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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Yeast genomic DNA rapid extraction kit
- 库存:
369
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京酵母基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附)说明书,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京酵母基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附)说明书
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:Yeast genomic DNA rapid extraction kit
编号:ALH152
规格:50次
本试剂盒采用DNA吸附柱和独特的溶液系统,适合于从多种来源的酵母培养物中快速简单地提取基因组DNA。约3ml处于指数生长期的酵母培养液一般一次抽提可纯化出10-15μg的高质量的基因组DNA。纯化DNA产物可直接用于PCR、酶切和杂交等实验。酵母细胞经lyticase处理去除细胞壁后,独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份:
缓冲液YB————————————20ml
结合液CB————————————11ml
漂洗液WB————————————15ml
抑制物去除液IR—————————25ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
Lyticase(10U/μl)———————2500U
蛋白酶K冻干粉(20mg/ml)—————20mg
吸附柱AC————————————50个
收集管(2ml)——————————50个
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品裂解后操作一般可在30分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇、异丙醇、β-巯基乙醇。
3. 开始实验前将需要的水浴先预热到37℃和70℃备用。
4. 结合液CB 和抑制物去除液IR 中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 用户需要自备Sorbitol buffer( 1M 山梨醇, 0.1M Na2EDTA,14 mMβ-巯基乙醇)。
配制方法:在600 ml 去离子水里面溶解182.2 克山梨醇,加入200 ml 0.5M Na2EDTA (pH 8.0) ,不需要调节PH 值,定容到1L,4℃保存。临用前加0.1%β-巯基乙醇(商品化的β-巯基乙醇摩尔浓度一般为14M)。
6. 菌体浓度检测一般OD600 值为1 的时候,酿酒酵母细胞是1-2×10^7cells/ml,由于菌种和分光度计不同即使同样细胞数量OD 值变化也很大,以上仅供参考。
7. 洗脱液EB 不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水
洗脱,但应该确保批pH 大于7.5, pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA 应该保存在-20℃。DNA 如果需要长期保存,可以用TE 缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA 可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:酵母基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附)|柱式酵母DNA提取试剂盒
除北京酵母基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附)说明书外,我公司正在打折促销以下产品:
·平末端载体连接试剂盒(不含多克隆位点)(T4连接酶技术)
编号:ALH341
英文名称:Zero background flat end fast connection kit(without mcs)
规格:20次|40次
本试剂盒是一种先进的自杀基因阳性选择克隆系统,可以高效克隆平末端 PCR 产物和任何具有平末端的DNA 片段。该试剂盒对磷酸化或非磷酸化的 DNA 片段都有效。 阳性选择载体和插入片段连接仅需 5 分钟即可获得超过 90%的阳性重组克隆。由具有校正活性的聚合酶(如:Pfu polymerase)扩增的平末端 PCR 产物可直接连入克隆载体。连接产物可直接转化常用的大肠杆菌菌株。
本试剂盒提供一个新颖的自杀基因阳性选择克隆载体。该载体含有致死的自杀基因,当载体与片段连接成功,自杀基因无法正确表达,包含重组子的细胞可以正常生长;当载体与片段连接不成功,载体自连后自杀基因正确表达,包含自连空载体的细胞无法存活,即“零ZERO”背景。这种阳性筛选策略无需蓝白斑筛选,极大地加速了克隆筛选进程。
本试剂盒载体消除了插入位点附近的多克隆酶切位点,需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。此时如果使用PCR扩增引物导入的酶切位点进行DNA酶切时,酶切反应将不会受到T载体上其它多克隆酶切位点上的限制酶影响,可以大大提高酶切效率,增加亚克隆成功率。
试剂盒组份(20次):
平末端Simple Vector(40ng/μl)——————————20μl
1000bp Control(40ng/μl)-———————————5μl
2×Quick Ligation Buffer-————————————100μl
T4 DNA ligase(5U/μl)—————————————20μl
Forward Sequencing Primer (10μM)————————100μl
Reverse Sequencing Primer (10μM)————————100μl
注:
forward sequencing primer, 23-mer 5’-CGACTCACTATAGGGAGAGCGTC- 3’
