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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
Reverse Transcriptase M-MLV(RNase H-)
- 库存:
835
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括M-MLV反转录酶(RNase H-)特价优惠在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:M-MLV反转录酶(RNase H-)特价优惠
规格:2000U
编号:RFT104
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
M-MLV反转录酶(RNase H-),是一种经过改造和优化的反转录酶。和普通的M-MLV反转录酶相比,缺失了Ribonuclease H (RNase H)酶活性,不能够选择性剪切RNA和DNA杂合双链中的RNA,可以合成长片段从DNA。本产品中M-MLV反转录酶(RNase H-)的浓度为200U/μl,用于体积为20微升的反转录体系时足够进行10次反转录反应。该反转录酶(RNase H-)由大肠杆菌表达。
M-MLV反转录酶(RNase H-)可以合成长达9-13kb的cDNA。该反转录酶的最适反应温度为42-45℃并且在55℃时仍然有很高活性,可以避免普通的M-MLV反转录酶(RNase H-)在37℃反应时的一些不足。
M-MLV反转录酶(RNase H-)常用于在获得总RNA或mRNA后cDNA第一条链的合成。合成的cDNA第一条链后续可以用于PCR、real-time PCR、cDNA第二条链的合成等。
产品组分:
M-MLV(200U/μl)——————2000U
5×RT buffer———————0.2ml
质量控制:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶,可以满足常规反转录合成cDNA第一条链等的需要。
贮存液:50 mMTris, pH 8.3,100mMNaCl,1 mMEDTA,5 mMDTT, 0.1% Triton X-100 and 50% glycerol。
5×RT buffer:250 mMTris, pH 8.3 at25℃,250 mMKCl,20 mMMgCl2,50 mMDTT。
失活或抑制:70℃孵育10分钟可以导致M-MLV反转录酶(RNase H-)失活;EDTA、EGTA等螯合剂、无机磷酸盐或焦磷酸盐以及聚*(polyamine)对该反转录酶(RNase H-)有抑制作用。
储存条件:-20℃。
更多有关M-MLV反转录酶(RNase H-)特价优惠的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·BCA蛋白浓度试剂盒
编号:RFT057
英文名称:BCA Protein Assay Kit
规格:500次
BCA蛋白浓度测定试剂盒的原理是蛋白质分子中肽键结构在碱性环境下能与Cu2+生产络合物,并将Cu2+还原成Cu+,而BCA试剂可以特异性地与Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物,并在562nm处有最大的光吸收值,该复合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可以根据吸收值的大小来测定蛋白的含量。本试剂盒可以检测500个样品(使用微孔板)或50个样品(使用试管)。
试剂盒组成:
| 组份 | 包装 | 贮存方式 |
| BCA试剂A | 100 ml | RT |
| BCA试剂B | 3 ml | RT |
| 牛血清白蛋白(BSA)标准溶液(5 mg/ml) | 2×1 ml | -20℃ |
| PBS溶液 | 10 ml | 4℃ |
| 说明书 | 1份 |
产品特点:
1、灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml(在20-1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系),最小检测蛋白量达到0.2μg,待测样品体积为1-20μl。
2、BCA法测定蛋白浓度的最大优点是蛋白浓度的测定可以耐受高浓度的去垢剂,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20, 60, 80。但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,二硫苏糖醇低于1mM,β-巯基乙醇低于0.01%。
储存条件:室温,有效期12个月。
M-MLV反转录酶(RNase H-)特价优惠关键词:M-MLV反转录酶,M-MLV反转录酶(RNase H-),RFT104,Reverse Transcriptase M-MLV(RNase H-)
·GelHong红色核酸凝胶染料
编号:RFT153
英文名称:GelHong Red nucleic acid gel dye
