即用型PMSF溶液(100mM)供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")即用型PMSF溶液(100mM)供应，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：即用型PMSF溶液(100mM)供应
英文名：Phenylmethanesulfonyl fluoride
编号：RFT193
品牌：百奥莱博
规格：10ml
产地：国产|进口
PMSF是一种不可逆的丝*酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、凝血酶等，作用原理是特异性识别并磺化决定酶活性的丝*酸残基活性位点。此外，其对半胱*酸蛋白酶(如木瓜蛋白酶)和哺乳动物来源的乙酰胆碱酯酶也有抑制效果。PMSF常在细胞或组织裂解之前加入到裂解液中以预防蛋白的降解。PMSF可以单独使用，也常与其他蛋白酶抑制剂如胃抑肽酶A或者磷酸酶抑制剂如正钒酸*混合使用。

本产品配备有PMSF溶解液，可以方便配制成100mMPMSF储备液。由于PMSF不溶于水，有毒性，不稳定的缺点，另有PMSF的无毒替代物，AEBSF(货号：AE1020)，活性和功能与PMSF相同，具有毒性低，稳定，溶于水的优点。在蛋白提取中，PMSF推荐使用终浓度为0.1-1 mM，由于PMSF在水系缓冲液中极其不稳定，必须现用现加。

配制使用方法：
取一管PMSF晶体全部加入到PMSF溶解液中，彻底溶解后即配成100mMPMSF溶液。在蛋白提取缓冲液中稀释100倍使用，如500μl提取缓冲液中加入5μl。
注：PMSF溶液在水系缓冲液中极其不稳定，必须现用现加。

储存条件：-20℃，有效期6个月。

更多有关即用型PMSF溶液(100mM)供应的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·66KD蛋白Marker
编号：RFT041
规格：50mg
本产品包含一种已知分子量的标准蛋白质，分子量大小为66kD，可以用来判断SDS-PAGE未知蛋白的分子量。本品以干粉状态提供。

使用方法：
1、配制10mg/ml 66kD蛋白Marker母液：取10mg 粉末溶于1ml超纯水中。此溶液-20℃贮存。
2、按照下表配制Marker溶液

 

配制量	浓度	66KD母液(10mg/ml)	超纯水	5×DualColor蛋白上样缓冲液
10μl	0.2 μg/μl	0.2μl	7.8μl	2μl
50μl	0.2 μg/μl	1μl	39μl	10μl
100μl	0.2 μg/μl	2μl	78μl	20μl

3、取配制好的溶液彻底混匀后，95℃处理5分钟立即上样电泳，每次上样10μl。
4、电泳结束后，染色，观察结果。

储存条件：-20℃。


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·Long Taq DNA聚合酶
编号：RFT098
英文名称：Long Taq DNA Polymerase
规格：500U|5×500U
本品是由pfu DNA 聚合酶和Taq DNA聚合酶按照一定的比例混合而成。两种酶协同作用实现了扩增效率、合成速度和延伸性能的完美统一，可以合成超长的DNA片段。当扩增具有复杂的二级结构(GC rich等)的模板或具有重复序列的模板时，使用GC buffer进行PCR扩增将非常有效。另外，此酶具有比Taq DNA聚合酶约5倍的PCR可信度。该酶的大多数PCR产物3’端带碱基A，可以通过TA克隆法进行克隆。

产品组分：
Long Taq DNA Polymerase(5U/μl)————————100μl
2×GC buffer(含Mg2＋)—————————————1ml

活性定义：1单位(U) Long Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

贮存液：50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol

使用方法;
1. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：

成分	体积	终浓度
Template	0.1-1μg	as you wish
Primer 1(10μM)	1μl	200nM
Primer 2(10μM)	1μl	200nM
2×GC buffer	25μl	1×
dNTP Mixture(10 mM)	1μl	200μM each
Long Taq (5 U/μl)	0.5-1μl	2.5-5U
ddH2O	up to 50μl	-

2. 混匀后，离心快甩将反应液收集到管底。
3. PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
4. PCR仪上执行以下程序：

步骤	温度	时间	循环数
初始变性	94℃	1-5 min	1
变性	94℃	30 sec	25-40*
退火	Tm-5℃*	30 sec
延伸	72℃	1 min/kb
最后延伸	72℃	5 min	1

注：PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·Western湿转转膜液
编号：RFT080
英文名称：Western wet membrane fluid
规格：10×1L
本Western转膜液是一种安全无毒的转膜液，没有使用剧毒的甲醇，也没有使用其它的有毒试剂。本Western转膜液配制便捷，无需调节pH值，用于Western时湿法电转膜。本Western转膜液可以回收，回收后可以再使用2-3次。

使用方法：
1、取一袋可以配制1升Western转膜液的粉剂，倒入到一洁净的烧杯中，加入蒸馏水到约700毫升，溶解。
2、再加入200毫升无水乙醇或210毫升95%乙醇，混匀。
3、然后在量筒中用蒸馏水定容到1升。混匀后即可使用。没有用完的转膜液可室温保存，通常两周内使用没有任何问题。当转膜液颜色变为浅棕色或黄褐色时，应该丢弃。

储存条件：室温，有效期2年。

·1kb DNA ladder(1000～10000bp)
编号：RFT003
英文名称：Western wet membrane fluid
规格：100T(2×250μl)
本产品是由8条带状双链DNA条带组成的即用型DNA Ladder，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。条带分为1000，2000，3000，4000，5000，6000，8000，10000bp。其中4000bp条带为100ng/5μl，其余条带浓度50ng/5μl。



使用方法：
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl，如果加样孔宽于5mm，可以适当增加上样量)就行电泳。
2. 建议电泳条件：凝胶浓度为1.0％，凝胶长度5-7cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间30-35分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。

注意事项：
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。

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