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- 形态:
液体
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
- 克隆性:
多克隆
- 保质期:
二年
- 目录编号:
RFT171
- 库存:
255
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 应用范围:
WB,ELISA
- 抗体英文名:
Mouse anti-GST Monoclonal antibody
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京GST标签抗体厂商,我公司供应的抗体抗原品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京GST标签抗体厂商
规格:20μl
品牌:百奥莱博
英文名:Mouse anti-GST Monoclonal antibody
编号:RFT171
小鼠抗GST单抗克隆IgG,抗体推荐用于重组蛋白GST标签检测,不管GST 位于重组蛋白N 端或者C 端。本品采用蛋白A纯化自小鼠腹水,浓度为1mg/ml,
推荐应用比例(最优稀释比例依不同实验具体情况而定):
Western Blot————1:3000~1:50000
ELISA-———————1:5000~1:200000
储存条件:-20℃
想要了解更多关于北京GST标签抗体厂商的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·小分子蛋白电泳试剂盒
编号:RFT078
英文名称:Small molecule protein electrophoresis Kit
规格:10次
本试剂盒含有小分子蛋白电泳(多肽电泳)全*(代"套")试剂,可以用来检测1-20kd的多肽大小。本试剂盒可配制至少10块常规大小的PAGE胶(8×10cm)。
试剂盒特点:
1 适用范围广:2×多肽电泳缓冲液和2×PAA溶液中不含有SDS,适用于多肽的变性和非变性电泳。
2 分辨率高:凝胶缓冲液独特配方,可以有效分离1-5kD多肽。
3 稳定性高:凝胶缓冲液pH为中性,存放时间长。
4 使用方便:配制凝胶时只需1:1混合2×凝胶缓冲液和2×PAA溶液,加上APS和TEMED即可配制凝胶。
试剂盒组成:
| 组份 | 规格 | 贮存 |
| 2×多肽电泳浓缩胶缓冲液 | 15 ml | 4℃ |
| 2×多肽电泳分离胶缓冲液 | 30 ml | 4℃ |
| 2×PAA溶液 超低浓缩胶用 | 15 ml | 4℃ |
| 2×PAA溶液 超低分离胶用 | 30 ml | 4℃ |
| 10% APS(干粉) | 5 ml | 常温 |
| TEMED | 0.5 ml | 常温 |
| 10×Tricine-Tris-SDS缓冲液(10×TTS) | 500 ml(干粉) | 常温 |
| 2×Tricine 上样缓冲液(含还原剂) | 1 ml | -20℃ |
| QuickLan蛋白染色液 | 500 ml | 常温 |
使用方法:
一、10% APS配制:
10% APS配制-5 ml:将APS干粉溶于5 ml灭菌水中,彻底溶解后分装,1 ml/支,-20℃备存,每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间,以防失效。10%APS在4℃有效期为一周,-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10% APS。
二、制胶:
I 配制分离胶
1、按照表一将不同体积的成分加入到小烧杯或离心管中混合;立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
表一:(一块1 mm mini胶用量)*
| 分离胶 | 浓缩胶 | |
| 18%T /5 ml | 5%T /2 ml | |
| 2×多肽电泳浓缩胶缓冲液 | / | 1 ml |
| 2×多肽电泳分离胶缓冲液 | 2.5 ml | / |
| 2×PAA溶液 超低浓缩胶用 | / | 1 ml |
| 2×PAA溶液 超低分离胶用 | 2.5 ml | / |
| 10%APS | 45-60μl** | 20-30μl |
| TEMED | 5μl | 2μl |
注:
* 如非必须,不要使用厚度1.5mm的凝胶,尽量使用厚度0.75m和1mm的凝胶,这样会减少电泳后染色和脱色的时间。
** 凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时,聚合较快;冬天气温低时,聚合时间会延长。可以根据表二的标准条件调节催化剂的加入量。
表二:超低凝胶制备凝固时间表
| 环境温度 | 20℃ | |
| 分离胶配制 | 浓缩胶配制 | |
| 分离胶配制量 | 5 ml | - |
| 浓缩胶配制量 | - | 2 ml |
| 10%APS | 50μl | 20μl |
| TEMED | 5μl | 2μl |
| 凝固时间 | 5-10 分钟 | 20-30 分钟 |
2、在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液,然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的无水乙醇层,使凝胶表面保持平整。
3、静置5-10分钟,待分离胶和乙醇层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
II 配制浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去。
1、按照表一将不同成分加入到小烧杯或离心管中混合;立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
2、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
3、静置20-30分钟待凝胶聚合
三. 电泳:
10×Tricine-Tris-SDS缓冲液配制:
将10×Tricine-Tris-SDS缓冲液(10×TTS)粉末(Cat No:CB010P)置于一干净的一升烧杯中,加入500ml超纯水,彻底搅拌混匀,不要调节pH,即配成500ml的10×TTS缓冲液。
表三:1×TTS缓冲液配制
| 1×TTS配制量 500 ml | 1×TTS配制量 1000 ml | |
| 10×TTS | 50ml | 100ml |
| 超纯水 | 450 ml | 900 ml |
注:伯乐Mini III电泳槽一次电泳使用500ml 1×TTS缓冲液。
将电泳槽的内槽加满1×TTS缓冲液,轻柔拔出梳子,用1ml移液器将梳孔吹洗干净,将Marker或蛋白样品(已经过2×Tricine上样缓冲液[Cat No:TP050]处理)加入点样孔,稳压电泳(表四),至蓝色指示前沿至分离胶下沿位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2.5-3个小时。
表四 多肽电泳条件
| 恒电压 | 150V |
| 起始电流 | 60-75mA/板胶 |
| 结束电流 | 15-25mA/板胶 |
| 电泳时间 | 2.5-3小时 |
四、染色(使用组分9-QuickLan蛋白染色液):
用前必读:
1、使用前如发现瓶中有少许沉淀,请混匀后使用。
2、以下“使用方法”是针对0.75mm和1.0 mm厚度,10×10cm凝胶染色程序。