reverse sequencing primer, 24-mer 5’-AAGAACATCGCTTTTCGATGGCAG- 3’
储存条件:-20℃,有效期6个月。
北京酵母基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附)说明书关键词:酵母基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附),柱式酵母DNA提取试剂盒
003005 大鼠血浆 100ml|500ml
超低分子量蛋白Marker(3.3-45kD) 10次
ARB11553 人恙虫病抗体IgM(STA-IgM)酶标法分析
ARB14247 猪圆环病毒Ⅰ型抗原(PCVⅠ Ag)Elisa方法检测
PY04-084 多粘菌素B 0.5mg/支×10支 每支添加于15ml胰酪胨大豆多粘菌素肉汤培养基基础中,用于蜡样芽孢杆菌的MPN值测定
4-甲**胺树脂 α-Napthyl acetate
固定细胞蛋白提取试剂盒 50T|100T
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4578-31-8 5-单磷酸腺苷 AMPNa2
北京酵母基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附)说明书关键词:酵母基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附),柱式酵母DNA提取试剂盒
·总RNA提取试剂(组织/细胞/液体样本)
编号:ALH003
英文名称:Total RNA extraction reagent From Tissue,Cell and Liquid Sample
规格:50ml|100ml
本试剂是直接从来源于人,动植物,酵母,细菌和病毒的液体样品中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入*仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。在除去水样层后,样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。共纯化DNA对于样品间标准化RNA的产量十分有用。
无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。本试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品。所有的操作可以在一小时内完成。本试剂抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。如果是用于PCR,当两条引物位于单一外显子内时,建议用扩增级的DNase I来处理抽提的总RNA。
本试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用*化乙啶染色,可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带,两条优势核糖体~5 kb (28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。
注意事项:
1. 当本试剂用量少于2ml时建议使用清洁的一次性的聚丙材质试管。
2. 当本试剂用量较大时,可以使用玻璃试管(Corex)或聚丙材质试管,事先检验以确保该试管可以耐受加入本试剂和*仿后12,000×g的离心力。不可使用有裂缝或者破损的试管。
3. 离心前小心平衡试管。
4. 离心前玻璃管口必须盖上铝箔并用石蜡膜封口,聚丙*(代"烯")管必须盖紧。
5. 从少量的组织(1~10mg)或细胞(102~104)中分离RNA 样品:调整样品体积到0.25ml,往组织或细胞中加入0.75ml 本试剂。待样品裂解后,加入*仿并进行步骤2 中的抽提操作。在用异丙醇沉淀RNA 之前,加入5~10μg 无RNA 酶的glycogen 作为水样层的载体。为降低其黏度在加入*仿前用26 号注射器抽吸两次以切断基因组DNA。Glycogen 会留在水样层中并和RNA 共析出。在浓缩到4mg/ml之前它不会抑制逆转录反应第一链的合成也不会抑制PCR。
6. 在匀浆化后和加入*仿之前,样品可以在–60~–70℃ 保存至少一个月。RNA 沉淀(步骤4,RNA 漂洗)放置于75%的乙醇在2~8℃ 至少可以保存一周,在–5~–20℃下至少可保存一年。
7. 台式离心机最大能达到2,600×g 的离心力的,如果将离心时间延长到30~60 分钟可以满足步骤2 和步骤3 中的操作。
储存条件:4℃,有效期12个月。
我公司正在打折促销DNA纯化全系列产品,恭候您的咨询选购北京酵母基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附)说明书。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP330 石蜡包埋组织 DNA 快速提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 石蜡切片或石蜡块2. 无水乙醇3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml 离心管4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。本文版权归天根生化科技(北京)有限
振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。 2 试剂的准备 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。 3 加样 在ELISA中
Plus 组织/细胞RNA快速提取试剂盒 由北京艾德莱生物研发部推出。这是在RN07 EASYspin组织/细胞RNA快速提取试剂盒无苯酚、氯仿RNA快速提取技术基础上又研发成功出基因组DNA清除柱技术,确保有效清除gDNA残留,得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后裂解混合物通过一个基因组DNA清除柱,基因组DNA被清除而RNA穿透滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅
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