SY0133
英文名称：MEF3 Luciferase Reporter Plasmid
规格：1μg
MEF3-Luc荧光素酶报告基因质粒（MEF3 luciferase reporter plasmid）是用于检测MEF3(myocyte enhancer factor 3)转录活性水平为目的的报告基因。

MEF3-Luc荧光素酶报告基因质粒主要应用于Myocyte Enhancer Factor 3信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。

pGMMEF3-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个MEF3结合位点，可以高灵敏度地检测MEF3的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得MEF3报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



使用说明
pGMMEF3-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。


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过氧化*酶(CAT)检测试剂盒(钼酸铵微板法)   100T
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·乙基*基聚乙二醇
编号：SY0304
英文名称：NP-40 (Nonidet P 40)
规格：100ml
NP-40 (Nonidet P 40)，中文名称乙基*基聚乙二醇，是一种非离子表面活性剂。
储存条件：室温干燥。

·重组烟草蚀纹病毒蛋白酶
编号：SY0385
英文名称：rTEV Protease
规格：1000U
重组型TEV蛋白酶（rTEV）是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶，不仅保持天然TEV酶的功能活性，且在广谱的温度范围内表现出更好的稳定性和特异性。rTEV是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶，具有很强的位点特异性，严格识别七*基酸序列EXXYXQ↓(G/S)，切割位点在谷*酰胺和甘*酸/丝*酸之间。普遍应用的七*基酸序列为：Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH 7.0，30℃时可达到最佳活性，但在pH 6.0-8.5和温度4-30℃的广泛范围内皆有活性（见表1），使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而灵活变动。另外rTEV切割后也能利用其N端的 6×His标签，通过Ni-NTA树脂去除，以达到纯化目的蛋白的目的。

表1. 不同温度下rTEV酶切活性

 

应时间	不同温度下剪切活性(%)
	4℃	16℃	21℃	30℃
1 h	34	58	56	70
2 h	58	80	78	90
3 h	71	99	99	99
3.5h	84	99	99	99

影响天然TEV酶活性的常见因素：1）PMSF和AEBSF（1 mM），TLCK（1 mM），Bestatin（1 mg/ml）、Pestatin A（1 mM），EDTA（1 mM）以及E-64（3 mg/ml），以上这些蛋白酶抑制剂对rTEV的活性没有影响；2）Zn离子（＞5 mM）对rTEV活性有抑制；3）与半胱*酸反应的试剂也是rTEV的潜在抑制剂。

来源：大肠杆菌
外观：无色透明液体
比活力：5 U/μl
活性定义：在1×rTEV Buffer（50 mM Tris，pH8.0，0.5 mM EDTA，1mM DTT）中，30℃反应1h，剪切>85%的3 μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
纯化（Purification ）：Ni亲和纯化
纯度：≥95%（by SDS-PAGE）

产品组份：
rTEV Protease（5 U/μl）—————200 μl
rTEV Buffer 1（20×）——————2 ml
rTEV Buffer 2（1000×）—————50μl

储存条件：-20℃，有效期一年。

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