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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
SDS-PAGE gel preparation and electrophoresis Kit
- 库存:
838
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖SDS-PAGE凝胶制备及电泳试剂盒怎么卖在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:SDS-PAGE凝胶制备及电泳试剂盒怎么卖
品牌:百奥莱博
规格:50次
产地:国产|进口
编号:RFT076
英文名:SDS-PAGE gel preparation and electrophoresis Kit
本公司提供的SDS-PAGE蛋白电泳试剂盒包含凝胶制备以及蛋白电泳所需的全部试剂。本试剂盒可配制至少50块常规大小的PAGE胶。
试剂盒组成:
| 组份 | 规格 | 保存条件 |
| 40%PAA(29:1) | 100 ml | 4℃ |
| 4×Tris/SDS分离胶缓冲液 pH8.8 | 100 ml | 4℃ |
| 4×Tris/SDS浓缩胶缓冲液 pH6.8 | 50 ml | 4℃ |
| APS(干粉) | 0.5 g | RT |
| TEMED | 0.5ml | 4℃,避光 |
| 4×蛋白电泳上样缓冲液(含还原剂) | 1 ml | -20℃ |
| 5×Tris-甘*酸电泳缓冲液(干粉) | 1 L | RT |
使用方法:
一、配制分离胶(各试剂使用量请参考表二)
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度(表一),再按照下面的分离胶配方表(表二)配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。
表一:不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围:
| SDS-PAGE分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 6% | 50-150kD |
| 8% | 30-90kD |
| 10% | 20-80kD |
| 12% | 12-60kD |
| 15% | 10-40kD |
配制分离胶前,根据以下配方准备10% APS:
10% APS配制-5 ml:将0.5 gAPS干粉溶于5 ml灭菌水中,彻底溶解后分装,1 ml/支,-20℃备存,每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间,以防失效。10%APS在4℃有效期为一周,-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10%APS。
制备分离胶步骤:
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
2、按照表二将不同体积的成分在小烧杯或试管中混合;加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
3、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
4、静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,说明凝胶已聚合
表二:SDS-PAGE分离胶配方表
| 组份 | 不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml) | |||
| 5ml | 10ml | 15ml | 20ml | |
| 8%胶 | ||||
| H2O | 2.7 | 5.4 | 8.1 | 10.8 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1 | 2 | 3 | 4 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
| 10%胶 | ||||
| H2O | 2.45 | 4.9 | 7.35 | 9.8 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
| 12%胶 | ||||
| H2O | 2.2 | 4.4 | 6.6 | 8.8 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1.5 | 3 | 4.5 | 6 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
| 15%胶 | ||||
| H2O | 1.825 | 3.65 | 5.475 | 7.3 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1.875 | 3.75 | 5.625 | 7.5 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
二、浓缩胶制备:
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、按照表三将不同体积成分在一个小烧杯或试管中混合;加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
3、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
4、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
5、静置30-60分钟,等待浓缩胶聚合。
表三:SDS-PAGE浓缩胶(4%)配方表
| 组份 | 不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml) | |||
| 2 ml | 4 ml | 5 ml | 10 ml | |
| H2O | 1.17 | 2.34 | 2.925 | 5.85 |
