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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
阴凉干燥
- 保质期:
长期
- 英文名:
Giemsa Stain Solution
- 库存:
993
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括吉姆萨染色液优惠价在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:吉姆萨染色液优惠价
编号:RFT200
品牌:百奥莱博
英文名:Giemsa Stain Solution
规格:100ml
本品以进口的吉姆萨色素、甲醇为主要原料,含特有衬染剂,经研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。吉姆萨染色液由吉姆萨贮存液(10×)和磷酸盐缓冲液组成,10×贮存液可以单独使用,也可以1:9混合成工作液后使用。
吉姆萨色素是由天青Ⅱ与伊红混合而成。吉姆萨染色原理和结果与瑞氏染色基本相同,吉姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对细胞核着色偏深,核结构显色不佳,故吉姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。
一、一步法涂片染色
1、吉姆萨工作液的配制:
按吉姆萨贮存液(10×):磷酸盐缓冲液=1:9混合,即取1份吉姆萨储存液(10×)加入到9份的磷酸盐缓冲液中充分混匀,即为吉姆萨工作液,该工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。
2、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1-3分钟。
3、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加吉姆萨工作液覆盖涂片,室温滴染。
4、用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。
5、干燥、镜检。
6、染色结果:
嗜酸性颗粒————粉红色;
嗜碱性颗粒————紫蓝色;
中性颗粒—————淡紫色
二、两步法涂片染色
1、吉姆萨工作液的配制:
按吉姆萨贮存液(10×):蒸馏水=1:4混合,即取1份的吉姆萨贮存液(10×)加入到4份的蒸馏水中充分混匀,即为吉姆萨工作液。吉姆萨工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。
2、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定。
3、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加适量吉姆萨工作液覆盖涂片,室温滴染。
4、加入等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动载玻片,室温静置。
5、用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。
6、干燥、镜检。
7、染色结果:
嗜酸性颗粒————粉红色;
嗜碱性颗粒————紫蓝色;
中性颗粒—————淡紫色
注意事项:
1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,以免影响染色效果。
2、涂片染色中吉姆萨染色后,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。
3、如果染色过深或过浅,应调整染色时间或工作液浓度。
4、涂片染色和组织切片染色中,pH值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,以免影响染色效果。
5、吉姆萨组织切片染色中,无水乙醇脱水要迅速,否则切片易褪色。
6、染色液可重复使用,但不能多次重复,若有沉淀物应过滤后使用。
储存条件:室温。
关于吉姆萨染色液优惠价的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
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吉姆萨染色液优惠价关键词:吉姆萨染色液,Giemsa Stain Solution,RFT200
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吉姆萨染色液优惠价关键词:吉姆萨染色液,Giemsa Stain Solution,RFT200
·Western及IP细胞裂解液
编号:RFT157
英文名称:Cell lysis buffer for Western and IP
规格:100ml
本产品是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液。本细胞裂解液裂解的细胞,可以用于PAGE,Western,免疫沉淀和免疫共沉淀。Western及IP细胞裂解液的主要成分为20mMTris (pH7.5),150mMNaCl,1% Triton X-100,以及sodiu*(代"m") pyrophosphate,β-glycerophosphate,EDTA,Na3VO4,leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。用Western及IP细胞裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
使用方法:
对于培养细胞样品:
1、融解Western及IP细胞裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2.1、对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
2.2、对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。
3、充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入100微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150微升或200微升。
对于组织样品:
1、把组织剪切成细小的碎片。
2、融解Western及IP细胞裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3、按照每20毫克组织加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4、用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5、充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6、如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
注意事项:
1、为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2、需自备PMSF。
3、裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
北京百莱博科技有限公司专业生产细胞组织染色产品,欢迎来电咨询选购吉姆萨染色液优惠价。
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文献和实验6. 用甲醇固定,吉姆萨染色。 离心法: 1. 需使用离心涂片机将细胞悬液的细胞直接离心沉淀在载玻片上,使细胞的离心沉淀和涂片同时进行; 2. 制备细胞悬液,细胞悬液中用含有少量蛋白质,并将细胞浓度调至106 个/ml; 3. 将滤纸片孔对准出孔,然后插入机头凹槽内,用弹簧片顶紧,使滤纸片夹于标本室的出孔与载玻片之间; 4. 离心标本必须对称放置,保持平衡。然后吸取细胞悬液0.1—0.2ml迅速滴入标本室入口,以1000r
器皿内的培养液,用平衡盐溶液反复漂洗单层培养物2次; 2. 加入平衡盐溶液,再逐滴加入等体积甲醇,边加边混合,静置10min; 3. 将50%甲醇-BSS混合液丢弃,加入新鲜的甲醇液浸泡固定细胞10min,然后用甲醇漂洗细胞1次; 4. 将瓶内细胞干燥后储存或直接染色; 5. 按2ml/cm2 的比例滴加吉姆萨染液,覆盖细胞层,染色2min; 6. 移除染液,用自来水冲洗掉粉红色背景后,再用去离子水冲洗细胞;
相关专题 细胞染色常用方法 细胞染色常用方法主要包括以下几个即:1.简单染色法,常用碱性染料如美蓝等进行简单染色;2.革兰氏染色法,主要包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或丙酮)脱色以及番红复染四个过程;3.瑞氏染色法,瑞氏染料溶剂主要是由伊红美蓝组成;4.吉姆萨染色法,吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同;6.细胞免疫荧光染色法,免疫荧光染色的主要原理是利用抗原 抗体之间的特异性结合。 十五种细胞染色试剂 1、 酸性
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