BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+U

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BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(低含量ROX校正染料)说明书的品牌：百奥莱博，是优质的核酸扩增(PCR)产品，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(低含量ROX校正染料)等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。

名称：BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(低含量ROX校正染料)说明书
产地：国产|进口
英文名：BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG)(Low ROX)
编号：WE0155
规格：5ml
  本品是专用于探针法(TaqMan，Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×，包含 BaldStar Taq DNA polymerase、PCR Buffer、dNTPs(dTTP全部被dUTP所取代)、UNG酶和Mg2+，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列的检测，如基因表达分析，拷贝数分析，SNP基因型分析等。本产品中运用了dUTP-UNG防污染系统，在PCR反应体系配制过程中加入了dUTP，因此就形成了含有dU碱基的扩增产物。而此产物可以在下次进行PCR反应前，由PCR体系中的UNG酶处理消除。这样就有效的去除了PCR产物的残留污染，大大降低了由于扩增产物污染而导致的假阳性。UNG酶在PCR循环中的预变性步骤即可被灭活，因此不会影响新的含dU碱基PCR产物的形成。本品含有的 BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的 PCR缓冲体系与热启动酶的组合，显著提高了PCR的扩增效率，荧光信号更强，灵敏度更高，可以检测单拷贝的模板。使用本产品可以得到更广的线性范围，对目的基因定量更准确。

  ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0154)：
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0155)：
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0156)：
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。

产品组成：

 

组份	WE0154-5ml	WE0155-5ml	WE0156-5ml
2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG)	5×1ml	5×1ml	5×1ml
50×Low ROX	-	200μl	-
50×High ROX	-	-	200μl
ddH2O	5×1ml	5×1ml	5×1ml

注意事项：
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃，避光。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。


使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Probe，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
50×Low ROX or High ROX(可选)	1μl	1×
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度，与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同，根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。

2、PCR反应程序
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！

两步法PCR：

步骤	温度	时间	循环数
UNG酶消化	37℃/50℃	2-10 min
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	15 s	35-40个循环
退火/延伸	60℃	1 min

注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增。

三步法PCR：

步骤	温度	时间	循环数
UNG酶消化	37℃/50℃	2-10 min
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	15 s	35-40个循环
退火	55℃-65℃	30s
延伸	72℃	30s

储存条件：-20℃，避免反复冻融

想要了解更多关于BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(低含量ROX校正染料)说明书的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：

·二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer1-12)
编号：WE0241
英文名称：NGS Multiplex Oligos for Illumina(Index Primers Set I)
规格：24次|96次
  本试剂盒提供了二代测序建库中使用的adaptor与primer，专为illumina平台建库设计，index primer的设计可满足多重高通量测序时制备多个文库样本的需要，制备的文库可用于Illumina GAIIx，HiSacnSQ、HiSeq 2500/2000/1000和MiSeq sequencing等测序平台的测序。

试剂盒组成：

组份	24次	96次
Adaptor for Illumina	60μl	240μl
Universal Primer for Illumina	30μl	120μl
Index 1– 12 Primers for Illumina	12×10 μ l	12×20 μ l

自备仪器、试剂和耗材：
1、磁力架：建议使用DynaMagTM-2(货号： 12321D)。
2、DNA纯化回收试剂盒：建议使用百奥莱博磁珠法DNA纯化回收试剂盒(货号： WE0205)。
3、DNA建库试剂盒：建议使用百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(货号： WE0229)。
4、无水乙醇。
5、反应管：建议使用低吸附的PCR管与1.5ml离心管；枪头：建议使用高质量过滤枪头防止试剂盒、文库样本污染。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、Adaptor为双链结构，请勿将其置于室温温度以上，以免发生解链、影响使用。
2、Index primer开盖前请短暂离心，使液体收集到管底，以免不同引物间交叉污染。

使用流程


操作步骤：

百奥莱博二代测序多样本接头引物试剂盒使用方法请按照百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(Cat .No.WE0229)protocol进行。

