- ¥300
- 江蓝纯
- PR1900
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Prestained Protein Marker(3.3kD-31.0kD)
- 库存：
99
- 供应商：
江蓝纯
- 规格：
20T
产品简介
本产品包含预染的3种多肽和2种低分子量蛋白质组成，分子量范围为3. 3kD-31. 0kD。可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot的转膜效果。经Tricine-甘油SDS-PAGE凝胶电泳时以及转移到PVDF或NC膜上可看到清晰的5条蓝色的蛋白条带。本品为蛋白质和多肽混合物的冻干粉，每种预染蛋白含量约为40μg，配有一支1×上样缓冲液。
使用说明:
1. 开封后，溶于200 μ1 1×上样缓冲液，可根据需要进行小量分装，每管10 μl，-20℃贮存，每次取一管使用，避免反复冻融。
2. 使用前取分装后的小管室温融化后即可上样电泳。
示意图：
凝胶制备及染色注意事项:
1. 先配制分离胶，聚合后再配制夹层胶，后配制浓缩胶，3种胶的制胶体积比为4:1.5:1。电泳时，30V跑1-2h后，待指示前沿到达分离胶上沿时，把电压调至100V，至电泳结束，整个电泳过程大约需要6-8h。
2. 电泳之后可将胶置于固定液中固定20min，再进行染色，能得到较的蛋白条带；如时间不允许，也可不进行固定直接染色。如果使用配方7进行染色时效果不或考虑其毒性，请选择本公司的考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液(货号:P1300)，该产品具有染色快，无毒，灵敏性高等特点，是常规染色液的替代品。
3. 由于多肽所含的氨基酸数目较少，因此如该多肽含有过多的极性氨基酸(碱性或酸性)，则会影响其在SDS-PAGE图上的条带迁移率，即其表观分子量可能和多肽的氨基酸理论推算分子量有一定距离。
4. 由于SDS-PAGE的图谱上，蛋白质对数分子量和迁移率成正比直线关系的分子量范围为15,000-200,000，因此对于分子量小于10000的蛋白质或多肽的分子量，只能根据标准分子量进行估计，推断其是否落入预测的分子量范围。
5. 由于超低分子量多肽（3000及3000以下），极易从凝胶上浸出，因此染色及脱色时间不宜太长，脱色后凝胶也不宜在水中浸泡保存过久，否则条带会消失。
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文献和实验相关专题 蛋白Marker可分为：一、未预染的Marker即宽分子 量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Marker即单色预染和多色预染。 在western blot 过程中，分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节，然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个 Western Blot参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小，只有标准量
蛋白质印迹（Western blotting）方法原理和优化
或重组的纯化蛋白混合物组成。在凝胶或膜上显示其位置需要染色步骤。预染标准允许在电泳过程中监测蛋白分离，也可以在随后的印迹步骤中指示转移效率。然而，它们比较昂贵且加入染料会影响蛋白迁移率。预染标准在确定分子量时可能 不够精确，并且蛋白质上附加的染料在转移时会影响它们吸附到膜上的能力。 聚丙烯酰胺浓度 凝胶中聚丙烯酰胺浓度可以是均一浓度或是梯度浓度。最常见的聚丙烯酰胺浓度为10%，最适合分离10-150KD范围内的蛋白质。若要分析未知蛋白或许要更宽的分离范围，推荐使用梯度
子量蛋白标准 通常在检测大分子量蛋白经常使用到高分子量蛋白标准， ③ 低分子量蛋白标准 在一般的蛋白电泳当中，更常用的是低蛋白标准分子量，除了有指示蛋白大小的作用以外，有时还可以用作粗略的定量。实验室用在一般蛋白电泳的低分子量蛋白标准中。 在低分子量蛋白标准这里还包括可特别小的蛋白标准，比如30kD以下蛋白或者多肽的分离辨别。其中GE的从2kD到16kD之间有6条带的蛋白标准挺不错，另外提醒一句，特别小的蛋白Marker条带如果要显色
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