| 4×Tris/SDS浓缩胶buffer pH6.8 | 0.63 | 1.26 | 1.575 | 3.15 |
| 40% PAA(29:1) | 0.2 | 0.4 | 0.5 | 1 |
| TEMED | 0.002 | 0.004 | 0.005 | 0.01 |
| 10% APS | 0.02 | 0.04 | 0.05 | 0.1 |
三、电泳:
凝胶凝固好后,根据以下配方准备电泳缓冲液。
5×Tris-甘*酸电泳缓冲液的配制-1 L:将一包5×Tris-甘*酸电泳缓冲液干粉全部倒入1L烧杯中,加入约900 ml水彻底溶解,用水定容至1 L,即配成5×Tris-甘*酸电泳缓冲液(此溶液不用调节pH值)。用前再稀释5倍即配成1×Tris-甘*酸电泳缓冲液。在电泳槽的内槽内加入1×Tris-甘*酸电泳缓冲液(让电泳缓冲液漫过加样孔),轻轻的拨出梳子,随后在电泳槽外槽加入适量的1×Tris-甘*酸电泳缓冲液。上样,电泳,一般是浓缩胶80V,分离胶120V恒压,等指示前沿*酚兰电泳到分离胶下缘后,结束电泳,染色或者进行下一步实验。
想要了解更多关于SDS-PAGE凝胶制备及电泳试剂盒怎么卖的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·T4连接酶
编号:RFT168
英文名称:T4 DNA ligase
规格:100U
本T4 DNA Ligase是从表达T4 DNA Ligase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化而来的,催化相邻DNA链的5’磷酸基团和3’羟基基团以磷酸二酯键结合反应。该酶可催化平末端或粘性末端DNA之间的连接,还可修复双链DNA、RNA、DNA/RNA杂交双链中的单链切口。本品可应用于DNA插入片段和载体DNA的粘性末端和平末端的连接,以及线性DNA的自身环化。
产品组分:
T4 DNA ligase (5U/μl)————————100 U (20μl)
10×T4 DNA Ligation Buffer——————0.2 ml
50%PEG Solution————————————0.15 ml
活性定义:此酶的活力单位为Weiss Unit。1个Weiss Unit相当于约200个粘性末端连接单位(cohesive-end ligation unit, CEU)。1个CEU单位定义为在20μl的连接反应体系中,在16℃30分钟内,能使50%的经HindIII消化的λDNA片段连接所需的酶量。
注意事项:
1、T4 DNA Ligase的最终用量不要超过推荐的用量,否则影响连接效率。
2、PEG可以极大提高平末端的连接效率,我们推荐加入终浓度为5% PEG Solution以提高平末端的连接效率。
3、为了提高转化效率,转化时建议所加入连接产物的量不要超过感受态细胞体积的10%。
4、由于T4 DNA Ligase中含有甘油,比较粘稠容易挂壁,建议使用前短暂离心将液体收集到管底,取样时枪头尽量不要深入液面太深以免粘在枪头上造成损失。
储存条件:-20℃。
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·卡那霉素硫*(代"酸")盐溶液
编号:RFT179
英文名称:Kanamycine H2SO4 Solution
规格:5×1ml
卡那霉素是一种从Streptomyces kanamyceticus中分离出来的*基糖酐类抗生素。在分子生物学中,卡那霉素常被作为一种蛋白质合成的抑制剂,用于筛选具有卡那霉素抗性基因的克隆。临床上,卡那霉素用于治疗多种细菌的感染,如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、结核杆菌等。卡那霉素硫*(代"酸")盐溶液(Kanamycine H2SO4 Solution(10mg/ml)由卡那霉素硫*(代"酸")盐溶于水组成,经0.22μm过滤除菌,可以直接添加到培养基中。一般工作浓度为10~50μg/ml,其中严紧型质粒常采用10 μg/ml,松弛型质粒常采用50μg/ml。
使用方法:
根据实验具体要求操作,一般卡那霉素在LB中终浓度为10~50μg/ml。可以大体按照1/1000 LB体积加入10mg/ml Kanamycin溶液,如100ml LB中加入100μl 卡那霉素硫*(代"酸")盐溶液。
注意事项:
1、尽注意无菌操作,避免污染。
2、避免反复冻融。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃避光,有效期6个月。
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磷酸三* COA 22763-03-7
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ARB14263 兔子饥饿素(ghrelin)ELISA代测服务
2,4,6-三甲基*甲酰二*氧磷 Phenylfluorone 75980-60-8
卵白素(鸡蛋) B9 1405-69-2
BL0975 兔外周血淋巴细胞分离液
Hoechst33258染色液(含封片剂) 10ml
PY02-219 乙基紫叠氮*肉汤基础 250克
ARB11128 人肺耐药蛋白(LRP)酶标法分析 Human lung resistance-related protein,lrp ELISA KIT
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N-乙酰-L-脯*酸 Ni Sepharose 6 Fast Flow 68-95-1
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整理了一下2006年1月份蛋白版的无人应助贴,以支持版主的工作. 这个月可能很多高手回家了,感觉无人应助贴比较多啊!希望大家积极应助啊! 已被锁、被扣分、标题为空以及不符合发贴格式的无人应助贴不在此列 应助战友请到积分申诉区给出链接,谢谢 [求助]尿蛋白电泳 SDS-PAGE技术 http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5252925&sty=1&tpg=46&age=0 [求助]如何研究作用在某启动子的反式作用因子
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