北京BalbMulti多重PCR Mix厂家

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名称：北京BalbMulti多重PCR Mix厂家
规格：1ml|5ml
编号：WE0117
产地：国产|进口
英文名：BalbMulti PCR Mix
  BalbMulti PCR Mix浓度为2×，是由BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系。使用本产品无需进行繁杂的PCR反应条件的优化过程，只需进行简单的条件摸索即可轻松进行多重 PCR反应。本品中所含的BaldStar Taq DNA Polymerase是经化学修饰的热启动酶，可以有效减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异扩增。此酶与能提高反应特异性的PCR增强剂以及独特的缓冲体系相配合，使反应体系中所有的引物都能有效延伸，无需额外优化。此MasterMix中还包含GC Enhancer，有助于实现“困难”模板(比如高GC含量的模板)的高效扩增。BalbMulti PCR Mix适用于各种类型的多重PCR反应，比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。

产品组成：

 

组份	1ml	5ml
2×BalbMulti PCR Mix	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

质量控制：
1、经检验无外源核酸酶活性；
2、PCR方法检测无宿主残余DNA；
3、2～8℃存放三个月，活性无明显改变。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BalbMulti PCR Mix	25μl	1×
Primer Mix，10μM each	1μl	0.2μM
Template DNA	适量
ddH2O	up to 50μl

注意：引物设计时，尽量减小各引物的Tm间的差值，差值尽量控制在5℃以内。各引物浓度请以终浓度0.05-0.2μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性扩增时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10min
变性	95℃	30s	30-40个循环
退火	55-65℃	30s
延伸	72℃	1kb/min
终延伸	72℃	5min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所包含的BaldStar DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4)本产品在预变性95℃，10 min条件下实现酶的活化。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

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·柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液，100×)
编号：WE0318
英文名称：Citrate Buffer(100×)
规格：100ml
  福尔马林固定时，组织中的许多*基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。因此，对于石蜡切片，要求在进行IHC染色前，先进行抗原修复，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，恢复抗原的原有空间形态。本抗原修复液适合于大多数的抗原，用该修复液修复后阳性染色明显增强，抗原定位理想。

注意事项：
1、请使用足量的修复液，修复过程中保证组织切片完全浸没在修复液中。
2、使用沸水浴或高压修复时，操作请务必谨慎，尤其高压修复时，保证锅内有足量的修复液，以防止干烧。
3、推荐的修复时间为达到理想修复效果所需时间，如组织粘片不牢，容易掉片，请酌情减少修复时间。

操作步骤：

1、高压热修复：根据需要量，取适量本品，稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将稀释好的修复液加入高压锅内，将待修复切片浸于其中，保证修复液没过组织(最好将切片浸入盛修复液的塑料容器内，再置于锅内修复液浴中)，盖上压力锅盖，加热至均匀喷汽，从喷汽开始计时，1~2 分钟后压力锅离开热源，自然冷却至室温，取出切片，蒸馏水冲洗后，再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次，每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度最大，是最常用的热修复法。

2、微波热修复：根据需要量，取适量本品，稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将切片放入盛有修复液的容器中，置微波炉内加热至沸腾，停止加热，使容器内液体温度下降保持在 95℃~98℃之间并持续 10~15分钟(注意：请根据具体机型酌情设置条件，务必满足以上步骤中对温度和时间的要求)。取出容器，自然冷却至室温，取出切片，蒸馏水冲洗后，再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次，每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度大于沸水浴，但小于高压修复。

3、沸水浴热修复：根据需要量，取适量本品，稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将待修复切片完全浸入盛有修复液的容器中，并将此容器置于盛去离子水的大器皿水浴中，电炉上加热煮沸，从修复液的温度到达95℃起开始计时15~20分钟。让切片在修复液中自然冷却至室温，蒸馏水冲洗，再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次，每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。该方法效果较微波和高压修复差。

储存条件：2～8℃


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·抗c-Myc标签单克隆抗体
编号：WE0332
英文名称：Anti c-Myc Mouse Monoclonal Antibody
规格：100μl
该抗体可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的c-Myc标签，而不受邻近*基酸组成的影响，可用于检测各种表达载体表达的c-Myc-Tag融合蛋白。

抗体类型：鼠单克隆抗体IgG1
免疫原：人工合成第410-419位多肽序列(EQKLISEEDL)
应用范围：WB(1：500-5000)、ELISA(1：200-20000)

·IHC复染试剂(改良型苏木素)
编号：WE0322
英文名称：Improved-Hematoxylin
规格：10ml
  苏木精是一种碱性染料，它被氧化后生成氧化苏木精即苏木素后，可将细胞核和细胞内核糖体等嗜碱性结构染成蓝紫色，是常用的细胞核复染试剂。本产品是经改良的Mayer’s苏木素，不含酒精，可用于免疫组化DAB或AEC显色后的细胞核复染。其染色强度适中，一般不需要进行分化处理。复染后核着色鲜亮，背景清晰。

注意事项：
1、操作时应佩戴手套。
2、如核染色过深，可用1%盐*(代"酸")酒精分化适当液分化后，再用PBS或去离子水浸泡切 片3-5分钟，使胞核返蓝。
3、为得到最佳实验结果，请根据实验具体需求，调整试剂用量。

操作步骤：
1、免疫组化常规操作完成后，DAB或AEC显色(HRP系统)。
2、显色强度合适时，用自来水冲洗终止显色。
3、甩去样品上的自来水，滴加适量改良型苏木素以覆盖整个组织，复染30秒至3分钟。
4、用自来水完全冲洗掉复染液，PBS或去离子水浸泡切片3-5分钟，使胞核返蓝。
5、脱水、透明、封片。

实验图例：

乳腺癌 CK19 胞浆阳性使用DAB显示试剂盒(WE0323)显色，改良型苏木素(WE0322)复染，结果图

储存条件：室温


北京BalbMulti多重PCR Mix厂家关键词：BalbMulti PCR Mix,BalbMulti多重PCR Mix,WE0117

组蛋白提取试剂盒 histone extraction kit  50T|100T
ARB13850 猪内皮素1(ET-1)免费代测 Porcine endothelin 1,et-1 ELISA KIT
BL1231 1M Hepes溶液(Free Acid,无菌) 
乙型肝炎病毒染色液(Gomori醛品红法)   4×50ml
PY08-032  乳糖胆盐发酵管(单料带导管) 10ml  10支/盒，用于大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的测定
L-色*酸甲酯盐*(代"酸")盐 PHA 7524-52-9
三盐*(代"酸")亚精胺 DNA 334-50-9
PY08-001  营养琼脂平板 9CM  10皿/盒，用于细菌总数测定，该培养基不含糖，也可用于菌种的保存、传代及纯培养。
ARB10653 人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪*酸激酶2(TIe-2)ELISA代测服务 Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and egf-like domains 2,tie-2 ELISA KIT
ARB10946 人谷*酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)检测服务 Human glutamic acid decarboxylase autoantibody,gad-ab ELISA KIT
ARB13960 猪圆环病毒(PCV)代做ELISA实验 
DP439 石蜡包埋总RNA提取试剂盒
ARB11314 人促胰液素/分泌素受体(SR)Elisa方法检测 Human secretin receptor,sr ELISA KIT
ARB14257 猪补体4(C4)代做ELISA实验 

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