Adaptor for Illumina：
5´-/5Phos/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´
5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T-3´
Universal Primer for Illumina：
5-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T -3´
Index 1–12 Primers for Illumina：

	Index Primers for Illumina	Index
Index 1 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGTGATGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	ATCACG
Index 2 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATACATCGGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	CGATGT
Index 3 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGCCTAAGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	TTAGGC
Index 4 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTGGTCAGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	TGACCA
Index 5 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCACTGTGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	ACAGTG
Index 6 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATATTGGCGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	GCCAAT
Index 7 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGATCTGGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	CAGATC
Index 8 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTCAAGTGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	ACTTGA
Index 9 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCTGATCGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	GATCAG
Index 10 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATAAGCTAGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	TAGCTT
Index 11 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGTAGCCGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	GGCTAC
Index 12 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTACAAGGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	CTTGTA

储存条件：-20℃


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PY02-202  血琼脂培养基基础  250克  
ARB12238 大鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA检测服务 Rat vascular endothelial cell growth factor c,vegf-c ELISA KIT
ARB11751 人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)Elisa方法检测 Human eosinophil cationic protein,ecp ELISA KIT
ARB10543 人半乳糖凝集素3(GAlectIn-3)酶免分析 Human galectin 3 (Galectin-3) ELISA KIT
PY02-249  DNA酶琼脂  100克  
BTN100879 过硫*(代"酸")铵 Ammonium Persulfate
CBZ-D-缬*酸 Calcium citrate tetrahydrate 1685-33-2
2869-83-2 Janus Green B 詹纳斯绿B
ARB11369 人前列腺素D合成酶(PTGDS)ELISA检测服务 Human prostaglandin d synthase,ptgds ELISA KIT
ARB10047 人ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1基元4(ADAMTS4)检测服务 Human adam metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif4,adamts4 ELISA KIT
7647-17-8 Cesium choride(CsCl)   *化铯
8-羟基喹*(代"啉") Bestatin 148-24-3
ARB10590 人血小板因子4(PF-4/CXCL4)含量检测 Human platelet factor 4,pf-4 ELISA KIT
ARB11301 人重酒石酸去甲肾上腺素(NE-B)Elisa定量检测 Human noradrenaline bitartas,ne-b ELISA KIT
ARB13828 猪Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)ELISA代测服务 Porcine collagen type Ⅲ,col Ⅲ ELISA KIT
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俾氏麦棕Y 2′-dC?HC1 10114-58-6
ARB10271 人干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)Elisa定量检测 Human interferon-inducible protein 10,ip-10 ELISA KIT
F010205 小鼠抗猴IgG抗体 Monoclonal Mouse Anti-Monkey IgG
*肽酶抑制剂盐*(代"酸")盐 2,6-Diisopropylphenol 100938-10-1
ARB12584 大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)血清中含量检测 Rat matrix metalloproteinase 1,mmp-1 ELISA KIT
酸溶血定性检测试剂盒   50T
28053-08-9 尿苷5-二磷酸葡萄糖二* UDPG
ARB10201 人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)含量测试 Human β2-microglobulin,bmg/β2-mg ELISA KIT
BL0934 RBITC标记兔抗豚鼠IgG抗体
SJ0732 猪外周血淋巴细胞分离液
PY02-136  LB肉汤  250克  
OED24K型酶制剂、抗生素发酵工业专用消泡剂 Z-DL-phenylalanine
四正丁基*化铵 4-Methoxybenzoic acid 1112-67-0
ARB13894 猪传染性胸膜肺炎抗原(PCP-Ag)血清中含量检测 
Acr-Bis(30%,29:1)   100ml|500ml|2L
DL-焦谷*酸 Bismuth citrate 149-87-1

我公司强烈推荐核酸扩增(PCR)系列产品，热情期待您的咨询选购BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(低含量ROX校正染料)说明书。