规格:500μl
本品是一种可以替代*化乙锭(EB)的红色荧光核酸染色剂。与SYBR或EB相比,本红色核酸染料最显著的特性是其在多种条件下的高灵敏性和稳定性。另外相对EB或SYBR,GelHong诱导突变的能力极低。
使用方法:
注意:染料使用前应在室温下彻底融化混匀后使用。
1、GelHong预染方法
1.1、将GelHong试剂按1:10000溶于琼脂糖凝胶溶液中,充分混匀。(例如:将5μl GelHong 试剂加入到50ml 凝胶溶液中)。注:由于GelHong 具有出色的热稳定性,可将试剂直接加入高温的凝胶溶液中,而不用等凝胶溶液冷却后再加入。
1.2、浇制凝胶并使其凝固后上样电泳。
注意:使用这种预先加入染色剂的琼脂糖凝胶,每次不易加入太多的 DNA 样品,否则容易造成饱和现象,可以做多个不同浓度的 DNA Marker,以确定最佳 DNA 上样量。
1.3、紫外下观察结果。
注:如果始终出现拖尾或是条带无法分离的现象,您可以使用后染法对DNA染色,以确认问题是否与染色剂有关。如果使用后染法问题依旧存在,则说明问题与染色剂无关,请尝试减少核酸的上样量后进行电泳。
2、GelHong后染方法
2.1、用H2O将GelHong稀释约3,300倍到0.1M Nacl中,制成3X染色溶液。(例如:将15μl GelHong和5ml的1M NaCl加入到45ml H2O中)。注:GelHong 1X染色溶液同样可用于后染,但其灵敏度要低于3X染色溶液。
2.2、将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙*(代"烯")容器中。缓慢加入足量的3X染色溶液浸没凝胶。
2.3、在室温下轻轻地摇动凝胶板,最佳的染胶时间为30 分钟,这取决于凝胶板的厚度、琼脂糖或聚丙*(代"烯")酰胺的浓度和 DNA 的长短。凝胶越厚或琼脂糖的浓度越高,染色所需要的时间就越长。注:染色溶液至少可重复使用2-3次。如果不是立即再用的话,建议将用过的染色溶液冷藏保存。
2.4、紫外下观察结果。
储存条件:4℃避光,有效期3年。
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·DNA Marker VII(300~2500bp)
编号:RFT024
规格:100T(2×250μl)
本产品是由6条带状双链DNA条带组成的DNA Marker,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。6个条带大小包括300bp,500bp,1000bp,1500bp,2000bp,2500bp。其中1500bp条带约为100ng/5μl,显示加亮带,其余条带浓度大约50ng/5μl。该Marker适用于DNA片段大小的确定和对DNA含量的粗略定量,不适用于DNA片段含量的精确定量。
使用方法:
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl,如果加样孔宽于5mm,可以适当增加上样量)就行电泳。
2. 建议电泳条件:凝胶浓度为1.0%,凝胶长度5-7cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间20-25分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注意事项:
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
北京百莱博科技有限公司专业生产核酸扩增(PCR)产品,欢迎来电咨询选购M-MLV反转录酶(RNase H-)特价优惠。
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文献和实验50µl M-MLV Reverse Transcriptase (b) (200U/µl) 4000U 10000U RNase-free ddH2 O 1ml
一、 Riboclone M-MLV(H- ) cDNA合成技术 Promega公司的RibocloneR M-MLV(H- ) cDNA合成系统采用M-MLV反转录酶的RNase H缺失突变株取代AMV反转录酶,使合成的cDNA更长。该系统的第一链合成使用M-MLV反转录酶,cDNA第二链合成采用置换合成法,采用RNaseH和DNA聚合酶Ⅰ进行置换合成,最后用T4 DNA聚合酶切去单链末端,方法简便易行。该系统试剂
如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
: 1) 第一代是AMV,它来源于禽成髓细胞瘤病毒,由于其两个游离肽键的特性,其反转录性能可以达到50-60%,但是,其具有RNase H活性,能够降解反转录反应中模板RNA,当进行较长片段的反转录时,就会造成cDNA的信息不完整。 2) 第二代是M-MLV,来源于Moloney鼠白血病病毒,它大大降低了RNase H的活性,但仅有一个游离肽键,所以反转录效率仅为30-40%,需要较大量的RNA模板,这样,与高丰度RNA的竞争会导致低丰度RNA的反转录效率更低
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