- ¥150 - 2490
- 百奥莱博
- 北京
- WE0195-GJA
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温(15～30℃)
- 保质期：
长期
- 英文名：
miRNA Purification Kit
- 库存：
439
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖北京miRNA提取试剂盒多少钱在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称：miRNA提取试剂盒
产地：国产|进口
英文名：miRNA Purification Kit
品牌：百奥莱博
规格：50次
本试剂盒专用于从各种动物组织、植物组织、细胞、血清、血浆等样本中分离纯化miRNA， 还可以提取siRNA，snRNA等其他小于200nt的小分子RNA，同时也可用于总RNA的提取。本品将酚/胍裂解技术和硅基质膜纯化技术相结合，独特的裂解液在有效抑制RNases的同时，可以通过有机抽提的方法除去细胞或组织样品中的大部分DNA和蛋白。对于一些敏感的下游实验中，如需富集miRNA可适用该试剂盒单独对miRNA进行富集。本品适用样本范围广，制备的RNA纯度高，可直接用于敏感的下游应用，如Northern Blot分析，Real-Time PCR，Microarray Analysis等。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 |
| TRIzon Reagent | 60ml |
| Buffer RWT(浓缩液) | 15ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| 吸附柱RM及收集管 | 50套 |
| 吸附柱RS及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 50个 |
保存条件：TRIzon Reagent 2～8℃避光保存，其它组分室温(15～30℃)。
自备试剂：*仿、无水乙醇(新开封或提取RNA专用)。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、预防RNase污染，应注意以下几方面：
1)使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
2)玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5 M的NaOH中浸泡10分钟，用水彻底冲洗后高压灭菌。
3)配制溶液应使用无RNase的水。
4)操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
2、提取的样品避免反复冻融，否则影响miRNA提取的量和质量。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer RWT和Buffer RW2中加入无水乙醇。
4、所有离心步骤若无特殊说明均在室温下进行，且所有操作步骤动作要迅速。
操作步骤：
方法一：miRNA富集(可直接用于敏感的下游实验)
1、样品处理
①组织：将组织在液氮中磨碎。每30-50 mg组织加1ml TRIzon Reagent，震荡混匀。样品体积不超过TRIzon Reagent体积的十分之一。
②单层培养细胞：吸去培养液，加入TRIzon Reagent，每10cm2加入1ml TRIzon Reagent(裂解液用量视培养瓶面积而定)。
③细胞悬液：离心得到细胞沉淀，弃上清。每5×106-1×107细胞加入1ml TRIzon Reagent(细胞不需洗涤)。
④血浆或血清：取200μl血浆或血清样本，加入5倍体积TRIzon Reagent，震荡混匀30秒。
2、样品中加入TRIzon Reagent后反复吹打几次，使其充分裂解。室温放置5分钟，使蛋白核酸复合物完全分离。
3、可选步骤：4℃ 12000rpm(~～13400×g)离心5分钟，取上清，转入一个新的离心管(自备)中(如样品中含较多蛋白、脂肪、多糖等，可选做此步骤)。
4、向上清中加入*仿，每使用1ml TRIzon Reagent加入200μl*仿，盖好管盖，剧烈振荡15秒，室温放置5分钟。
5、4℃ 12000rpm离心15分钟，样品分为三层：红色有机相，中间层，无色水相，将上层无色水相移到一个新的离心管(自备)中。
6、向步骤5得到的溶液中加入1/3倍体积的无水乙醇， 混匀，将得到的溶液和沉淀一起转入已装入收集管的吸附柱RM中。若一次不能将全部溶液加入吸附柱，请分多次转入。12000rpm离心30秒，离心后弃掉吸附柱RM，保留流出液。
7、向步骤6得到的溶液中加入2/3倍体积的无水乙醇，混匀。
8、将上步所得溶液和沉淀一起转入已装入收集管的吸附柱RS。若一次不能将全部溶液加入吸附柱，请分多次转入。12000rpm离心30秒，倒掉收集管中废液，将吸附柱RS重新放回收集管中。
9、向吸附柱RS中加入700μl Buffer RWT(使用前检查是否加入无水乙醇)，12000rpm离心30秒, 倒掉收集管中的废液，将吸附柱RS重新放回收集管中。
10、向吸附柱RS中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱RS重新放回收集管中。
11、重复步骤10。
12、12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱RS置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：此步骤的目的是将吸附柱RS中残留的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
13、将吸附柱RS置于一个新的无RNase离心管中，向吸附柱中间部位加入30-50μlRNase-Free Water，室温放置1分钟，12000rpm离心1分钟，收集RNA溶液，得到的RNA溶液保存在-70℃，防止降解。
注意：
1)RNase-Free Water体积不应小于30μl，体积过小影响回收率。