使用方法:
1、将电泳后的PAGE胶取下放入塑料容器中,加入适量染色液(以刚刚覆盖过胶面为适),条带1-2分钟即可见。
2、摇床上常温摇动10-15分钟。
3、观察结果。
注意事项:
1、使用方法中的各种参数仅针对面积8×10cm或10×10cm,厚度0.75mm和1mm的凝胶,如果使用更大面积或更厚的凝胶,请加入更多的染色液并延长染色的时间。
2、常规染色所需的漂洗,固定,脱色步骤都无必要。
3、本染色液可以重复利用1-2次,敏感性会有轻微下降,请延长染色时间。
4、本染色液有轻微腐蚀性,请带手套操作。使用后,请盖好瓶盖,常温密封保存。
储存条件:4℃,有效期一年。
北京GST标签抗体厂商关键词:Mouse anti-GST Monoclonal antibody,GST标签抗体,RFT171
·SDS-PAGE凝胶制备及电泳试剂盒
编号:RFT076
英文名称:SDS-PAGE gel preparation and electrophoresis Kit
规格:50次
本公司提供的SDS-PAGE蛋白电泳试剂盒包含凝胶制备以及蛋白电泳所需的全部试剂。本试剂盒可配制至少50块常规大小的PAGE胶。
试剂盒组成:
| 组份 | 规格 | 保存条件 |
| 40%PAA(29:1) | 100 ml | 4℃ |
| 4×Tris/SDS分离胶缓冲液 pH8.8 | 100 ml | 4℃ |
| 4×Tris/SDS浓缩胶缓冲液 pH6.8 | 50 ml | 4℃ |
| APS(干粉) | 0.5 g | RT |
| TEMED | 0.5ml | 4℃,避光 |
| 4×蛋白电泳上样缓冲液(含还原剂) | 1 ml | -20℃ |
| 5×Tris-甘*酸电泳缓冲液(干粉) | 1 L | RT |
使用方法:
一、配制分离胶(各试剂使用量请参考表二)
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度(表一),再按照下面的分离胶配方表(表二)配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。
表一:不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围:
| SDS-PAGE分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 6% | 50-150kD |
| 8% | 30-90kD |
| 10% | 20-80kD |
| 12% | 12-60kD |
| 15% | 10-40kD |
配制分离胶前,根据以下配方准备10% APS:
10% APS配制-5 ml:将0.5 gAPS干粉溶于5 ml灭菌水中,彻底溶解后分装,1 ml/支,-20℃备存,每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间,以防失效。10%APS在4℃有效期为一周,-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10%APS。
制备分离胶步骤:
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
2、按照表二将不同体积的成分在小烧杯或试管中混合;加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
3、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
4、静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,说明凝胶已聚合
表二:SDS-PAGE分离胶配方表
| 组份 | 不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml) | |||
| 5ml | 10ml | 15ml | 20ml | |
| 8%胶 | ||||
| H2O | 2.7 | 5.4 | 8.1 | 10.8 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1 | 2 | 3 | 4 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
| 10%胶 | ||||
| H2O | 2.45 | 4.9 | 7.35 | 9.8 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
| 12%胶 | ||||
| H2O | 2.2 | 4.4 | 6.6 | 8.8 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1.5 | 3 | 4.5 | 6 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
| 15%胶 | ||||
| H2O | 1.825 | 3.65 | 5.475 | 7.3 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1.875 | 3.75 | 5.625 | 7.5 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
二、浓缩胶制备:
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、按照表三将不同体积成分在一个小烧杯或试管中混合;加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
3、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
4、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
5、静置30-60分钟,等待浓缩胶聚合。
表三:SDS-PAGE浓缩胶(4%)配方表
| 组份 | 不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml) | |||
| 2 ml | 4 ml | 5 ml | 10 ml | |
| H2O | 1.17 | 2.34 | 2.925 | 5.85 |
| 4×Tris/SDS浓缩胶buffer pH6.8 | 0.63 | 1.26 | 1.575 | 3.15 |
| 40% PAA(29:1) | 0.2 | 0.4 | 0.5 | 1 |
| TEMED | 0.002 | 0.004 | 0.005 | 0.01 |
| 10% APS | 0.02 | 0.04 | 0.05 | 0.1 |
三、电泳:
凝胶凝固好后,根据以下配方准备电泳缓冲液。
5×Tris-甘*酸电泳缓冲液的配制-1 L:将一包5×Tris-甘*酸电泳缓冲液干粉全部倒入1L烧杯中,加入约900 ml水彻底溶解,用水定容至1 L,即配成5×Tris-甘*酸电泳缓冲液(此溶液不用调节pH值)。用前再稀释5倍即配成1×Tris-甘*酸电泳缓冲液。在电泳槽的内槽内加入1×Tris-甘*酸电泳缓冲液(让电泳缓冲液漫过加样孔),轻轻的拨出梳子,随后在电泳槽外槽加入适量的1×Tris-甘*酸电泳缓冲液。上样,电泳,一般是浓缩胶80V,分离胶120V恒压,等指示前沿*酚兰电泳到分离胶下缘后,结束电泳,染色或者进行下一步实验。
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