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- 百奥莱博
- 北京
- WE0213-OSH
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温(15～30℃)
- 保质期：
长期
- 英文名：
DNase I(RNase Free)
- 库存：
307
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货DNase I(不含RNase)品牌的品牌：百奥莱博，是优质的工具酶产品，用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多DNase I(不含RNase)等工具酶产品请联系我司咨询订购。
名称：北京现货DNase I(不含RNase)品牌
产地：国产|进口
规格：1000U
英文名：DNase I(RNase Free)
DNase I是一种需二价阳离子的脱氧核糖核酸内切酶，可用于降解单链或双链DNA。其原理为DNase Ⅰ水解磷酸二酯键产生带有5"-磷酸基团和3"-OH的单核苷酸或寡核苷酸。Mg2+或Mn2+都可以激活DNase I的活性，而Ca2+浓度直接影响酶的活性。Mg2+存在时可在双链DNA的每条单链上随机地产生切口；而在 Mn2+存在下可使双链DNA断裂，使DNA片段化。用于无DNA污染的RNA的制备，逆转录及体外转录等实验。
产品组成：
| 组份 | 1000U |
| DNaseⅠ(RNase Free),1 U/μl | 1ml |
| Reaction Buffer(with MgCl2),10× | 1ml |
| 200 mM EDTA | 1ml |
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、因为DNase I 经常用于需要保持RNA完整性的DNA消化实验，所以在酶制备过程中最大限度的避免了RNase污染，可以安全地用于RNA的提取，但由于该酶中不含RNase 抑制剂，提醒使用时注意防止外源RNase的污染。
2、DNase I受剪切力的影响比较大，使用前可以将离心管上下颠倒混匀，避免涡旋震荡。
3、每处理1μg RNA，DNase I用量不要超过1U。
使用说明：
1、以制备用于RT-PCR的RNA样品为例，配置10μl反应体系，如下表：
| 组分 | 体积 | 终浓度 |
| RNA | Xμl | 1μg |
| Reation Buffer(with MgCl2)，10× | 1μl | 1× |
| DNaseⅠ(RNase Free) | 1μl | 1 U |
| RNase Free Water | Yμl | 补足至10μl |
2、37℃孵育30分钟。
3、加入1μl 200 mM EDTA，65℃孵育10分钟，使DNase Ⅰ失活，终止反应。
4、处理后的RNA可用于RT-PCR。
储存条件：室温(15～30℃)
北京现货DNase I(不含RNase)品牌极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
·X光暗盒(12.7cm×17.8cm)
编号：WE0301
英文名称：X-Ray Cassette(12.7 cm×17.8 cm)
规格：一套
·快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(低含量ROX校正染料)
编号：WE0152
英文名称：Fast TaqMan Mixture(Low ROX)
规格：5ml
本品是专用于探针法(TaqMan，Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×,包含Fast Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+等，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列检测。本品含有的Fast Taq DNA Polymerase，能有效减少在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活仅需在95℃孵育30s。整个PCR反应过程比普通反应可节省约40分钟，大大缩短了PCR的反应时间。独特的PCR缓冲体系与快速热启动酶的组合，有效抑制了非特异产物的产生，并显著提高了PCR的扩增效率，荧光信号更强，灵敏度更高，线性范围更宽。该产品适用范围广，可用于普通和快速定量PCR程序。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0151)：
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0152)：
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0153)：
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。
试剂盒组成：
| 组份 | WE0151-5ml | WE0152-5ml | WE0153-5ml |
| 2×Fast TaqMan Mixture | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
| 50×Low ROX | - | 200μl | - |
| 50×High ROX | - | - | 200μl |
| ddH2O | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
注意事项：
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃，避光。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。
使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×Fast TaqMan Mixture(With ROX) | 25μl | 1× |
| Forward Primer，10μM | 1μl | 0.2μM |
| Reverse Primer，10μM | 1μl | 0.2μM |
| Probe，10μM | 1μl | 0.2μM |
| Template DNA | 2μl | |
| 50×Low ROX or High ROX(可选) | 1μl | 1× |
| ddH2O | up to 50μl |
注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)所用探针的终浓度，与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同，根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。
2、PCR反应程序：
建议采用两步法PCR反应程序，本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定。
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 30 s | |
| 变性 | 95℃ | 5 s | 35-40 个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30 s |
注意：
1)本产品所采用的酶须在预变性95℃、30s条件下实现酶的活化。在此条件下，大多数模板可良好的进行解链。对GC含量高、二级结构复杂的模板，可将预变性时间延长至1-4分钟，以使起始模板充分解链。
2)建议采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
储存条件：-20℃，避免反复冻融
北京现货DNase I(不含RNase)品牌关键词：WE0213,DNase I(不含RNase),DNase I(RNase Free)
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以下操作按照天根产品 DP431 动物组织总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 动物组织（50-100 mg）2. 无水乙醇 ，β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器（DNase I 配置），移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1ml）；1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 通风橱 研磨器 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文
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