2)如果要提高RNA的产量，可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤13。
3)如果要提高RNA浓度，可将得到的溶液重新加入到吸附柱RS中，重复步骤13。
方法二：总RNA的提取(提取的总RNA包括miRNA等其他<200 nt的小分子RNA)
1~5步骤同方法一。
6、向步骤5得到的溶液中加入1.25倍体积的无水乙醇，混匀。
7、将上步所得到的溶液和沉淀一起转入已装入收集管的吸附柱中。若一次不能将全部溶液加入吸附柱RM中，请分多次转入。12000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱RM重新放回收集管中。
8、向吸附柱RM中加入700μl Buffer RWT(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱RM重新放回收集管中。
9、向吸附柱RM中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱RM重新放回收集管中。
10、重复步骤9。
11、12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱RM置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：此步骤的目的是将吸附柱RM中残留的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
12、将吸附柱RM转入新的无RNase离心管中，向吸附柱中间部位加入30-50μl RNase-Free Water，室温放置1分钟，室温 12000rpm离心1分钟，收集RNA溶液，得到的RNA溶液保存在-70℃，防止降解。
注意：
1)RNase-Free Water体积不应小于30μl，体积过小影响回收率。
2)如果要提高RNA的产量，可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤12。
3)如果要提高RNA浓度，可将得到的溶液重新加入到吸附柱RM中，重复步骤12。
储存条件：室温(15～30℃)。
关键词：miRNA Purification Kit,WE0195,miRNA提取试剂盒
更多有关北京miRNA提取试剂盒多少钱的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
| 编号 | 名称 |
| WE0358 | DyLight594标记山羊抗人IgG(H+L) |
| WE0309 | TMB底物显色试剂盒(可溶型，20×) |
| WE0187 | 土壤基因组提取试剂盒 |
| WE0114 | 2×BaHF MasterMix(含染料) |
| WE0205 | 磁珠法DNA纯化回收试剂 |
| WE0372 | HRP标记驴抗山羊IgG(H+L) |
| WE0314 | 免疫组化试剂盒(兔源一抗) |
| WE0285 | 0.5 M Tris-HCl缓冲液(pH6.8) |
| WE0279 | Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 |
| WE0313 | TBS(pH8.0,10×) |
| WE0143 | 快速实时荧光定量PCR预混体系(高含量ROX校正染料) |
| WE0328 | Annexin V-PE/7-AAD凋亡流式检测试剂盒 |
| WE0252 | DH5α感受态细胞 |
| WE0369 | RRX标记驴抗大鼠IgG(H+L) |
| WE0380 | 山羊抗兔IgG(H+L) |
| WE0365 | FITC标记驴抗兔IgG(H+L) |
| WE0332 | 抗c-Myc标签单克隆抗体 |
| WE0351 | 抗His标签多克隆抗体 |
| WE0282 | 多彩预染蛋白Marker |
| WE0156 | BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(高含量ROX校正染料) |
| WE0135 | SuperSYBR Mixture(高含量ROX校正染料) |
| WE0185 | 血块基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0100 | PCR Mix(含染料)(滴瓶装) |
| WE0213 | DNase I(不含RNase) |
| WE0123 | 高效热启动DNA聚合酶 |
| WE0404 | RNA样本保存液 |
| WE0134 | SuperSYBR Mixture(低含量ROX校正染料) |
| WE0373 | FITC标记山羊抗大鼠IgG(H+L) |
| WE0193 | 超纯RNA提取试剂盒(DNase I) |
| WE0251 | TOP10感受态细胞 |
| WE0386 | HRP标记链霉亲和素 |
| WE0165 | 酵母质粒提取试剂盒 |
| WE0267 | His标签蛋白纯化试剂盒(可溶性蛋白) |
| WE0289 | SDS-PAGE上样缓冲液(非还原，5×) |
| WE0341 | HRP标记抗His标签多克隆抗体 |
| WE0230 | 人基因组DNA定量试剂盒 |
| WE0310 | TBST(pH8.0,10×) |
| WE0170 | DNA产物快速纯化试剂盒 |
| WE0390 | AP标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
| WE0368 | FITC标记驴抗大鼠IgG(H+L) |
| WE0174 | 新型植物基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0337 | 抗Flag标签单克隆抗体 |
| WE0357 | 抗GAPDH多克隆抗体 |
| WE0182 | 水产动物基因组提取试剂盒 |
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